الموت الخلوى المبرمج الفعال عن طريق الجمع التآزري لاثنين من محفزات الالتهام الذاتى ؛ السيراميد قصير السلسلة وتجويع الاحماض الامينية فى خلايا HL/60 ADR

Abstract

تركز الدراسة الحالية على موت الخلايا المبرمج الناجم عن محفزين مختلفين للبلعمة الذاتية.السيراميد قصير السلسلة (C2Cer) وتجويع الأحماض الأمينية على خلايا سرطان الدم البشرية بروميلوسيتيك المقاومة للعقاقير المتعددة ، خط الخلايا HL 60 / ADR. تم تحفيز البلعمة الذاتية بواسطة كل محفز بمفرده أو معًا. أظهرت النتائج أن C2 Cer كان أكثر فاعلية في تحريض البلعمة الذاتية مقارنةً بتجويع الأحماض الأمينية كما تم تحديده من صبغة البلعمة الذاتية (MDC) والكشف المناعي لبروتينات البلعمة الذاتية (mTOR ، pmTOR و LC3). أدى مزيج كل من المحفزين معا إلى موت الخلايا بشكل أكثر كفاءة من كل محفز وحده. وجد أن كلا من C2 Cer وتجويع الأحماض الأمينية معا قد عزز موت الخلايا المبرمج الناجم عن البلعمة الذاتية بعد نقطة زمنية حرجة. كانت الإشارات التى تدل على الموت المبرمج و التي تم الحصول عليها من مزيج كل من المحفزين أقوى وأكثر كفاءة مقارنة بكل محفز بمفرده كما دلت على ذلك دراسة التغيرات فى مورفولوجيا النواة بصبغ DAPI وايضا عن طريق فحص حيوية الخلايا عن طريق كشف ال MTT واخيرا عن طريق الكشف المناعى البروتينى لبروتين Caspase3 المنشق. وقد دلت النتائج ان البلعمة الذاتية التي يسببها كل محفز تعمل كآلية للوقاية الخلوية وقد تم التأكد من هذا عن طريق تثبيط البلعمة الذاتية بواسطة عقارbafilomycin A1 ،فعند تثبيط البلعمة الذاتية تم الحصول على موت خلوى اقوى بالمقارنة فى حالة عدم تثبيط البلعمة الذاتية وتم التأكد من هذا عن طريق دراسة حيوية الخلايا بطريقة MTT و الكشف المناعى البروتينى لبروتين Caspase3 المنشق. في الختام ، باستخدام اثنين من محفزات البلعمة الذاتية معا يؤدي إلى تقوية البلعمة الذاتية الى حد يفوق قدرة البلعمة الذاتية فى حماية الخلايا من الموت المبرمج ، وبالتالي يمكن الحصول على المزيد من موت الخلايا المبرمج في حالة الخلايا السرطانية المقاومة للعقاقير المتعددة.