鉴定5个在精子发生减数分裂阶段表达显著差异的基因

Cláudia Toscano Fonseca, Felipe Costa da Silva, Marcela Paulina Barbosa
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Objetivos: Visamos revelar a identidade de cinco genes selecionados de uma biblioteca de cDNA de células germinativas masculinas, que em trabalho prévio demonstraram-se cruciais na promoção da fase meiótica da espermatogênese. Material e métodos: Identificamos, através da contraposição com os bancos de dados das plataformas: BLASTn e GerOnline, cinco sequências gênicas, selecionadas de um trabalho desenvolvido previamente, que demonstraram modificar sua expressão em mais de 10 vezes na fase meiótica da espermatogênese. Resultados: Das cinco sequências analisadas, três mostraram superexpressão: CBFA2T3, repressor gênico; COA1, proteína da membrana mitocondrial interna reconhecidamente importante no processo de obtenção de energia, vem sendo relacionada, também, com a proliferação celular e PHF7, regulador da transcrição gênica. Duas, ao contrário, mostraram-se reprimidos: PEX11B, proteína formadora de canais em membrana em peroxissomas e CSGALNACT1, enzima envolvida na síntese de sulfato de condroitina, molécula que tanto pode formar proteoglicanas de matriz quanto podem participar da recepção de citocinas na membrana celular. Conclusão: Apenas o somatório das contribuições obtidas através de diferentes estudos experimentais poderá criar um panorama de expressão gênica próximo da realidade de cada fase do processo espermatogênico. 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摘要

简介:精子发生是一个循环的过程,包括三个阶段:精原细胞或有丝分裂;精子细胞或减数分裂和精子发生或分化阶段。每一种都需要不同的转录组的作用,包括不同基因的激活和沉默。宏观和微观排列技术有助于阐明这些聚类,有助于同时分析几个基因的表达。由于男性配子产生器官的高产率和容易获得性,精子发生为研究与细胞周期控制和男性配子发生相关的基因,包括与减数分裂期相关的基因,提供了一个很好的模型。目的:我们的目的是揭示从男性生殖细胞cDNA文库中选择的5个基因的身份,这些基因在之前的工作中被证明对促进精子发生减数分裂阶段至关重要。材料和方法:通过与BLASTn和GerOnline平台数据库的对比,我们从之前的工作中选择了5个基因序列,这些序列在精子发生减数分裂阶段的表达修饰超过10次。结果:在分析的5个序列中,有3个序列表现出过表达:CBFA2T3,基因抑制因子;COA1是线粒体内膜蛋白,在能量获取过程中被认为是重要的,也与细胞增殖和PHF7有关,PHF7是基因转录的调节因子。相比之下,有两种被抑制:PEX11B,过氧化物酶体膜通道形成蛋白和CSGALNACT1,参与硫酸软骨素合成的酶,硫酸软骨素分子可以形成基质蛋白多糖,也可以参与细胞膜细胞因子的接受。结论:只有通过不同实验研究的贡献的总和,才能创建一个基因表达的全景,接近于精子发生过程的每个阶段的现实。然而,每一项贡献都是重要的,以促进理解细胞周期的进展,以及解释几种可能导致不孕和癌症的病理。
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IDENTIFICAÇÃO DE CINCO GENES COM EXPRESSÃO DIFERENCIAL SIGNIFICATIVA NA FASE MEIÓTICA DA ESPERMATOGÊNESE
Introdução: A espermatogênese é um processo cíclico formado por três fases: espermatogonial ou mitótica; espermatocitária ou meiótica e espermiogênica ou fase de diferenciação. Cada uma delas requer a atuação de diferentes agrupamentos de transcritos, envolvendo a ativação e o silenciamento de diferentes genes. As técnicas de macro e micro arranjo são úteis na elucidação destes agrupamentos, contribuindo para a análise simultânea da expressão de vários genes. Devido à grande produtividade e à facilidade de acesso aos órgãos produtores dos gametas masculinos, temos na espermatogênese um bom modelo para o estudo dos genes relacionados ao controle do ciclo celular e com a gametogênese masculina, incluindo aqueles relacionados, especificamente, com fase meiótica. Objetivos: Visamos revelar a identidade de cinco genes selecionados de uma biblioteca de cDNA de células germinativas masculinas, que em trabalho prévio demonstraram-se cruciais na promoção da fase meiótica da espermatogênese. Material e métodos: Identificamos, através da contraposição com os bancos de dados das plataformas: BLASTn e GerOnline, cinco sequências gênicas, selecionadas de um trabalho desenvolvido previamente, que demonstraram modificar sua expressão em mais de 10 vezes na fase meiótica da espermatogênese. Resultados: Das cinco sequências analisadas, três mostraram superexpressão: CBFA2T3, repressor gênico; COA1, proteína da membrana mitocondrial interna reconhecidamente importante no processo de obtenção de energia, vem sendo relacionada, também, com a proliferação celular e PHF7, regulador da transcrição gênica. Duas, ao contrário, mostraram-se reprimidos: PEX11B, proteína formadora de canais em membrana em peroxissomas e CSGALNACT1, enzima envolvida na síntese de sulfato de condroitina, molécula que tanto pode formar proteoglicanas de matriz quanto podem participar da recepção de citocinas na membrana celular. Conclusão: Apenas o somatório das contribuições obtidas através de diferentes estudos experimentais poderá criar um panorama de expressão gênica próximo da realidade de cada fase do processo espermatogênico. Ainda assim, cada contribuição é importante para o avanço no entendimento da progressão do ciclo celular, bem como para explicar diversas patologias que podem levar à infertilidade e também ao câncer.
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