2019冠状病毒病大流行期间里约热内卢里约热内卢医院icu住院患者鼻腔定殖耐甲氧西林金黄色葡萄球菌:毒力和消毒耐受性的相关方面

Thaís Campos Macharete, Tamara Lopes Rocha de Oliveira, Evellyn Max Guedes, Gabriel Freire Igari, Andryelle Cristina de Sant'Ana, Claudia Regina da Costa, Adriana Lúcia Pires Ferreira, Simone Aranha Nóuer, Fernanda Sampaio Cavalcante, Kátia Regina Netto dos Santos
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Avaliar a prevalência de genes de virulência e a produção de biofilme, assim como a tolerância a saneantes em amostras MRSA isoladas de swabs nasais de vigilância de pacientes internados em UTIs de um hospital durante a pandemia. Métodos: A espécie foi confirmada por MALDI-TOF-MS. A confirmação da resistência à meticilina foi realizada por disco difusão e o tipo de SCCmec por PCR. A presença de genes associados a virulência [toxinas (pvl e cluster egc: seg, sei, sem, sen, seo) e adesinas (ebps, fnbpB, cna, bbp, sasX)] e a saneantes (qacA/B e smr) foram detectados por PCR. A formação de biofilme foi avaliada em placas de microtitulação. De um total de 10.408 pacientes internados entre setembro/2020 e setembro/2021 nas UTIs COVID (UTIc) e não-COVID (UTInc), 256 swabs foram positivos para S. aureus, sendo 79 da UTIc e 177 da UTInc. Entre as 93 (36,3%) amostras MRSA, 33 (41,8%, 33/79) eram da UTIc, e 57% destas carreavam o SCCmecIV enquanto 33% tinham o tipo II. 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摘要

金黄色葡萄球菌具有广泛的毒力因子和生物膜形成能力。甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的先前定植是侵袭性感染发展的危险因素,预后有限。在COVID-19大流行期间,抗菌素和消毒剂的使用增加,对微生物施加选择性压力,导致可能对这些制剂产生耐药性。评估大流行期间某医院icu住院患者鼻拭子分离的MRSA样本中毒力基因的流行程度和生物膜的产生以及对消毒剂的耐受性。方法:MALDI-TOF-MS鉴定。采用纸片扩散法确认甲氧西林耐药,采用PCR法确定SCCmec类型。PCR检测毒力相关基因[毒素(pvl和egc集群:seg, sei, sem, sen, seo)和粘连素(ebps, fnbpB, cna, bbp, sasX)]和消毒剂(qacA/B和smr)的存在。在微滴定板上评价生物膜的形成。在2020年9月至2021年9月期间在COVID - 19和非COVID - 19 icu住院的10408例患者中,256例拭子金黄色葡萄球菌阳性,79例来自icu, 177例来自icu。在93例(36.3%)MRSA样本中,33例(41.8%,33/79)来自icu, 57%携带SCCmecIV, 33%携带II型。60份(33.9%,60/177)MRSA样本中,78.3%和16.6%携带SCCmecIV和II, IV型与UTInc相关(p< 0.01)。50%以上的样品中检测到ebps、egc簇、fnbpB和cna毒力基因。fnbpB基因和egc簇与SCCmecII相关(p< 0.01), pvl基因与SCCmecIV相关(p< 0.01)。65.5%的样本中smr基因呈阳性,在icu中更为常见(p< 0.01)。在生物膜的产生方面,48.4%的样本分为强或中。研究表明,在大流行期间从icu分离的MRSA样本中,毒力和消毒耐受性基因的频率很高,许多样本具有很高的生物膜形成能力。这些方面表明,医院环境中可能存在选择性压力和样本传播,其中许多与SCCmec IV社区有关,以及需要制定战略,防止多重耐药样本的定植。
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STAPHYLOCOCCUS AUREUS RESISTENTE À METICILINA DE COLONIZAÇÃO NASAL DE PACIENTES INTERNADOS EM UTIS DE UM HOSPITAL DO RIO DE JANEIRO NA PANDEMIA DE COVID-19: ASPECTOS ASSOCIADOS À VIRULÊNCIA E À TOLERÂNCIA AOS SANEANTES
Staphylococcus aureus possui amplo repertório de fatores de virulência e capacidade de formação de biofilme. A colonização prévia por cepas de S. aureus Resistentes à Meticilina (MRSA) é fator de risco para desenvolvimento de infecções invasivas, que apresentam prognóstico reservado. Na pandemia de COVID-19 houve maior uso de antimicrobianos e saneantes, com pressão seletiva sobre os microrganismos, acarretando possível resistência a estes agentes. Avaliar a prevalência de genes de virulência e a produção de biofilme, assim como a tolerância a saneantes em amostras MRSA isoladas de swabs nasais de vigilância de pacientes internados em UTIs de um hospital durante a pandemia. Métodos: A espécie foi confirmada por MALDI-TOF-MS. A confirmação da resistência à meticilina foi realizada por disco difusão e o tipo de SCCmec por PCR. A presença de genes associados a virulência [toxinas (pvl e cluster egc: seg, sei, sem, sen, seo) e adesinas (ebps, fnbpB, cna, bbp, sasX)] e a saneantes (qacA/B e smr) foram detectados por PCR. A formação de biofilme foi avaliada em placas de microtitulação. De um total de 10.408 pacientes internados entre setembro/2020 e setembro/2021 nas UTIs COVID (UTIc) e não-COVID (UTInc), 256 swabs foram positivos para S. aureus, sendo 79 da UTIc e 177 da UTInc. Entre as 93 (36,3%) amostras MRSA, 33 (41,8%, 33/79) eram da UTIc, e 57% destas carreavam o SCCmecIV enquanto 33% tinham o tipo II. Entre as 60 (33,9%, 60/177) amostras MRSA da UTInc, 78,3% e 16,6% carreavam os SCCmecIV e II, respectivamente, sendo demonstrada uma correlação do tipo IV com a UTInc (p<0,01). Os genes de virulência ebps, cluster egc, fnbpB e cna foram detectados em mais de 50% das amostras. O gene fnbpB e o cluster egc foram associados ao SCCmecII (p<0,01), enquanto o gene pvl ao SCCmecIV (p<0,01). O gene smr foi positivo em 65,5% das amostras, sendo mais frequente na UTIc (p<0,01). Em relação à produção de biofilme, 48,4% das amostras foram classificadas como fortes ou moderadas. O estudo mostra alta frequência de genes de virulência e de tolerância à saneantes entre amostras MRSA isoladas nas UTIs durante a pandemia, além de muitas apresentarem alta capacidade de formação de biofilme. Esses aspectos indicam possível pressão seletiva e disseminação de amostras no ambiente hospitalar, muitas destas associadas à comunidade com SCCmec IV, e a necessidade de estratégias para prevenir a colonização por amostras multirresistentes.
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