{"title":"A REVIEW ON INTEIN MEDIATED RECOMBINANT PROTEIN PURIFICATION PROCESSES WITHOUT USE OF PROTEASE","authors":"Y. Ermurat","doi":"10.18036/AUBTDC.267017","DOIUrl":null,"url":null,"abstract":"Bu calismada, yapay proteinlerin proteaz kullanilmadan saflastirilmasi sureclerinde yararlanilan inteinlerin ayrilma aktivitelerinin artirilmasi icin inteinler ve hedef proteinler uzerinde yapilan arastirmalar incelenmistir. Intein kullanimi ile protein ayrismasi uzerinde yapilan arastirmalar, intein ve protein saflastirma sureclerinin daha verimli hale getirilmesini amaclamaktadir. In vivo ve in vitro olarak gerceklesen sureclerde, intein ve hedef protein iceren poliklonal PCR urununun cogaltilmasi ve ekspres plazmidlerin klonlanan suslara tasinmasi islemleri yapilmaktadir. Inteinin proteinden ayrilma aktivitesi ve ayrilma orani sabiti kinetikleri, degisik pH, sicaklik ve suzme surelerinde belirlenmekte ve hedef proteinlere iliskili olarak karsilastirilmalari yapilmaktadir. Arastirmalarda degisik mikrobiyal dogal ve yapay inteinlerin protein ayristirma aktiviteleri incelenmis ve yapay Nostoc punctiforme DnaE C-inteinlerinin ayrisma aktivitelerinin en yuksek oldugu belirlenmistir. Calismalar amino asit eklenmesine daha yatkin olmasi nedeniyle C-inteinler uzerinde yogunlasmaktadir.","PeriodicalId":7738,"journal":{"name":"ANADOLU UNIVERSITY JOURNAL OF SCIENCE AND TECHNOLOGY –C Life Sciences and Biotechnology","volume":"6 1","pages":"95-102"},"PeriodicalIF":0.0000,"publicationDate":"2017-08-31","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":"0","resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":null,"PeriodicalName":"ANADOLU UNIVERSITY JOURNAL OF SCIENCE AND TECHNOLOGY –C Life Sciences and Biotechnology","FirstCategoryId":"1085","ListUrlMain":"https://doi.org/10.18036/AUBTDC.267017","RegionNum":0,"RegionCategory":null,"ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":null,"EPubDate":"","PubModel":"","JCR":"","JCRName":"","Score":null,"Total":0}
引用次数: 0
Abstract
Bu calismada, yapay proteinlerin proteaz kullanilmadan saflastirilmasi sureclerinde yararlanilan inteinlerin ayrilma aktivitelerinin artirilmasi icin inteinler ve hedef proteinler uzerinde yapilan arastirmalar incelenmistir. Intein kullanimi ile protein ayrismasi uzerinde yapilan arastirmalar, intein ve protein saflastirma sureclerinin daha verimli hale getirilmesini amaclamaktadir. In vivo ve in vitro olarak gerceklesen sureclerde, intein ve hedef protein iceren poliklonal PCR urununun cogaltilmasi ve ekspres plazmidlerin klonlanan suslara tasinmasi islemleri yapilmaktadir. Inteinin proteinden ayrilma aktivitesi ve ayrilma orani sabiti kinetikleri, degisik pH, sicaklik ve suzme surelerinde belirlenmekte ve hedef proteinlere iliskili olarak karsilastirilmalari yapilmaktadir. Arastirmalarda degisik mikrobiyal dogal ve yapay inteinlerin protein ayristirma aktiviteleri incelenmis ve yapay Nostoc punctiforme DnaE C-inteinlerinin ayrisma aktivitelerinin en yuksek oldugu belirlenmistir. Calismalar amino asit eklenmesine daha yatkin olmasi nedeniyle C-inteinler uzerinde yogunlasmaktadir.