METODO RAPIDO PARA LA DISCRIMINACION DE Thrips palmi Karny (THYSANOPTERA: THRIPIDAE) POR PCR

Guillermina Ortega Rodríguez, Dimas Mejía Sánchez, Juan Fernando Solís Aguilar, Adriana Rosalía Gijón Hernández, Héctor Enrique Vega Ortíz, Nancy Villegas Jiménez, Roberto Miguel Johansen Naime
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Abstract

RESUMEN. Para discriminar al trips oriental (Thrips palmi) de otros trips, se presenta un método rápido mediante el análisis del rDNA ITS2. Para ello se obtuvo el DNA de inmaduros y adultos de T. palmi, T. tabaci y F. occidentalis, de forma directa, macerando el insecto en agua grado PCR. El DNA fue empleado para amplificación molecular con iniciadores de la región ITS2. El amplicon de T. palmi generó el producto reportado de 588 pb en un gel de agarosa al 1.5% y permitió diferenciarla de los otros trips. El resultado se robusteció con la secuenciación directa del producto, así como RFLPs. Las secuencias fueron comparadas con otras secuencias disponibles en el GenBank. Asimismo, se realizó un análisis filogenético formando dos clados con una probabilidad de agrupación del 77% para T. palmi y T. tabaci. El método propuesto contribuye a la identificación del trips oriental y discriminarlo de otros trips, ya que se confunden con frecuencia con otras especies de trips como T. tabaci y F. occidentalis, sobre todo en estados inmaduros, por lo que se complica su identificación usando claves taxonómicas. La detección rápida de esta plaga polífaga contribuye a reducir el ingreso y dispersión a regiones, países o áreas libres de esta plaga.
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利用 PCR 快速识别棕榈蓟马(THYSANOPTERA: THRIPIDAE)的方法
摘要 为了区分东方蓟马(棕榈蓟马)和其他蓟马,本文介绍了一种利用 ITS2 rDNA 分析的快速方法。为此,用 PCR 级水浸渍棕榈蓟马、烟青蓟马和西蓟马的幼虫和成虫,直接获得其 DNA。利用 ITS2 区域的引物对 DNA 进行分子扩增。在 1.5% 琼脂糖凝胶上,棕榈蓟马的扩增子产生了 588 bp 的报告产物,可以与其他蓟马区分开来。该结果得到了该产物的直接测序和 RFLPs 的支持。这些序列与 GenBank 中的其他序列进行了比较。此外,还进行了系统进化分析,发现棕榈蓟马和烟青蓟马形成了两个支系,聚类概率为 77%。所提出的方法有助于鉴定东方蓟马并将其与其他蓟马区分开来,因为东方蓟马经常与其他蓟马种类(如烟草蓟马和F. occidentalis)相混淆,尤其是在未成熟阶段,这使得使用分类学钥匙对其进行鉴定变得更加复杂。快速检测这种多食性害虫有助于减少这种害虫进入和扩散到没有这种害虫的地区、国家或区域。
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