Trace level quantification of N-nitrosorasagiline in rasagiline tablets by LC-TQ-MS/MS

Parkinson's disease is a chronic, progressive neurological disease that currently affects about more than 10 million population worldwide. Rasagiline is a selective, irreversible monoamine oxidase type B inhibitor used as monotherapy in early Parkinson's disease. Rasagiline tablets have been recalled from market due to the presence of unacceptable levels of nitrosamine impurity. European Medical Agency has set up very stringent limit 100 ng/day of N-nitrosorasagiline (NSRG) in drug product based on its mutagenicity. The analytical methods need to be sufficiently sensitive in order to adequately detect and quantify trace levels of NSRG. A highly sensitive LC-MS/MS method for determination of NSRG in rasagiline tablet formulation was developed by effectively separating on zorbax eclipse XDB C18 column using 0.1% formic acid in mixture of water and acetonitrile (35:65 v/v) in an isocratic mode at 0.5 mL/min flow rate. The measurement of NSRG was performed using triple quadrupole mass detection accompanied by electrospray ionization in the multiple reaction monitoring mode. The validation of the method was comprehensive, demonstrating strong linearity across the concentration spectrum of 2 to 200 ng/mL for NSRG. The obtained correlation coefficient exceeded 0.998, signifying a robust relationship. Recoveries spanning from 80.0% to 120.0% for NSRG were deemed satisfactory. The developed method was able to detect and quantitate NSRG at a concentration level of 1 to 2 ng/mL respectively (1 to 2 ppm with respect to 1 mg/mL of rasagiline tablet sample concentration). The developed and validated method can be employed for routine quality control testing of rasagiline tablets.

La maladie de Parkinson est une maladie neurologique chronique et progressive qui touche actuellement plus de 10 millions de personnes dans le monde. Le rasagiline est un inhibiteur sélectif et irréversible de la monoamine oxydase de type B utilisé en monothérapie dans la maladie de Parkinson précoce. Les comprimés de rasagiline ont été rappelés du marché en raison de la présence d’un niveau inacceptable d’impureté de nitrosamine. L’Agence médicale européenne a établi une limite très stricte de 100 ng/jour de N-nitrosorasagiline (NSRG) dans le produit médicamenteux en raison de sa mutagénicité. Les méthodes analytiques doivent être suffisamment sensibles pour détecter et quantifier de manière adéquate les niveaux de trace de NSRG. Une méthode LC-MS/MS hautement sensible pour la détermination du NSRG dans la formulation des comprimés de rasagiline a été développée en séparant efficacement sur une colonne Zorbax Eclipse XDB C18 en utilisant 0,1 % d’acide formique dans un mélange d’eau et d’acétonitrile (35:65 v/v) en mode isocratique à un débit de 0,5 mL/min. La mesure du NSRG a été réalisée en utilisant une détection de masse en triple quadrupôle accompagnée d’une ionisation par électrospray en mode de surveillance de réaction multiple. La validation de la méthode a été complète, démontrant une forte linéarité sur l’ensemble de la gamme de concentration de 2 à 200 ng/mL pour le NSRG. Le coefficient de corrélation obtenu dépassait 0,998, ce qui indique une relation robuste. Les récupérations s’étendant de 80,0 % à 120,0 % pour le NSRG ont été jugées satisfaisantes. La méthode développée a été capable de détecter et de quantifier le NSRG à un niveau de concentration de 1 à 2 ng/mL respectivement (1 à 2 ppm par rapport à 1 mg/mL de concentration d’échantillon de comprimé de rasagiline). La méthode développée et validée peut être utilisée pour les tests de routine de contrôle de qualité des comprimés de rasagiline.