A. Fattori , C. Egele , J.P. Bellocq , M.P. Chenard
{"title":"Évaluation inter-laboratoires de la qualité technique du marquage IHC de PRAME dans le mélanome - Résultats de l’essai d’aptitude 2023 de l’AFAQAP","authors":"A. Fattori , C. Egele , J.P. Bellocq , M.P. Chenard","doi":"10.1016/j.annpat.2024.04.011","DOIUrl":null,"url":null,"abstract":"<div><h3>Introduction</h3><p>L’immunomarquage de PRAME est un outil d’une grande sensibilité et spécificité pour différencier la nature bénigne/maligne des proliférations mélanocytaires. Il contribue à améliorer de manière significative la classification des lésions mélanocytaires de diagnostic histologique difficile.</p><p>L’AFAQAP a organisé en 2023 un premier essai d’aptitude inter-laboratoires du marquage PRAME afin d’évaluer la qualité technique à l’échelon national.</p></div><div><h3>Objectif</h3><p>Identifier les protocoles inadaptés ou sub-optimaux, et proposer des recommandations si nécessaire.</p></div><div><h3>Méthode</h3><p>Les participants ont appliqué leur protocole de routine sur une lame blanche comportant 2 échantillons cutanés, l’un provenant d’un mélanome, l’autre d’un nævus, et 1 échantillon de testicule normal.</p><p>Les résultats attendus étaient les suivants : marquage nucléaire intense dans 100 % des cellules tumorales du mélanome ; absence de marquage dans les cellules næviques et marquage cytoplasmique franc des cellules des glandes sébacées ; marquage nucléaire modéré à intense des spermatogonies, et faible à modéré de quelques spermatocytes.</p><p>Les résultats étaient classés en 4 groupes : optimal, bon, moyen et insuffisant.</p></div><div><h3>Résultats</h3><p>Quarante-trois structures ont participé au test et 93 % d’entre elles ont obtenu un marquage adéquat (optimal ou bon) sur les 3 échantillons.</p><p>Dans le mélanome, le taux de marquage adéquat était de 95 %. Seuls 2 participants (5 %) ont eu un résultat insuffisant lié à une intensité de marquage bien trop faible. Leur marquage était également de trop faible intensité sur les échantillons de nævus et de testicule. À l’inverse, un participant a obtenu un résultat moyen sur le nævus en raison d’un marquage positif aberrant de quelques noyaux de cellules naeviques.</p><p>Trois clones ont été utilisés : le clone QR005 de Quartett/Diagomics (35 fois), le clone EPR20330 (7 fois), et le clone RBT-PRAME de BioSB/Diagomics (1 fois).</p><p>Parmi les 35 utilisateurs du clone QR005, 32 ont eu un résultat adéquat sur plateforme Dako Omnis (5/5), Leica (7/7) et Roche-Ventana (20/22) ; 2 utilisateurs de la plateforme Roche-Ventana ont obtenu un résultat insuffisant sur le mélanome, et moyen sur le nævus et le testicule. Le seul utilisateur de ce clone sur plateforme Dako Autostainer a obtenu un résultat moyen sur le nævus.</p><p>Le clone EPR20330 de Roche-Ventana (6 utilisateurs) ou d’Abcam (1 utilisateur), toujours utilisé sur plateforme Roche-Ventana, a donné 100 % de résultats adéquats.</p><p>Le clone RBT-PRAME de BioSB/Diagomics (1 utilisateur sur Dako Omnis) a donné un résultat adéquat.</p></div><div><h3>Discussion/Conclusion</h3><p>L’essai d’aptitude IHC PRAME 2023 de l’AFAQAP a montré un marquage adéquat de PRAME chez 93 % des participants, moyen chez 2 %, et insuffisant chez 5 %. Le testicule normal est un très bon témoin pour calibrer la technique IHC PRAME. Les recommandations proposées aux 3 structures ayant obtenu un résultat moyen ou insuffisant devraient leur permettre d’améliorer leur technique.</p></div>","PeriodicalId":50969,"journal":{"name":"Annales De Pathologie","volume":"44 4","pages":"Page 306"},"PeriodicalIF":0.5000,"publicationDate":"2024-07-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":"0","resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":null,"PeriodicalName":"Annales De Pathologie","FirstCategoryId":"3","ListUrlMain":"https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0242649824000865","RegionNum":4,"RegionCategory":"医学","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":null,"EPubDate":"","PubModel":"","JCR":"Q4","JCRName":"PATHOLOGY","Score":null,"Total":0}
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Abstract
Introduction
L’immunomarquage de PRAME est un outil d’une grande sensibilité et spécificité pour différencier la nature bénigne/maligne des proliférations mélanocytaires. Il contribue à améliorer de manière significative la classification des lésions mélanocytaires de diagnostic histologique difficile.
