拮抗根瘤菌对鸽子豆枯萎病镰刀菌的水解基因

摘要 鸽子豆受到多种病害的侵袭，其中包括由镰刀菌引起的鸽子豆枯萎病。这种病是鸽子豆的一种严重病原菌。本研究旨在确定潜在的枯萎病生物控制剂，作为杀真菌剂的替代品。通过双重培养法评估了 47 个分离物对 F. udum 的拮抗活性。在离体条件下，在马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）中研究了 F. udum 与拮抗细菌的相互作用，并使用扫描电子显微镜观察了真菌菌丝的裂解情况。在 PDB 中与根瘤菌共同接种 3 天后，记录 F. udum 菌丝的干重。潜在的拮抗细菌分离物被进一步用于体外条件下的酶测定。细菌的分子特征描述是通过使用几丁质酶和 1,3-葡聚糖酶相关基因等水解基因的引物完成的，引物分别扩增了 402 和 750 bp。在用于评估其拮抗活性的 47 个细菌分离物中，只有 8 个分离物，即淀粉芽孢杆菌 CFLB 31、韦勒兹芽孢杆菌 CFLB 24、枯草芽孢杆菌 CFLB 11、根瘤嗜血杆菌 CFLB 26、嗜马粪单胞菌 CFLB 47、微小杆菌 CFLB 28、烟草芽孢杆菌 CFLB 18 和假关节杆菌 CFLB 36 在双培养板试验中对 F. udum 表现出良好的拮抗活性，抑制率为 70-84%。在体外条件下，发现三种芽孢杆菌（淀粉芽孢杆菌、维氏芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌）和嗜麦芽糖酵母菌 CFLB 47 是对 F. udum 最有效的生物控制剂。真菌和细菌在 PDA 上相互作用时，真菌菌丝也被溶解。对这些分离物进行了水解酶活性筛选，结果表明它们在体外条件下产生果胶酶、蛋白酶和纤维素酶的能力呈阳性。这些分离菌株分别扩增了 402 和 750 bp 的几丁质酶和β-1, 3-葡聚糖酶相关基因。此外，细菌菌株在 PDB 中共同接种后，F. udum 的菌丝重量减少了 58.42% - 86.84%。不过，淀粉芽孢杆菌的生物量减少率最高，达 86.84%。细菌处理被认为是有益的、自然友好的。研究结果表明，这八种潜在菌株及其水解酶的特性使它们有望控制鸽子豆枯萎病。