Modifications du profil protéique dans les protoplastes d'apex d'épinards ( Spinacia oleracea L. cv. Nobel) lors de l'induction florale

Abstract

La floraison a ete induite chez des plantes d'epinards (Spinacia oleracea L. cv. Nobel) par un traitement photoperiodique de 24 heures de lumiere continue, et correspondant a un depassement de 12 heures de la photoperiode critique de l'epinard. Des apex caulinaires, representant des echantillons de 30 mg en PF, ont ete preleves sur des plantes induites et non induites. Ces apex ont ete incubes dans une solution enzymatique contenant de la cellulase, de la driselase et du macerozyme. Une methode originale de traduction in vitro dans le lysat de protoplastes d'apex d'epinards induits et non induits a ete mise au point. Elle a permis de mettre en evidence, par marquage a la methionine S³⁵ les proteines neosynthetisees. Parallelement, des protoplastes intacts d'apex ont ete incubes en presence de methionine S³⁵. Les proteines neosynthetisees, dans le lysat de protoplastes ou dans les protoplastes intacts, ont ete analysees par electrophorese sur gel de Polyacrylamide en conditions denaturantes et revelees par fluorographie. Dans le lysat de protoplastes d'apex, trois proteines de masses molaires apparentes respectivement de 32, 36 et 38 kDa augmentaient en quantite dans les protoplastes d'apex induits. Une autre proteine de masse molaire apparente de 25 kDa diminuait quantitativement apres induction. Dans les protoplastes intacts, six proteines de masses molaires apparentes respectivement de 21, 23, 32, 36, 38 et 64 kDa augmentaient quantitativement alors que quatre autres proteines de 22, 26, 37 et 77 kDa diminuaient quantitativement. Quatre de ces dernieres modifications (25, 32, 36 et 38 kDa) etaient similaires a celles trouvees dans le lysat de protoplastes d'apex.