30 Hz微振动对体外培养的颅骨成骨细胞和骨髓成骨细胞中IL-17和RANKL表达的影响

S. García López, R. E. Villanueva Arriaga, José Luis Pérez Vázquez, Luis Iván Juárez Noriega, Aracely Paéz Arenas, Luis Felipe Massó, Murray C. Meikle
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Material y métodos: Osteoblastos derivados del cráneo del ratón Balb/C fueron sembrados en cajas de 24 pozos de 1.5 cm (Gybco, EUA) en un medio de cultivo DMEM F-12 (ATCC, EUA) y osteoclastos derivados de células madre de la tibia de ratón fueron sembrados en cajas de 24 pozos de 1.5 cm en un medio de cultivo α-MEM (ATCC, EUA), adicionando 0.5 μL/mL de 1α, 25-dihidroxivitamina D3 (Sigma-Aldrich, EUA). Ambos medios de cultivo fueron suplementados con 10% de suero fetal bovino (Gybco, EUA), 1% de antibióticos y antimicóticos, en una incubadora de tejidos (NuAire, EUA) a una atmósfera de 5% de CO2 y 95% de airea una temperatura de 37 o C. Posteriormente, las células cultivadas se sometieron a microvibraciones (0.25 N; 30 Hz) con el aparato AcceleDent (Ortho Accel, EUA) durante 20 minutos. Antes y después de las microvibraciones se recolectaron 500 μL de sobrenadante de las células, el cual fue almacenado en un ultracongelador a -70 oC (Thermo, EUA) para posteriormente determinar la expresión de IL -17 y RANKL (Peprotech, Rocky Hill, NJ, EUA) por medio del ensayo de ELISA. Resultados: La microvibración mostró una sobrerregulación estadísticamente significativa en la alteración de IL-17 tanto en los cultivos de osteoblastos como el de los osteoclastos comparada con el grupo control. Sin embargo, en los osteoclastos y osteoblastos hubo una bajorregulación estadísticamente significativa de la expresión de RANKL comparada con el grupo control. Conclusión: El estudio demostró que tanto osteoblastos como osteoclastos cultivados in vitro sometidos a microvibración de 30 Hz durante 20 minutos producen factores solubles relacionados con la maduración e inhibición osteoclástica","PeriodicalId":101118,"journal":{"name":"Revista Mexicana de Ortodoncia","volume":"1 1","pages":""},"PeriodicalIF":0.0000,"publicationDate":"2019-09-10","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":"0","resultStr":"{\"title\":\"Efectos de la microvibración a 30 Hz sobre la expresión de IL-17 y RANKL en células osteoblásticas derivadas del cráneo y osteoclastos derivados de la médula ósea cultivadas in vitro\",\"authors\":\"S. García López, R. E. Villanueva Arriaga, José Luis Pérez Vázquez, Luis Iván Juárez Noriega, Aracely Paéz Arenas, Luis Felipe Massó, Murray C. 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摘要

前言:在骨质疏松患者中使用微振动治疗已被证明可诱导骨骼外皮质重塑,可能是由于抑制破骨细胞活动。目的:评价30 Hz微振动20分钟对成骨细胞和破骨细胞的影响,以确定IL-17和RANKL的表达。材料和方法:Osteoblastos衍生的头骨鼠标Balb / C在作物井1.5厘米(Gybco 24箱,美国)种植环境的DMEM F-12 (ATCC、美国)和胫骨干细胞所得osteoclastos鼠标被作物中的24箱水井1.5厘米的培养基,α-MEM (ATCC、美国),0.5μL /毫升1α25-dihidroxivitamina D3 (Sigma-Aldrich、美国)。两种培养媒介都莱索托与10%胎儿牛血清(美国Gybco)抗生素和antimicóticos的1%,美国孵化器组织(NuAire) 5% CO2的气氛和95%空气调节温度37或c .随后,培养细胞被microvibraciones (0.25 N;30赫兹),使用AcceleDent (Ortho Accel,美国)20分钟。之前和之后的microvibraciones sobrenadante采集500μL的细胞,这是存储在一个ultracongelador -70 ol (Thermo,美国)用于确定-17伊利诺和RANKL表达(Peprotech,岩石山,NJ,美国通过试验(ELISA)。结果:与对照组相比,微振动在成骨细胞培养和破骨细胞培养中IL-17的改变有统计学意义。然而,在破骨细胞和成骨细胞中,与对照组相比,RANKL表达的下调有统计学意义。结论:研究表明,体外培养的成骨细胞和破骨细胞在30 Hz微振动20分钟下均能产生与破骨细胞成熟和抑制相关的可溶性因子
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Efectos de la microvibración a 30 Hz sobre la expresión de IL-17 y RANKL en células osteoblásticas derivadas del cráneo y osteoclastos derivados de la médula ósea cultivadas in vitro
Introducción: Se ha demostrado que utilizar el tratamiento de microvibración en pacientes con osteoporosis induce remodelación en la cortical externa del esqueleto, quizá debido a la inhibición de la actividad osteoclástica. Objetivo: Evaluar los efectos de la microvibración durante 20 minutos a 30 Hz en células osteoblásticas y osteoclásticas para determinar la expresión de IL-17 y RANKL. Material y métodos: Osteoblastos derivados del cráneo del ratón Balb/C fueron sembrados en cajas de 24 pozos de 1.5 cm (Gybco, EUA) en un medio de cultivo DMEM F-12 (ATCC, EUA) y osteoclastos derivados de células madre de la tibia de ratón fueron sembrados en cajas de 24 pozos de 1.5 cm en un medio de cultivo α-MEM (ATCC, EUA), adicionando 0.5 μL/mL de 1α, 25-dihidroxivitamina D3 (Sigma-Aldrich, EUA). Ambos medios de cultivo fueron suplementados con 10% de suero fetal bovino (Gybco, EUA), 1% de antibióticos y antimicóticos, en una incubadora de tejidos (NuAire, EUA) a una atmósfera de 5% de CO2 y 95% de airea una temperatura de 37 o C. Posteriormente, las células cultivadas se sometieron a microvibraciones (0.25 N; 30 Hz) con el aparato AcceleDent (Ortho Accel, EUA) durante 20 minutos. Antes y después de las microvibraciones se recolectaron 500 μL de sobrenadante de las células, el cual fue almacenado en un ultracongelador a -70 oC (Thermo, EUA) para posteriormente determinar la expresión de IL -17 y RANKL (Peprotech, Rocky Hill, NJ, EUA) por medio del ensayo de ELISA. Resultados: La microvibración mostró una sobrerregulación estadísticamente significativa en la alteración de IL-17 tanto en los cultivos de osteoblastos como el de los osteoclastos comparada con el grupo control. Sin embargo, en los osteoclastos y osteoblastos hubo una bajorregulación estadísticamente significativa de la expresión de RANKL comparada con el grupo control. Conclusión: El estudio demostró que tanto osteoblastos como osteoclastos cultivados in vitro sometidos a microvibración de 30 Hz durante 20 minutos producen factores solubles relacionados con la maduración e inhibición osteoclástica
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