Detecção de antígenos em cortes parafinados de vermes e caramujos infectados por Angiostrongylus cantonensis pela reação de imunofluorescência

Felipe Correa Rezende de Souza, Leyva Cecília Vieira de Melo, C. Kanamura, Daniela Gonzaga Da Mota, Silvia Gabriel Chiodelli, Pedro Luiz Silva Pinto
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Abstract

A Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) foi utilizada para localizar antígenos em estruturas estágio-específicas em cortes parafinados de vermes fêmeas e em tecidos de caramujos do Gênero Biomphalaria infectados com larvas de terceiro estágio de Angiostrongylus cantonensis. Soros de casos confirmados de meningite eosinfílica foram usados para avaliação da reatividade. Soros não reagentes de casos suspeitos; de pacientes com outras parasitoses e de indivíduos sem outras etiologias foram utilizados como controle de reatividade cruzada. Anticorpos da classe IgG foram reativos para antígenos presentes nos dois estágios e, anticorpos IgM somente para o estágio larvário. Nos cortes de vermes, as marcações fluorescentes foram assinaladas nas cutículas e estruturas internas, com acentuada marcação para os conteúdos uterinos. Nos tecidos dos caramujos as larvas foram encontradas exclusivamente no interior dos granulomas, com marcações fluorescentes nas  cutículas das larvas e no interior dos tecidos granulomatosos. O padrão de fluorescência no granuloma sugere a marcação de antígenos excretores/secretores. Reatividade cruzada mais expressiva ocorreu com anticorpos presentes em soros de pacientes com outras parasitoses, com destaque para estrongiloidíase. A RIFI em cortes parafinados abre novas perspectivas para identificação de antígenos e de marcadores sorológicos, que possam ser aplicados no aprimoramento do diagnóstico laboratorial da meningite eosinofílica.
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免疫荧光法检测广州管圆线虫感染的蠕虫和蜗牛石蜡切片中的抗原
摘要采用间接免疫荧光法(ifa)对感染广州管圆线虫第三期幼虫的双phalaria属蜗牛的雌虫石蜡切片和组织中的阶段特异性结构进行抗原定位。用确诊的嗜酸性脑膜炎病例血清评估反应性。疑似病例的非反应性血清;来自其他寄生虫病患者和无其他病因的个体作为交叉反应对照。IgG类抗体对两个阶段的抗原都有反应,IgM抗体仅对幼虫阶段有反应。在蠕虫切割中,角质层和内部结构上有荧光标记,子宫内容物有明显标记。在蜗牛组织中,幼虫仅在肉芽肿内发现,幼虫角质层和肉芽肿组织内有荧光标记。肉芽肿的荧光模式表明排泄/分泌抗原的标记。最显著的交叉反应发生在其他寄生虫病患者血清中的抗体,特别是圆线虫病。石蜡切片的ifat为抗原和血清学标记物的鉴定开辟了新的前景,可用于改进嗜酸性脑膜炎的实验室诊断。
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