Immunomorphologic Methods in Routine Pathology. Application of Immunofluorescence and the Unlabeled Antibody-Enzyme (Peroxidase-Antiperoxidase) Technique to Formalin Fixed Paraffin Embedded Kidney Biopsies

Abstract

Immunofluorescence and the unlabeled antibody enzyme (peroxidase — antiperoxidase) method were applied to formalin fixed conventionally paraffin-embedded kidney biopsy material, and optimal working conditions are reported. Both methods were suitable for the demonstration of immunoglobulin and complement deposits within glomerula. They were equally sensitive on dewaxed pronase-treated sections. Pronase treatment decreased nonspecific background fluorescence and increased the sensitivity of both immunomorphologic techniques, possibly by enhancing antigenicity.

Immunfluoreszenz und die „unlabeled antibody-enzyme (peroxidase-antiperoxidase)“-Methode wurden an formalinfixiertem, konventionell in Paraffin eingebettetem Nierenbiopsiematerial ausgetestet, und optimale Reaktionsbedingungen werden beschrieben. Beide Methoden waren zur immunmorphologischen Darstellung von Immunglobulin und Komplement bei Glomerulonephritis geeignet und an entparaffinierten, pronasebehandelten Gewebsschnitten gleich sensitiv. Durch Behandlung der Schnitte mit Pronase wurden die unspezifische Backgroundfluoreszenz deutlich vermindert und die Sensitivität beider immunmorphologischer Methoden deutlich gesteigert. Die Ursache für den Pronaseeffekt könnte in einer Erhöhung der Antigenität im Gewebe liegen.