CircDCBLD2通过促进STUB1介导的PARK7泛素化降解来调节铁变态反应，从而减轻肝纤维化程度

摘要 背景 肝纤维化如不治疗可发展为肝硬化和肝癌。研究发现，CircDCBLD2在肝纤维化中下调。然而，其确切的内在机制还需要进一步研究。 方法 采用 qRT-PCR、Western 印迹和免疫组化检测相关分子水平。采用 HE、Masson 三色和天狼星红染色法评估小鼠肝组织的病理变化。使用流式细胞分析和商业试剂盒评估脂质活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）和铁的水平。细胞活力由 MTT 评估。免疫沉淀用于研究 PARK7 的泛素化。通过免疫染色和共聚焦成像测定丝裂噬。RIP和Co-IP试验用于评估circDCBLD2/HuR、HuR/STUB1和STUB1/PARK7的相互作用。荧光原位杂交和免疫荧光染色用于评估 circDCBLD2 和 HuR 的共定位。 结果 肝纤维化时，circDCBLD2下调，而PARK7上调。在肝星状细胞（HSCs）和肝纤维化小鼠中，铁素激活剂增加了circDCBLD2，同时降低了PARK7。在麦拉宁处理的造血干细胞中，circDCBLD2的过表达降低了细胞活力和GSH、PARK7及GPX4的表达，同时增加了MDA和铁的水平，而circDCBLD2的敲除则产生了相反的效果。CircDCBLD2的过表达通过促进HuR-STUB1的结合从而增加STUB1 mRNA的稳定性，从而增加STUB1介导的PARK7泛素化。PARK7过表达或HuR敲除可逆转circDCBLD2过表达对造血干细胞活化和铁变态反应的影响。CircDCBLD2 通过抑制 PARK7 减少了小鼠肝纤维化。 结论 CircDCBLD2过表达通过上调STUB1与HuR的相互作用，增加PARK7泛素化降解，抑制造血干细胞活化，促进造血干细胞铁嗜性，最终促进肝纤维化。