Visualisation de la différenciation cellulaire cardiaque par microscopie confocale

Annabelle Méry, M. Pucéat
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Abstract

La microscopie confocale offre des avantages importants sur la microscopie a epifluorescence conventionnelle. Elle fonctionne comme un «microtome optique» restituant une excellente definition d'image d'un plan focal donne dans un objet biologique epais. De plus, la presence d'un disque de Nipkow sur le microscope confocal multiplie la vitesse d'acquisition des images. Neanmoins, la restauration mathematique des images acquises en microscopie a champ large permet d'obtenir une resolution d'images similaire a celle obtenue en imagerie confocale. Ces technologies d'imagerie cellulaire nous permettent de suivre la differenciation cardiaque de cellules souches embryonnaires (ES) de Souris au sein de structures tridimensionnelles appelees corps embryoides. Nous visualisons notamment la formation des sarcomeres dans les cellules cardiaques en cours de differenciation. D'autre part, la vitesse d'acquisition des images avec le microscope confocal equipe d'une roue de Nipkow nous permet d'enregistrer les oscillations rapides de calcium dans les cardiomyocytes au sein des corps embryoides.
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共聚焦显微镜下心脏细胞分化的可视化
共聚焦显微镜比传统的表观荧光显微镜有显著的优势。它的功能就像一个“光学显微片”,为生物物体的焦点平面提供极好的图像清晰度。此外,共聚焦显微镜上尼普科圆盘的存在增加了图像采集的速度。然而,在宽视场显微镜中获得的图像的数学恢复可以获得与共聚焦成像相似的图像分辨率。这些细胞成像技术使我们能够在被称为胚胎体的三维结构中跟踪小鼠胚胎干细胞(ES)的心脏分化。我们特别观察了分化过程中心脏细胞中肉瘤的形成。此外,配备尼普科轮的共聚焦显微镜的图像采集速度使我们能够记录胚胎体内心肌细胞中钙的快速振荡。
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Roger Acher (1923-2020) Hypertension artérielle pulmonaire, moelle osseuse, précurseurs endothéliaux et sérotonine Le rôle du sommeil dans la consolidation mnésique : effets de l’âge et de la maladie d’Alzheimer [Memory processes and executive functioning: novel trends for research]. [Brain and memory: new neurons to remember].
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