[Multiplication, interference, and interferon induction of avian herpesviruses. Contribution to the vaccination against Marek's disease. 2. Materials and methods, results, discussion and conclusion].

Zusammenfassung Die experimentellen Untersuchungsergebnisse beziehen sich auf drei Themenkreise: a) Vermehrung des Puten-Herpesvirus in vitro: Durch Versuche in der Durchstromungskammer sowie durch Untersuchungen mit markierten Antikorpern konnte der Nachweis erbracht werden, das die Virusweitergabe von Zelle zu Zelle durch erregerhaltige Zytoplasmateile erfolgt, die von infizierten Zellen abgeschnurt und kurze Zeit spater von nicht infizierten Zellen aufgenommen werden. Unter Berucksichtigung dieses offenbar den zellassoziierten Herpesviren der Gruppe B eigenen Ubertragungsweges ist eine grosere Virusproduktion bei gleichzeitiger kurzerer Kultivierungszeit moglich. b) Interferon: Wahrend drei Puten-Herpesvirusstamme sowie drei apathogene Huhner-Herpesvirusstamme in vitro kein nachweisbares Interferon induzierten, waren drei geprufte pathogene MKV-Stamme in der Lage, sowohl in Huhnerembryofibroblasten- als auch in Huhnerkukennierenzellkulturen die Bildung groser Mengen Interferon zu induzieren. Auf Grund der fehlenden Interferoninduktion durch die drei Puten- und die drei apathogenen Huhner-Herpesvirusstamme kann als sicher gelten, das der Interferonmechanismus nicht fur die Schutzwirkung dieser Stamme gegen das Entstehen der MK in Frage kommt. c) Interferenz: Es konnten experimentelle Beweise fur das Vorkommen der homologen Interferenz in vitro erbracht werden. Durch Endpunktpassagen mit einem zeitlichen Abstand von 24 Stunden zwischen Infektion und Passage der Kulturen konnte die Bildung inkompletter interferierender Viruspartikel weitgehend vermieden werden. Inaktiviertes Herpesvirus vermag ebenfalls mit infektiosem Virus zu interferieren. Die Infektion von Huhnerkukennierenzellkulturen mit Puten-Herpesvirus und die nachfolgende Infektion mit pathogenem Marekvirus vermochte die Vermehrung des MKV nachhaltig zu hemmen. Dieses in vitro beobachtete, als heterologe Interferenz bezeichnete Ereignis tritt Literaturberichten zufolge auch in vivo auf und wird als eines der Wirkungsprinzipien der Schutzimpfung von Eintagskuken gegen die MK angesehen. Summary Multiplication, interference and interferon induction of avian herpesviruses. Protection against Marek's Disease 2. Materials and methods, results, discussion and conclusions The results of experimental studies relate to three different themes. a) Multiplication of turkey herpesvirus in vitro. Studies using the continuous culture chamber and experiments with labelled antibodies have shown that spread of virus from cell to cell takes place by virus-containing cytoplasmic particles which become detached from infected cells and are taken up by uninfected cells. Consideration of this method of transmission of herpesviruses of Group B suggests that a very large amount of virus can be produced in a very short period of culture. b) Interferon. Whereas three turkey herpesvirus strains and three nonpathogenic chicken herpesvirus strains produced no demonstrable interferon in vitro, three pathogenic MD virus strains tested were able to induce large amounts of interferon in chick embryo fibroblast cultures and in chick kidney cultures. In the light of the failure of the six strains mentioned above to produce interferon it seems certain that the interferon mechanism is not involved in protection against Marek's disease. c) Interference. Experimental proof was obtained of the occurrence of homologous interference in vitro. End-point passages with 24 hour intervals between infection and passage of cultures made it possible to avoid the formation of incomplete interfering virus particles to a large extent. Inactivated herpesvirus can also interfere with infectious virus. Infection of chick kidney cell cultures with turkey herpesvirus and subsequent infection with pathogenic MD virus can inhibit subsequent multiplication of MD virus. This in vitro heterologous interference has also been found in vivo and indeed constitutes one of the principles on which protection of day-old chicks against MD is based. Resume Multiplication, interference et induction d'interferon des especes d'Herpesvirus aviaires: contribution a la vaccination contre la maladie de Marek Communication II Les donnees des