Retour d’expérience de la validation d’une méthode de screening toxicologique par CL-SMHR en vue d’une accréditation (NF EN ISO 15189), et de sa mise en application en permanence de soins (7 J/7, 24 h/24)

Objectifs

Le terme de criblage (ou screening) toxicologique désigne une analyse permettant la recherche et l’identification d’au moins 200 molécules distinctes à partir d’un échantillon biologique par une méthode de chromatographie. En toxicologie biologique, sa prescription entre dans le cadre des intoxications médicamenteuses ou pour écarter toute étiologie toxique. Au laboratoire de toxicologie du CHU de Lille, la technique analytique utilisée est la chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse haute résolution (CL-SMHR). L’identification de composés est basée sur la comparaison de données acquises avec une bibliothèque de référence comprenant 1800 molécules décrivant le nom, la formule brute, le temps de rétention et les fragments spécifiques de chaque molécule [Humbert L. et al. Ann Toxicol Anal 2012;24(2):87-96.]. Parallèlement, la SFTA et la SFBC ont établi des recommandations pour accréditer les méthodes de screening toxicologique selon la norme NF EN ISO 15189 [Guitton J. et al. Toxicologie Analytique & Clinique 2019;31(1):12-17.]. L’objectif de ce travail est de rapporter la validation de notre méthode de screening toxicologique par CL-SMHR dans le sang et l’urine en routine 7 J/7 et 24 h/24 selon ces recommandations, l’expérience (avantages/écueils et difficultés) et l’intégration d’un contrôle de qualité interne (CQI).

Méthode

La répétabilité, la fidélité intermédiaire, la détermination de la limite d’identification (LOI), la contamination, la sélectivité et la stabilité ont été testées pour 137 molécules dans le sérum et 63 molécules dans l’urine à partir de 8 panels. Elles ont été choisies en fonction de leurs différentes classes thérapeutiques ou chimiques, et de la large distribution de leur temps rétention et de leur rapport masse/charge.

Résultats

Les résultats ont permis de valider les performances de la méthode en termes de fidélité, et d’établir des LOI dont seulement 2 sont supérieures aux concentrations toxiques [Schulz M et al. Crit Care Lond Engl 6 mai 2020;24(1):195]. Quinze molécules ont entraîné une contamination des blancs matrices. Aucune interférence n’a été observée. Cent vingt-six molécules dans le sérum et 28 dans l’urine se sont révélées stables pendant 14 jours à + 4° C. Un CQI quotidien de chaque matrice est mis en place en sus de la qualification quotidienne du système chromatographique. Les données de validation présentées ont reçu un accueil favorable lors de l’audit du CoFrAc (accréditation non encore prononcée au moment du dépôt de ce résumé). La mise en œuvre de cette méthode de screening est effective depuis janvier 2020 (2905 demandes en 2023 soit 8/jours en moyenne) 7 J/7 et 24 h/24 (les résultats sont libérés sous la responsabilité du biologiste d’astreinte en période de garde). Les principales difficultés ont consisté en la mise en œuvre des CQI quotidiens (choix des molécules et de leurs concentrations, exploitation de leur résultats et étude de stabilité), et en l’habilitation du personnel. L’apport de cette méthode de CL-SMHR en routine, du fait de sa sensibilité élevée, du large panel de substances identifiables, du délai technique de moins d’une heure et d’une simplification de l’interprétation des données avec processus cadré de retraitement des données et résultat disponible pour le prescripteur 2 heures, en moyenne, après la réception de l’échantillon au laboratoire est hautement apprécié par les cliniciens du CHU de Lille et du GHT. Enfin sur un plan scientifique, la réalisation en routine quotidienne de tels screening, du fait de leur sensibilité, nous a permis de mettre en évidence des résultats inattendus en lien avec des métabolismes non étudiés de certains médicaments (e.g, solriamfetol).

Conclusion

Au-delà des difficultés, une telle méthode de CL-SMHR peut donc être mise en œuvre en routine de toxicologie biologique en permanence de soin avec un bénéfice de diagnostic indéniable lors de la prise en charge des patients.