羊驼皱胃组织酶提取物对牛奶的凝血活性

IF 0.6 Q3 MULTIDISCIPLINARY SCIENCES Revista Investigaciones Altoandinas-Journal of High Andean Research Pub Date : 2023-01-31 DOI:10.18271/ria.2023.493
F. R. Mujica Lengua, Jack Edson Hernández Mavila
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摘要

在秘鲁和玻利维亚的高安第斯社区,羊驼凝乳酶在手工牛奶奶酪生产中的经验使用很普遍,但没有科学报道。本研究的目的是对羊驼凝乳酶进行表征,并评价其凝血活性。直接从维斯卡帕尔卡四个社区(万卡维利卡-秘鲁,4003米)的奶酪工厂收集准备使用的羊驼凝乳酶;它们在冷藏中运输,并保持在-20°C的冷冻状态。粗酶提取物(EEC), 560 × g, 4°C离心10 min;通过Bradford、SDS-PAGE电泳谱、凝固时间和蛋白水解活性测定蛋白质。本文还介绍了羊驼凝乳酶的传统处理方法。EEC被发现含有29.80 - 52.91 mg/ml的蛋白质。SDS-PAGE电泳图谱显示至少存在7种不同的蛋白质,分子量在91.6 KDa和15.3 KDa之间;结果表明,牛源性蛋白质含量最高,分别为18.4 KDa和15.3 KDa,分别对应凝乳酶和胃蛋白酶,分子量均低于牛源性蛋白质。在试验条件下,混凝时间为23 min;在pH 5.5时,蛋白水解活性最高。这些结果将有助于进一步研究羊驼凝乳酶的分子特征,之前纯化的蛋白质存在柱层析。
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Actividad coagulante del extracto enzimático de tejido abomasal de alpaca sobre leche bovina
El uso empírico del cuajo de alpaca en la elaboración de quesos artesanales con leche de vaca se encuentra extendido en las comunidades altoandinas del Perú y Bolivia, y no está siendo reportado científicamente. El objetivo del presente estudio fue caracterizar al cuajo de alpaca y evaluar su actividad coagulante. Se colectaron cuajos de alpaca listos para ser usados, directamente de las queserías de cuatro barrios de Viscapalca (Huancavelica-Perú, 4003 msnm); fueron transportados en refrigeración y mantenidos en congelación a -20°C. El Extracto Enzimático Crudo (EEC) se obtuvo por centrifugación a 560 x g por 10 min a 4°C; a partir de él se determinó proteínas por Bradford, perfil electroforético SDS-PAGE, tiempo de coagulación y actividad proteolítica. Se describe también el manejo tradicional del cuajo de alpaca. Se encontró que el EEC contiene 29,80 a 52,91 mg/ml de proteína. El perfil electroforético SDS-PAGE reveló la presencia de por lo menos siete proteínas diferentes, con pesos moleculares entre 91,6 KDa y 15,3 KDa; las más abundantes eran las proteínas de 18,4 KDa y 15,3 KDa, que corresponderían a quimosina y pepsina, respectivamente, ambas de menor peso molecular en comparación con las de origen bovino. El tiempo de coagulación fue 23 min, bajo las condiciones del ensayo; y la mejor actividad proteolítica se registró a pH 5,5. Estos resultados facilitarán más estudios sobre la caracterización molecular del cuajo de alpaca, purificadas previamente las proteínas presentes por cromatografía en columna.
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