hampei Hypothenemus (CURCULIONIDAE)中ARNi介导的几丁质合成酶表达的特征和降低

IF 0.5 4区 生物学 Q4 PLANT SCIENCES Acta Biologica Colombiana Pub Date : 2021-12-15 DOI:10.15446/abc.v27n2.89981
Gustavo Adolfo Ossa Ossa, Bernardo Villegas Estrada, Arnubio Valencia Jiménez
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摘要

咖啡蛀虫(Hypothenemus hampei)是一种害虫,对咖啡豆造成重大损害,给世界各地的生产者造成巨大的经济损失。与其他昆虫一样,咖啡钻需要几丁质合成酶(CHS)来生物合成几丁质,几丁质是昆虫外骨骼的主要成分,对昆虫的生长发育至关重要。在这项研究中,咖啡钻CHS1基因(HhCHS1)被识别、表征,然后使用rnai机制沉默,这一机制允许降解mrna并中断生物体中感兴趣的蛋白质的表达。通过RT-qPCR检测HhCHS1基因的表达谱,显示HhCHS1基因在不同发育阶段的表达水平存在差异。在第二阶段(L2)幼虫和成年雄性中表达水平最高。口服浓度为2µg/100µL的cdna在治疗7天后有效抑制HhCHS1基因(84%)。这些结果表明,HhCHS1基因在昆虫的发育中发挥着重要作用,因此可以作为一个目标,利用rnai开发新的害虫管理策略。关键词:cdna,咖啡,害虫,几丁质合成酶,RT-qPCR。
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CARACTERIZACIÓN Y DISMINUCIÓN EN LA EXPRESIÓN DE UNA QUITINA SINTASA MEDIADA POR ARNi EN Hypothenemus hampei (CURCULIONIDAE)
La broca del café, Hypothenemus hampei, es un insecto plaga que causa daños significativos al grano de café y grandes pérdidas económicas a los productores en todo el mundo. Al igual que otros insectos, la broca de café requiere de quitina sintasas (CHS) para la biosíntesis de la quitina, componente principal del exoesqueleto del insecto, y de vital importancia para su crecimiento y desarrollo. En este estudio, el gen CHS1 de la broca del café (HhCHS1) fue identificado, caracterizado y posteriormente silenciado mediante el uso de ARNi, mecanismo que permite degradar el ARNm e interrumpir la expresión de proteínas de interés en un organismo. Los perfiles de expresión del gen HhCHS1, medidos por RT-qPCR, mostraron niveles de expresión diferencial en las diferentes etapas del desarrollo del insecto. Los niveles más altos de expresión se encontraron en larvas de segundo estadio (L2) y machos adultos. El ARNcd administrado por vía oral, a concentraciones de 2 µg/100 µL, generó un silenciamiento efectivo del gen HhCHS1 (84 %) después de 7 días de tratamiento. Estos resultados sugieren que el gen HhCHS1 desempeña un papel importante en el desarrollo del insecto, y que, por ende, podría usarse como objetivo para desarrollar nuevas estrategias de manejo de este insecto plaga, mediante el uso de ARNi.  Palabras Clave: ARNcd, café, insecto plaga, quitina-sintasa, RT-qPCR.
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Acta Biologica Colombiana
Acta Biologica Colombiana Agricultural and Biological Sciences-General Agricultural and Biological Sciences
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