Structural Analysis of GPI-glycans from GPI-anchored Proteins by Mass Spectrometry

Abstract

グリコシルホスファチジルイノシトール（Glycosylphosphatidylinositol, GPI）アンカー型タンパク質（GPI-APs）とは、細胞膜上の糖脂質（GPI）によりアンカーされている一群のタンパク質であり、真核生物において広く存在している。GPI部分は、ホスファチジルイノシトール、グルコサミン、3つのマンノース、そしてエタノールアミンリン酸を基本構造とし、この基本構造と、それを介したタンパク質の膜へのアンカーの仕組みは、生物間でよく保存されている。発作性夜間ヘモグロビン尿症を初め、GPIアンカー欠損症が次々と見いだされている。これらの疾患を理解するためにも、GPIアンカーの生合成、つまり、糖鎖と脂質のリモデリング過程を知ることは大変重要である。本稿では、リモデリング過程を観察するために、リモデリングを触媒する酵素をコードする遺伝子をノックアウトした出芽酵母の変異株と、GPI-APsのモデル分子を用いて、GPIアンカー中の糖鎖の構造を液体クロマトグラフィー-エレクトロスプレーイオン化質量分析（LC-ESI MS）により分析・解析する方法を紹介する。