Utilisation d’outils sélectifs pour l’analyse de traces dans des échantillons complexes

Florence Chapuis-Hugon, V. Pichon
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Abstract

Les faibles teneurs recherchees pour des composes appartenant a des classes tres diversifiees reste un reel challenge analytique quel que soit le domaine d’application (clinique, agroalimentaire, environnemental,…). L’evolution de l’instrumentation en termes de separation et de detection a permis d’ameliorer la sensibilite des methodes et de reduire le temps d’analyse. Cependant, les faibles niveaux de concentration et la complexite des matrices requierent encore l’incorporation d’etapes de purification et de preconcentration avant l’analyse chromatographique. Parmi les approches possibles, des supports d’extraction mettant en jeu un mecanisme de reconnaissance moleculaire peuvent etre developpes. L’objectif est alors d’extraire selectivement une molecule ou une famille structurale de molecules en l’isolant des autres constituants de l’echantillon de maniere a rendre leur analyse quantitative plus fiable et plus sensible. Ainsi, il est possible d’utiliser des supports d’immunoaffinite (immunoadsorbants) fondes sur l’utilisation d’anticorps specifiques des molecules d’interet. La grande selectivite et la grande affinite de l’interaction antigene-anticorps permet alors l’obtention d’un extrait propre et de facteurs d’enrichissement eleves. Ce meme mecanisme de retention peut egalement etre exploite par l’utilisation de polymeres a empreintes moleculaires dont la voie de synthese permet l’obtention de cavites mimant un site de reconnaissance antigene-anticorps. Enfin, des supports greffes par des aptameres ont tres recemment montre leur grand potentiel pour de l’extraction selective. Par comparaison de ces differentes approches, les principes, les avantages et les limites de ces outils d’extraction selective seront exposes.
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使用选择性工具对复杂样品进行痕量分析
无论应用领域(临床、农业食品、环境等),对属于非常多样化类别的化合物的低水平研究仍然是一个真正的分析挑战。仪器在分离和检测方面的发展提高了方法的灵敏度,减少了分析时间。然而,低浓度水平和基质的复杂性仍然需要在色谱分析前加入纯化和预浓缩步骤。在可能的方法中,可以开发利用分子识别机制的提取载体。其目的是选择性地提取一个分子或分子结构族,将其从样品的其他成分中分离出来,使定量分析更加可靠和灵敏。因此,可以使用基于感兴趣分子特异性抗体的免疫亲和力载体(免疫吸附剂)。抗原-抗体相互作用的高选择性和高亲和力使得获得干净的提取物和高富集因子成为可能。同样的保留机制也可以通过使用带有分子印迹的聚合物来利用,其合成途径允许获得模拟抗原-抗体识别位点的空腔。最后,适配体移植支架最近显示出选择性提取的巨大潜力。通过比较这些不同的方法,将阐述这些选择性提取工具的原则、优点和局限性。
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