实施蚊子黄病毒检测系统

F. Cardozo, A. Rojas, Cynthia Bernal, Luis Ferreira, Adrián Díaz, Malvina Páez, Yvalena Guillén, M. Contigiani, Laura Mendoza
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Primero, se organizaron capacitaciones en colecta, preparación de pools y procesamiento por técnicas de RT-PCRs convencionales realizadas por expertos internacionales a profesionales locales (bioquímicos y biólogos). Además, se implementaron planillas de registro de datos y de control de transporte de muestras de los lugares de colectas hasta el IICS-UNA. Se prepararon en total 201 pools de 1 a 35 mosquitos cada uno agrupados por especie, localidad, entre otros criterios. Para asegurar la integridad del RNA extraído se realizó la detección de un control interno (Actina-1), siendo todos los pools positivos para el mismo, 91/201 pools fueron positivos para flavivirus. Se realizó la secuenciación de 19/91 pools positivos para flavivirus identificándose flavivirus de insectos (detectándose principalmente Culex Flavivirus, cell fusing agents Flavivirus y Kamiti river virus), evidenciando la elevada distribución de estos virus. 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摘要

黄病毒是节肢动物传播的病毒,主要是蚊子。它们可以在人类和动物中产生疾病,还包括昆虫特有的病毒,这些病毒只在昆虫中感染和复制,而不是在脊椎动物中。在巴拉圭,在人类感染中发现了登革热、黄热病和寨卡病毒,但对蚊子的黄病毒研究仍然很少。因此,本研究的目的是在iic - una中实施一套检测蚊子黄病毒的系统。首先,由国际专家对当地专业人员(生物化学家和生物学家)进行收集、池制备和常规rt - pcr技术处理方面的培训。此外,还实施了数据记录和样本从采集地点运输到IICS-UNA的控制表格。本研究的目的是确定蚊子种群的分布和分布情况,并确定蚊子种群的分布情况。为了确保提取RNA的完整性,检测了一个内部对照(actin -1),所有池均呈阳性,91/201池均为黄病毒阳性。对19/91黄病毒阳性池进行测序,鉴定出昆虫黄病毒(主要检测到库蚊黄病毒、细胞融合剂黄病毒和卡米蒂河病毒),表明这些病毒分布广泛。这些结果表明,在蚊子中实施黄病毒检测系统是可行的,有助于加强对这些病毒的监测和控制,以及对昆虫黄病毒生态重要性的认识。
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Implementación de un sistema de detección de flavivirus en mosquitos
Los Flavivirus constituyen virus transmitidos por artrópodos, principalmente mosquitos. Pueden producir enfermedades en humanos y animales, también incluyen virus específicos de insectos que solo infectan y se replican en los insectos, no así en vertebrados. En Paraguay los virus dengue, fiebre amarilla y Zika fueron detectados en infecciones humanas, pero los estudios de flavivirus en mosquitos son aún escasos. Por ello, el objetivo del presente estudio fue implementar un sistema de detección de flavivirus en mosquitos en el IICS-UNA. Primero, se organizaron capacitaciones en colecta, preparación de pools y procesamiento por técnicas de RT-PCRs convencionales realizadas por expertos internacionales a profesionales locales (bioquímicos y biólogos). Además, se implementaron planillas de registro de datos y de control de transporte de muestras de los lugares de colectas hasta el IICS-UNA. Se prepararon en total 201 pools de 1 a 35 mosquitos cada uno agrupados por especie, localidad, entre otros criterios. Para asegurar la integridad del RNA extraído se realizó la detección de un control interno (Actina-1), siendo todos los pools positivos para el mismo, 91/201 pools fueron positivos para flavivirus. Se realizó la secuenciación de 19/91 pools positivos para flavivirus identificándose flavivirus de insectos (detectándose principalmente Culex Flavivirus, cell fusing agents Flavivirus y Kamiti river virus), evidenciando la elevada distribución de estos virus. Estos resultados demuestran que fue factible implementar el sistema de detección de flavivirus en mosquitos, lo cual podría contribuir a fortalecer la vigilancia y control de estas virosis, así como el conocimiento sobre la importancia ecológica de flavivirus de insectos.
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