L’AFAQAP a organisé en 2023 un premier essai d’aptitude inter-laboratoires du marquage PRAME afin d’évaluer la qualité technique à l’échelon national.
Objectif
Identifier les protocoles inadaptés ou sub-optimaux, et proposer des recommandations si nécessaire.
Méthode
Les participants ont appliqué leur protocole de routine sur une lame blanche comportant 2 échantillons cutanés, l’un provenant d’un mélanome, l’autre d’un nævus, et 1 échantillon de testicule normal.
Les résultats attendus étaient les suivants : marquage nucléaire intense dans 100 % des cellules tumorales du mélanome ; absence de marquage dans les cellules næviques et marquage cytoplasmique franc des cellules des glandes sébacées ; marquage nucléaire modéré à intense des spermatogonies, et faible à modéré de quelques spermatocytes.
Les résultats étaient classés en 4 groupes : optimal, bon, moyen et insuffisant.
Résultats
Quarante-trois structures ont participé au test et 93 % d’entre elles ont obtenu un marquage adéquat (optimal ou bon) sur les 3 échantillons.
Dans le mélanome, le taux de marquage adéquat était de 95 %. Seuls 2 participants (5 %) ont eu un résultat insuffisant lié à une intensité de marquage bien trop faible. Leur marquage était également de trop faible intensité sur les échantillons de nævus et de testicule. À l’inverse, un participant a obtenu un résultat moyen sur le nævus en raison d’un marquage positif aberrant de quelques noyaux de cellules naeviques.
Trois clones ont été utilisés : le clone QR005 de Quartett/Diagomics (35 fois), le clone EPR20330 (7 fois), et le clone RBT-PRAME de BioSB/Diagomics (1 fois).
Parmi les 35 utilisateurs du clone QR005, 32 ont eu un résultat adéquat sur plateforme Dako Omnis (5/5), Leica (7/7) et Roche-Ventana (20/22) ; 2 utilisateurs de la plateforme Roche-Ventana ont obtenu un résultat insuffisant sur le mélanome, et moyen sur le nævus et le testicule. Le seul utilisateur de ce clone sur plateforme Dako Autostainer a obtenu un résultat moyen sur le nævus.
Le clone EPR20330 de Roche-Ventana (6 utilisateurs) ou d’Abcam (1 utilisateur), toujours utilisé sur plateforme Roche-Ventana, a donné 100 % de résultats adéquats.
Le clone RBT-PRAME de BioSB/Diagomics (1 utilisateur sur Dako Omnis) a donné un résultat adéquat.
Discussion/Conclusion
L’essai d’aptitude IHC PRAME 2023 de l’AFAQAP a montré un marquage adéquat de PRAME chez 93 % des participants, moyen chez 2 %, et insuffisant chez 5 %. Le testicule normal est un très bon témoin pour calibrer la technique IHC PRAME. Les recommandations proposées aux 3 structures ayant obtenu un résultat moyen ou insuffisant devraient leur permettre d’améliorer leur technique.
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