Dosage simultané de huit glycols dans les milieux biologiques par chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse

Abstract

L'objectif de ce travail est de proposer une technique de dosage des glycols dans les milieux biologiques, par chromatographie en phase gazeuse couplee a la spectrometrie de masse : ethylene glycol = EG ; diethylene glycol = DEG ; 1,3-propanediol = 1,3-PD ; 1,2-propanediol = 1,2-PD ; 1,2- butanediol = 1,2-BD ; 2,3-butanediol = 2,3-BD ; triethylene glycol = TEG ; hexylene glycol = HXG. Le dosage est effectue par chromatographie en phase gazeuse couplee a la spectrometrie de masse a l'aide d'un injecteur de type split-splitless et d'une colonne classique de type DB5MS. La prise d'essai est constituee par 20 µl d'echantillon biologique prealablement dilue au dixieme. Apres deproteinisation de l'echantillon par l'acetonitrile, les glycols sont silyles en mono ou di derives TMS. La separation chromatographique des derives obtenus est suffisante, elle permet la quantification simultanee des 8 glycols. Les acquisitions sont realisees en mode courant ionique total de 40 a 500 uma. Le gamma-hydroxybutyrate d6 (GHB-d6 ) est utilise comme etalon interne. Apres extraction d'un ion de quantification et de deux ions de confirmation, la limite de detection et la limite de quantification s'echelonnent respectivement de 0,7 mg/l pour l'EG a 8,5 mg/l pour le TEG et de 1,3 mg/l pour l'EG a 18,2 mg/l pour le 1,2-PD. Dans le serum et le sang, une reponse lineaire est obtenue entre 1 a 18 selon le glycol et 800 mg/l. Pour une concentration de 400 mg/l, la repetabilite et la reproductibilite (n = 8 et 10) varient respectivement de 1,9 % pour le TEG a 4,9 % pour le 1,2-PD (11,8 % pour l'HXG), et de 3,5 % pour le DEG a 9,0 % pour le 2,3-BD (20,4 % pour l'HXG). La methode a ete appliquee avec succes au plasma et au sang total. Cette technique complete utilement la methode de dosage enzymatique de l'EG. Elle permet, outre la confirmation specifique de la presence d'EG, de quantifier simultanement sept autres glycols.