P. M. G. Barbosa, M. S. Santos, Elane Galvão dos Santos, M. Batistote, Rodrigo Simões Ribeiro Leite
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A capacidade fermentativa foi realizada com tubos de Durhan com o mosto com concentracao de 12 °Brix. Para a avaliacao de producao da enzima invertase as celulas foram inoculadas no meio YEPS 2% e incubadas por 48 horas a 28 oC a 150 rpm. A biomassa foi recuperada e para a analise da enzima intracelular que foi realizado uma lise e para a extracelular o sobrenadante do meio fermentativo foi utilizado. A quantificacao foi realizada segundo metodo do acido 3,5-dinitrosalicilico - DNS. Foram isoladas 17 leveduras selvagens. As colonias dos isolados apresentaram caracteristicas morfologicas distintas. Apenas 6 isolados apresentaram capacidade fermentativa. O isolado A-1 apresentou valores superiores aos demais isolados quanto a producao de enzimas invertase tanto a extracelular como a intracelular, 9,58 U mL -1 e 24,70 U mL -1 respectivamente. 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摘要
酿酒酵母是研究最多的微生物之一,因为它们具有代谢能力和广泛的遗传多样性,使其能够在生物技术过程中作为其代谢物使用。因此,本研究旨在对野生酵母进行分离和形态表征,并对转化酶的生产进行生物技术应用评价。我们从大杜拉多斯地区的一个工厂采集了甘蔗汁的样品。将0.1 mL至1.10 -5的连续稀释剂镀在含有2% YPD固体培养基的培养皿中,在30°C下孵育72小时。然后进行宏观分析。发酵能力由杜汉管进行,必须在12°Brix浓度。为了评价转化酶的产生,细胞接种在2%的YEPS培养基中,在28°c、150 rpm下孵育48小时。对生物量进行回收,对细胞内酶进行裂解分析,对细胞外发酵培养基上清进行分析。采用3,5-二硝基水杨酸- DNS法进行定量。分离出17种野生酵母。分离菌株的菌落表现出明显的形态特征。只有6株菌株具有发酵能力。A-1菌株的细胞外和细胞内转化酶产量分别为9.58 U mL -1和24.70 U mL -1。在细胞内产生的转化酶最多。
LEVEDURAS SELVAGENS ISOLADAS DO CALDO DE CANA COM PERFIL PARA A PRODUÇÃO DE ENZIMAS
As leveduras Saccharomyces cerevisiae estao entre os microrganismos mais estudados, pois possuem uma capacidade metabolica e uma vasta diversidade genetica possibilitando tanto a sua utilizacao em processos biotecnologicos como de seus metabolitos. Assim, este estudo visa realizar o isolamento e a caracterizacao morfologica de leveduras selvagens e avaliar a producao da enzima invertase para a aplicacao biotecnologica. Foram coletadas amostras de mosto de caldo de cana de uma usina da Regiao da Grande Dourados. Foi realizado plaqueamento com 0,1 mL das diluicoes seriadas ate 1.10 -5 em placas de Petri contendo o meio solido YPD 2% e incubadas por 72 horas a 30 °C. Posteriormente foram submetidas a analise macroscopica. A capacidade fermentativa foi realizada com tubos de Durhan com o mosto com concentracao de 12 °Brix. Para a avaliacao de producao da enzima invertase as celulas foram inoculadas no meio YEPS 2% e incubadas por 48 horas a 28 oC a 150 rpm. A biomassa foi recuperada e para a analise da enzima intracelular que foi realizado uma lise e para a extracelular o sobrenadante do meio fermentativo foi utilizado. A quantificacao foi realizada segundo metodo do acido 3,5-dinitrosalicilico - DNS. Foram isoladas 17 leveduras selvagens. As colonias dos isolados apresentaram caracteristicas morfologicas distintas. Apenas 6 isolados apresentaram capacidade fermentativa. O isolado A-1 apresentou valores superiores aos demais isolados quanto a producao de enzimas invertase tanto a extracelular como a intracelular, 9,58 U mL -1 e 24,70 U mL -1 respectivamente. A maior producao da enzima invertase foi no meio intracelular.