Intérêt et applications de la cytométrie de flux en bactériologie médicale

Abstract

Objectifs

Faire le point sur les principes de la cytométrie de flux (CMF), l’intérêt de son utilisation en bactériologie et fournir un exemple d’application.

Paramètres bactériens analysables en CMF

La CMF permet d’étudier de nombreux paramètres, parmi lesquels le potentiel de membrane, l’intégrité membranaire, des activités enzymatiques, certaines structures nucléaires ou antigéniques, et le niveau d’expression de certains gènes grâce à l’utilisation de gènes rapporteurs fluorescents.

Exemple d’application

La CMF a permis d’analyser l’expression de la résistance aux glycopeptides chez Enterococcus faecalis, grâce à la construction de souches portant un gène codant pour une green fluorescent protein (GFP) en aval du promoteur des gènes de résistance.

Conclusion

La CMF est une technique qui, par ses caractéristiques telles que rapidité, reproductibilité, spécificité et capacité à produire des analyses multiparamétriques sur des cellules individuelles, semble tout à fait intéressante pour compléter les connaissances structurelles, physiologiques et antigéniques que la microscopie optique et électronique ainsi que les techniques classiques de microbiologie n’étudient qu’en partie.

Objectives

To review the principles and contribution of flow cytometry to bacterial analysis, and to show an example of application.

Bacterial parameters studied by flow cytometry

Flow cytometry can study many bacterial parameters, such as the membrane potential, membrane integrity, enzymatic activities, some nucleic and antigenic structures, and the level of expression of many genes, using fluorescent reporter systems.

Example

Flow cytometry contributed to the analysis of glycopeptide resistance gene expression in Enterococcus faecalis, using a green fluorescent protein (GFP) as a reporter system.

Conclusion

Flow cytometry is rapid and can provide reproducible, specific and multiparametric analyses on single cells, which may complete the knowledge on structural, physiological and antigenic bacterial properties.