recherches experimentales reposent sur trois themes: a) Multiplication du virus Herpes du dondon in vitro: des recherches dans la chambre de courant et avec des anticorps marques ont montre que le passage du virus de cellule a cellule se fait par l'intermediaire de parties du cytoplasme de virus qui se detachent des cellules infectees pour etre prises ensuite par des cellules non infectees. En considerant ce mode de transmission cellulaire des virus Herpes du group B, il est possible de produire une plus grande quantite du virus dans un temps de culture plus bref. b) Interferon: alors que trois souches de virus Herpes du dindon et trois souches apathogenes de la poule n'ont pas induit d'interferon in vitro, trois souches pathogenes testees ont ete en mesure d'induire une grande quantite d'interferons aussi bien dans les cultures de fibroblastes d'embryons de poules que de cellules renales de poussins. Sur la base du manque d'induction d'interferons par les trois souches de dindon et les deux souches apathogenes de poule, on peut admettre que le mecanisme des interferons ne peut pas etre utilise avec sec souches pour une protection lors del l'apparition de la maladie de Marek. c) Interference: on a apporte la preuve experimentale de l'apparition de l'interference homologue in vitro. La formation de particules virales interferentes peut etre evitee dans une large mesure par des passages finaux a un intervalle de 24 heures entre une infection et une passage des cultures. Un virus Herpes inactive peut egalement interferer avec un virus infectieux. L'infection des cultures de reins de poussins avec un virus Herpes du dindon et l'infection qui a suivi avec un virus pathogene de la maladie de Marek ont ete capables d'inhiber de facon durable la multiplication du virus. Cet evenement observe in vitro et designe comme une interference heterologue a ete egalement constate in vivo selon la litterature et peut etre considere comme un des principes d'action de la vaccination des poussins d'un jour. Resumen Multiplicacion, interferencia e induccion de interferona de las especies de virus herpes aviar: contribucion a la vacunacion contra la enfermedad de Marek parte II Los resultados experimentales de la pesquisa se refieren a tres circulos de temas: a) Multiplicacion del virus herpes de pavo in vitro: mediante ensayos en la camara de perfusion y por medio de anticuerpos marcados se aporta la comprobacion de que la cesion de virus de celula acontece mediante partes citoplasmaticas que contienen el agente etiologico, las cuales son acordeladas por celulas infectadas e incorporadas poco tiempo despues por celulas no infectadas. Considerando esta via de transmision, al parecer propia de los virus herpes del grupo B asociados a las celulas, resulta posible una produccion mayor de virus con un tiempo de cultivacion simultanea mas breve. b) Interferona: mientras que tres estirpes de virus herpes de pavo y tres estirpes apatogenas de virus herpes de gallina no inducian in vitro ninguna interferona demostrable, se hallaban tres estirpes de VEM patogenas examinadas en condiciones de inducir la formacion de cantidades elevadas de interferona en cultivos celulares de fibroblastos de embriones de pollo y de rinones de pollitos. En consecuencia de la induccion ausente de interferona por las tres estirpes de virus herpes de pavo y las tres apatogenas de gallina puede darse como seguro que el mecanismo de interferona no entra en consideracion para la accion protectora de estas estirpes contra la genesis de la EM. c) Interferencia: se pudieron aportar pruebas experimentales de la presencia de interferencia homologa in vitro. Mediante pases terminales con una distancia temporal de 24 horas entre infeccion y pase de los cultivos se pudo impedir en sumo grado la farmacion de particulas viricas interferentes incompletas. El virus herpes inactivado tambien logra interferir con virus infeccioso. La infeccion con cultivos celulares de rinones de pollitos con virus herpes de pavo y la infeccion subsiguiente con virus patogeno de Marek consiguio de forma perdurable la multiplicacion del VEM. Este acontecimiento observado in vitro, calificado como interferencia heterologa, tambien se presenta in vivo con arreglo a los informes bibliograficos y se considera como uno de los principios de accion de la vacunacion profilactica de pollitos de un dia contra la EM.