CRISPR-Cas中任意拼接的crRNA工程策略用于直接定量超短RNA

本文介绍了一种新的crRNA工程策略，用于检测长度仅为6-8个核苷酸的超短RNA。传统的RNA定量方法在检测这些微小RNA时存在灵敏度低和操作复杂的问题。作者提出的任意拼接的crRNA工程策略通过将Cas12a crRNA从任意位置切割生成截短的crRNA，并结合DNA激活剂，有效激活Cas12a的反式切割活性，从而实现对短RNA的高灵敏度和高特异性检测。实验结果表明，该策略在检测长度为9nt的let-7a RNA时展现出更强的荧光信号，并能检测到长度仅为8nt的p8 6s-1 RNA，这是现有CRISPR-Cas系统无法实现的。该策略为短RNA的检测提供了一种灵敏、简单且可靠的方法，并具有高选择性，能够实现对靶标的高特异性检测。