假单胞菌N176在大肠杆菌中高效生产头孢菌素酰化酶的途径

Yuji Noguchi, Hisashi Yamada, Michitaka Yamaguchi, Katsuyuki Watanabe, Takao Fujimura, Yoshinori Ishii, Yoshimasa Saito
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摘要

使用大肠杆菌JM109pCK305S优化N176头孢菌素酰化酶生产的培养条件,该大肠杆菌编码高表达突变体C305S,其中Cys305在trp启动子的控制下被改变为Ser。在体内将前体蛋白加工成双链活性形式是高水平生产该酶的关键因素。活性酰化酶在以下条件下大量产生:(i)在第二种子培养基中添加Trp,(ii)使用甘油作为碳源,(iii)在9小时用IAA诱导,以及(iv)诱导后培养温度从25℃降至22.5℃。在这些高水平的生产条件下,发现600nm处的OD与菌落形成单位(CFU)的数量成比例地增加,表明CFU是活性酶表达的重要指标。
本文章由计算机程序翻译,如有差异,请以英文原文为准。
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