AVALIAÇÃO DO POTENCIAL ANTI-INFLAMATÓRIO DO EXTRATO HIDROALCOÓLICO DA CASCA DA Luehea divaricata

Jadiel de Abreu Pimenta Lins
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Abstract

A Luehea divaricata popularmente conhecida como acoita cavalo e utilizada na medicina popular, entretanto os estudos que avaliam a atividade farmacologica desta especie vegetal sao escassos. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a acao anti-inflamatoria do extrato hidroalcoolico da casca da Luehea divaricata (EHLd). O efeito anti-oxidante de EHLd foi avaliado pelo metodo de DPPH e a citotoxicidade com uso de celulas Raw 264.7 e foi avaliada pelo metodo MTT (tetrazolio de metiltiazol), assim como o seu efeito anti-inflamatorio que foi avaliado pela dosagem de NO e expressao genica de IL-1β e IL-6 pelos metodos de Griess e PCR em tempo real (RT-qPCR), respectivamente. Alem disso, o efeito anti-inflamatorio de EHLd tambem foi avaliado em camundongos com dano pulmonar agudo (DPA). Para isso, quarenta e oito camundongos Swiss (05 grupos) receberam pre-tratamento oral com EHLd (50 mg/Kg, 100mg/Kg e 250mg/Kg) ou salina (1mL/Kg), e foram induzidos uma hora apos ao DPA pela instilacao intranasal de LPS (30.000UE/10μg/50μL/animal). Apos 24h, coletou-se o lavado broncoalveolar (LBA), sangue total (ST) e orgaos para analises. Foram analisadas a contagem total e diferencial de leucocitos tanto do lavado quanto do sangue, a expressao genica de IL-1β e IL-6 pela RT-qPCR do pulmao e foi realizada a analise histologica dos pulmoes, rins e figado. Atraves da cromatografia liquida de alta eficiencia (CLAE), o EHLd apresentou como picos majoritario as substâncias, Rhoifolin, Isorhoifolin, Naringin, Kaempferol – 3 -0 caffeoyl glucoside 7 – 0 Glucoside, e Nuzhenide. O EHLd,na concentracao de 250μg/mL, apresentou efeito anti-oxidante ao capturar 55% de radicais livres. O EHLd apresentou baixa citoxicidade em todas concentracoes testadas de 50μg/mL a 250 μg/mL (p<0,05). Tambem foi observado que o EHLd possui efeito anti-inflamatorio, uma vez que, reduziu os niveis de NO e expressao genica de IL-1β e IL-6 apresentou atividade anti-inflamatoria em todas as concentracoes testadas. Em relacao ao estudo in vivo, o pre-tratamento com EHLd reduziu a migracao celular, principalmente de neutrofilos, para os pulmoes dos camundongos com DPA, e tambem reduziu a expressao dos genes IL-1β e IL-6 dos pulmoes, assim como, reduziu o edema e o infiltrado leucocitario nos pulmoes provocado pelo LPS. Diante deste contexto, o extrato da Luehea divaricata podera auxiliar no tratamento de inflamacoes.
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黄芩树皮水醇提取物抗炎作用的评价
Luehea divaricata俗称acoita cavalo,用于民间医学,但评价该植物药理活性的研究很少。因此,本研究的目的是评价水醇提取物的抗炎作用。EHLd的抗氧化效果评价方法的DPPH 264使用原始细胞和细胞毒性,评价方法MTT (tetrazolio metiltiazol)和被评估的抗炎效果的剂量和表达IL - 1β和IL 6的勇气和格里斯的方法和实时PCR (RT -qPCR分别)。此外,我们还研究了EHLd对急性肺损伤(DPA)小鼠的抗炎作用。为此,48只瑞士小鼠(05组)口服EHLd (50 mg/Kg、100mg/Kg、250mg/Kg)或生理盐水(1mL/Kg),经鼻内滴注LPS (30000 eu /10μg/50μL/动物)诱导DPA 1小时。24小时后采集支气管肺泡灌洗(abl)、全血(ts)和器官进行分析。通过RT-qPCR检测肺中IL-1β和IL-6基因表达,并对肺、肾脏和肝脏进行组织学分析。通过高效液相色谱(hplc), hld的主要峰为罗福林、异霍福林、柚皮苷、山奈酚- 3 -0咖啡基葡萄糖苷7 -0葡萄糖苷和Nuzhenide。在250μg/mL浓度下,EHLd具有抗氧化作用,可捕获55%的自由基。在50μg/mL ~ 250 μg/mL的所有浓度下,EHLd均表现出低细胞毒性(p< 0.05)。我们还观察到EHLd具有抗炎作用,因为它降低了NO水平,IL-1β和IL-6基因表达在所有浓度中都显示出抗炎活性。体内对在研究前、后处理和EHLd把migracao neutrofilos的细胞,主要是肺部的老鼠和电磁铁,它也减少了基因表达IL - 1β和IL 6的肺部,因此,如何降低造成的水肿,肺中的卧底白细胞有限合伙人。在此背景下,芦荟提取物可能有助于治疗炎症。
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