Analyse protéomique par chromatographie en phase liquide et spectrométrie de masse de tissus fixés au formol de la maladie macronodulaire bilatérale des corticosurrénales (BMAD)

Abstract

La maladie macronodulaire bilatérale des corticosurrénales (BMAD) est une cause rare de syndrome de Cushing. Elle comprend 3 groupes moléculaires : ARMC5-mutés, KDM1A-mutés et de cause inconnue. Le but de ce travail est d’étudier le protéome d’une cohorte de BMAD et ses corrélations avec les groupes moléculaires.

Notre cohorte monocentrique comprend 24 BMAD (7 ARMC5, 4 KDM1A et 13 de cause inconnue) obtenus à partir de matériel fixé en formol et inclus en paraffine. L’identification et la quantification des protéines ont été réalisées par chromatographie en phase liquide et spectrométrie de masse (LC-MS/MS) à l’Institut Cochin.

L’analyse en composantes principales a montré l’homogénéité des BMAD ARMC5 et KDM1A-mutées. Les BMAD de cause inconnue étaient hétérogènes. Les BMAD ARMC5-mutées sur-expriment fortement plusieurs des sous-unités de l’ARN polymérase II (POL2) et sous-expriment plusieurs enzymes de biosynthèse du cholestérol (NSDHL ou LDLR). Les BMAD KDM1A-mutées sur-expriment certaines protéines du métabolisme du cholestérol (dont LDLR) et perdent la protéine KDM1A.

Notre étude est la première à explorer le protéome des BMAD en utilisant la LC-MS/MS. Les BMAD ARMC5-mutées sur-expriment toutes les sous-unités de POL2, conformément au rôle d’ARMC5 dans sa régulation. Elles sous-expriment certaines enzymes de biosynthèse du cholestérol, de façon concordante avec la faible production de cortisol des cellules avec inactivation d’ARMC5. Les BMAD KDM1A-mutées sur-expriment certaines protéines du métabolisme des lipides qui jouent probablement un rôle dans dérégulation de la production de cortisol. Les BMAD de cause inconnue présentent des profils protéomiques variés qui suggèrent différents mécanismes pathogènes.