EXPRESSÃO MIOCÁRDICA RELACIONADA À CINÉTICA DO CÁLCIO EM ANIMAIS COM EXPOSIÇÃO PRÉ-NATAL AO ÁLCOOL

Abstract

Introdução: A exposição alcoólica pré-natal (E.P.A.) é considerada uma das principais responsáveis pelas alterações congênitas humanas. No sistema cardiovascular, a E.P.A. pode levar a alterações na expressão de genes relacionados à homeostase cardiovascular. Estudos têm mostrado que miócitos cardíacos expostos ao etanol durante a embriogênese não amadurecem morfológica ou funcionalmente, bem como apresentam alterações no transporte e captação/ligação de Ca2+ pelo retículo sarcoplasmático (SR). Uma diminuição da concentração citosólica de Ca2+ resultante do um efeito inibitório do álcool nas proteínas reguladoras desse íon pode resultar em diminuição do volume sistólico e alterações na frequência cardíaca. Objetivo: Analisar o impacto da E.P.A. na ativação da via de transdução de sinal da cinética do cálcio pela análise da expressão de RNA mensageiro de componentes desta via. Materiais e Métodos: O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética no Uso de Animais (CEUA = 9355120319 ID 000115). Foram utilizados camundongos isogênicos da linhagem C57Bl/6. As fêmeas progenitoras foram separadas e randomizadas no grupo controle (n=4) e no grupo de exposição ao álcool (n=11). O protocolo do grupo E.P.A. durante a gestação, foi a exposição do álcool na proporção de 10% (v/v) diluídos em água de consumo. Após 45 dias, 10 filhotes de cada grupo (n=20) foram anestesiados com isoflurano (<20 seg.) e decapitados. O ventrículo esquerdo (VE) foi coletado e tratado. A expressão relativa foi obtida por técnica RT-qPCR utilizando placas customizadas TaqMan®, sendo utilizado como controle endógeno o gene rRNA 18S. A estatística foi calculada com a aplicação IBM SPSS Statistics for Windows, Version 25.0. (Armonk, NY: IBM Corp., 2017); A normalidade foi testada através do teste de Shapiro-Wilk e os dados representados por média ± EPM. Comparação entre grupos: Teste T para amostras independentes sendo considerado o valor de significância p ≤0,05. Resultados: No grupo E.P.A, houve redução de 65,51% (p<0,001) e 60,17% (p<0,001) na expressão dos genes Calsequestrina 2 (Casq2) e Família de trocadores de soluto (Na-Ca) 8, membro A1 (Slc8a1), respectivamente, quando comparados ao grupo Controle. Por sua vez, o grupo E.P.A. apresentou aumento de 254,86% (p<0,001), 231,70% (p<0,001) e 183,37% (p<0,001) na expressão dos genes ATPase, transporte de Ca ++, músculo cardíaco, contração lenta 2 (Atp2a2), Receptor 2 de Rianodina, Cardíaco (RyR-2) e Fosfolamban (Pln) nessa ordem, quando comparado ao grupo Controle. Conclusão: Concluímos que a agressão mediada pelo álcool no miocárdio pode modular a via de cinética de cálcio. Estes resultados indicam que o insulto gerado pelo álcool, por meio de EPA e dependendo da concentração e/ou duração do estímulo, pode comprometer a expressão proteica de componentes da cinética do cálcio em favor de uma disfunção cardíaca. Palavras-chave: Álcool; cálcio; genes.