DIFERENTES MÉTODOS PARA PROCESSAMENTO DE AMOSTRAS DE CÉLULAS DA GRANULOSA OBTIDAS POR ASPIRAÇÃO FOLICULAR PARA A EXTRAÇÃO DE RNA

Abstract

O estudo da expressão gênica das células foliculares pode ser a chave para o entendimento dos processos de crescimento folicular, ovulação e luteinização. As células foliculares de animais podem ser recuperadas in vivo através da aspiração folicular (AF) guiada por ultrassonografia, uma alternativa para não submeter as fêmeas ao procedimento cirúrgico de ovariectomia. Entretanto, a AF comumente possibilita a recuperação de uma pequena quantidade de células em fluido folicular, geralmente contaminado por células sanguíneas, o que prejudica a extração de RNA e interfere na qualidade da amostra. No presente estudo foram comparadas a coleta e o armazenamento de células foliculares com solução salina, Trizol®, dois tampões de lise de eritrócitos ou RNA later®. Quantidades adequadas de RNA e amostras de melhor qualidade com base na expressão dos genes de referência 18S rRNA, GAPDH, RPL19 e PPIB foram obtidas nas células foliculares tratadas com tampão de lise celular imediatamente após a coleta.