Viabilidad y capacidad micorrizógena in vitro de cepas criogenizadas de hongos ectomicorrícicos

Pub Date : 2023-12-20 DOI:10.21829/myb.2023.2932472
Gerardo Mata, Diego Adrián Pérez Ochoa, Diana Isabel Romero Vázquez, Rosario Medel Ortiz, D. Salmones
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Abstract

En México, los hongos ectomicorrizógenos silvestres (HEcM) son un importante recurso forestal no maderable y son aprovechados tradicionalmente para su autoconsumo y venta. La conservación in vitro de cepas de HEcM es más compleja que en especies saprófitas, debido a las relaciones fisiológicas existentes con sus hospederos. En este trabajo se presenta un método de crioconservación de cepas de HEcM utilizando vectores no convencionales y la posterior evaluación de su viabilidad in vitro. Para ello, cinco cepas de HEcM (Boletus aff. edulis, Boletus sp., Helvella sp. y Lactarius indigo [2]) fueron criogenizadas (-196 °C) durante 30 días, utilizando como vectores acículas de pino y semillas de mijo estériles. Posteriormente, se determinó la capacidad de dos de las cepas recuperadas para formar morfotipos de ectomicorrizas in vitro inoculados en plántulas de Pinus montezumae. Los resultados de la primera etapa mostraron altos porcentajes de recuperación de los micelios criogenizados en ambos vectores (98% - 100%). En cuanto a la micorrización in vitro, las plántulas no micorrizadas (control) no sobrevivieron, mientras que las micorrizadas mostraron valores de sobrevivencia entre 33% y 100%, con incremento de la longitud de sus tallos. Además, se observó la formación de morfotipos dicotómicos de color ocre oscuro, así como el desarrollo del manto fúngico en las raíces micorrizadas después de cuatro meses de inoculación. El método empleado para la criogenización de las cepas de HEcM posibilita la conservación de los micelios por períodos prolongados, manteniendo activa su capacidad de micorrización.
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外生菌根真菌低温菌株的体外菌根活力和菌根能力
在墨西哥,野生外生菌根真菌(HEcM)是一种重要的非木材森林资源,传统上供自用和销售。由于与宿主之间的生理关系,野生外生真菌菌株的体外保存比寄生物种更为复杂。在这项工作中,我们提出了一种使用非常规载体低温保存 HEcM 菌株的方法,并随后对其体外生存能力进行了评估。为此,我们使用无菌松针和小米种子作为载体,将五株 HEcM 菌株(Boletus aff. edulis、Boletus sp.、Helvella sp.和 Lactarius indigo [2])低温保存(-196 °C)30 天。随后,测定了两种回收菌株在接种于山松幼苗上形成离体外生菌根形态的能力。第一阶段的结果显示,两种载体中冷冻保存的菌丝体的回收率都很高(98% - 100%)。在离体菌根化方面,未菌根化的幼苗(对照)无法存活,而菌根化幼苗的存活率在 33% 到 100% 之间,且茎干长度有所增加。此外,在接种四个月后,还观察到深赭色二分形态的形成,以及菌根上真菌套膜的发育。低温保存 HEcM 菌株的方法可以延长菌丝体的保存时间,保持其菌根能力。
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