Développement de nouvelles stratégies thérapeutiques pour la granulomatose septique chronique (CGD) grâce au modèle des cellules souches pluripotentes induites (iPSCs) générées à partir des fibroblastes de patients atteints de CGD

Introduction

La CGD est une maladie génétique de l’immunodéficience innée affectant les phagocytes par dysfonctionnement du complexe NADPH-oxydase. Le tableau clinique de cette maladie se résume à des infections graves et récidivantes dès le plus jeune âge. Les thérapeutiques actuelles sont la prophylaxie antibiotique et la greffe de moelle allogénique. La thérapie génique est en cours d’évaluation mais n’a donné jusqu’à présent que des corrections transitoires. Il est donc nécessaire de trouver de nouvelles stratégies thérapeutiques grâce au développement de modèles cellulaires mimant les formes génétiques de la CGD.

Matériel et méthodes

Le protocole FibroCGD* du CHU Grenoble permet de collecter des biopsies de patients CGD afin de générer des iPSCs à partir de fibroblastes. Les iPSCs sont ensuite différenciées en progéniteurs hématopoïétiques puis en macrophages phénotypiquement et génétiquement identiques aux cellules originelles des patients [1]. Ainsi des stratégies thérapeutiques adaptées aux différentes formes génétiques de CGD sont en cours de développement au laboratoire.

Résultats/Conclusion

Les progéniteurs hématopoïétiques et les phagocytes des 4 différentes formes génétiques de la CGD sont produites à volonté à partir des iPSCs des patients. Les iPSCs CGDX et AR220 ont permis le développement d’une thérapie à base de vecteurs lipidiques contenant NOX2/p22phox (Synthelis, Meylan) dont l’efficacité in cellulo a été prouvée [2]. Leur efficacité par nébulisation intratrachéale dans un modèle souris CGDX d’infections aiguës pulmonaires est en cours d’évaluation.

Parallèlement la stratégie d’édition du génome CRISPR/Cas9 utilisant des méthodes non intégratives a été testée avec succès pour réparer une mutation ponctuelle d’iPSCs CGDX. Le but à long terme sera de proposer au patient une greffe de progéniteurs hématopoïétiques corrigés. Enfin une stratégie utilisant le couplage des protéines p67phox et p47phox à des vecteurs peptidiques (Cell-Penetrating-Peptide) est en cours de développement pour la thérapie des formes AR470 et 670.