J. Am. Chem. Soc.｜细胞内质谱结合紫外光解离技术揭示细胞内蛋白异质性

本文介绍了一种结合细胞内质谱（in-cell MS）和紫外光解离（UVPD）技术的新策略，用于研究活细胞内蛋白质的构象异质性。研究通过诱导电喷雾电离（iESI）直接从大肠杆菌细胞中释放和电离蛋白质，并利用193 nm UVPD分析蛋白质不同构象的结构特征。研究重点分析了钙调蛋白（CaM）在细胞内环境中的构象变化，发现细胞内环境对CaM的构象分布和Ca²⁺结合有显著影响。UVPD技术提供了高分辨率的结构信息，揭示了扩展和紧凑构象CaM在Ca²⁺结合偏好和构象动力学上的显著差异。该方法为研究细胞内蛋白质异质构象提供了新思路，并为探索蛋白质结构-功能关系及其在生命系统中的动态行为开辟了新途径。