一种高特异性且高灵敏性的利用CRISPR-Cas12a的激活和反式切割特性的三错配检测方法
GeneDiscover Hub
2024-12-21 07:00
文章摘要
本文介绍了一种基于CRISPR-Cas12a系统的高特异性且高灵敏性的三错配检测方法(TMD)。该方法通过设计特定的crRNA和报告基因,利用Cas12a的激活和反式切割特性,能够有效区分野生型(WT)和突变型(MT)DNA。实验结果表明,TMD方法在区分WT和MT时具有较高的DF值(最高可达7.5),并能检测到低至0.0001%的突变丰度。在15例临床样本测试中,TMD与NGS测序结果高度一致,验证了其准确性。该方法不仅在癌症早期检测中具有重要应用,还在疾病监测和治疗评估等领域展现出良好的前景。
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