绳纹遗骨中人类线粒体DNA的提取与扩增

T. Kunisada, K. Shinoda
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摘要

从3具绳文时代人骨中提取DNA,采用PCR法放大线粒体DNA进行分析,考察了其方法论上的问题。此次使用的方法,不论样品的保存状态和部位如何,都能基本稳定地进行DNA分离和扩增,其有效性得到了证实。分离出的DNA大部分不是来自人类,但通过PCR方法可以确认来自人类线粒体的DNA的扩增。对线粒体DNA的V区和D环区使用限制酶的分析不能检测出多态性。但在确定扩增后的V区域的碱基序列时,发现了单个个体的一处变异。
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Extraction and Amplification of the Human Mitochondrial DNA from the Jomon Skeletal Remains
縄文時代人骨3体から DNA を抽出し, PCR 法を用いてミトコンドリア DNAを増幅して解析を行い,その方法論的な問題点を考察した。今回用いた方法では,試料の保存状態•部位にかかわらず,ほぼ安定して DNA の分離と増幅が可能であり,その有効性が確かめられた。分離された DNA は,そのほとんどがヒト由来のものではなかったが, PCR 法によりヒトミトコンドリア由来の DNA の増幅を確認することができた。ミトコンドリア DNAのV 領域および D ループ領域に対する制限酵素を用いた解析では多型は検出できなかった。しかし増幅した V 領域の塩基配列を決定したところ,1個体では1箇所の変異が見出された。
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