A simple in vitro Technique of Ectomycorrhiza Formation by Tricholoma matsutake on Pinus densiflora Seedlings

I. Yokota, T. Numata, Sumio Ayusawa, Megumi Kikuchi, T. Natsuaki
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Abstract

栃木県産マツタケの子実体から分離した菌株(F275)をHY培地へ移植し, 23℃で暗培養した. F275の培養菌糸をオオムギ培地へ移植して, 40~50日後に種菌を作製することができた. これがマツタケ菌であることはITS領域のシーケンスおよびマツタケ特異的プライマーを用いたPCRによって確認した. 試験管内に調製した素ジェランガム培地で発芽したアカマツ実生に4~5粒のオオムギ種菌を接種し, 培養9ヶ月後のアカマツ実生の側根を微分干渉顕微鏡で観察した結果, マツタケ菌が根の細胞間隙に侵入して菌根を合成した.
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将从枥木县产松茸子实体分离出的菌株(F275)移植到HY培养基中,在23℃下进行暗培养。F275的培养菌丝移植到大麦培养基中,经过40 - 50天的试验,我们通过ITS区域序列和使用松茸特异性引物的PCR确认了这是松茸菌。用试管内配制的素培养基向发芽的赤松实生接种4 ~ 5粒大麦种菌,用微分干涉显微镜观察培养9个月后的赤松实生侧根的结果,松茸菌侵入根的细胞间隙合成了菌根。
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