DNA hybridization for detection of human cytomegalovirus in bronchoalveolar lavage and pharynx biopsy

H. Agut , P. Deny , E. Rousseau , A. Garbarg-Chenon , C. Beliveau , F. Chabolle , H. Chouard , F. Bricout , J.C. Nicolas
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Abstract

A simplified hybridization procedure was used for detection of cytomegalovirus (CMV) in human specimens. The probe was a 32P-labelled cloned DNA fragment of CMV strain AD169. This probe did not hybridize to DNA from uninfected cells or other herpesviruses (herpes simplex virus, Epstein-Barr virus). Specific hybridization was obtained with unselected bronchoalveolar lavage specimens, but the sensitivity of the test (33%) was lower than that of culture (80%) and immunofluorescence (60%) assays which are routinely performed in our laboratory. The detection procedure was also carried out with pharynx biopsy specimens which had been kept frozen at −70°C. CMV DNA was detected in 14% of tumour specimens and only in 1.7% of control specimens (p<0.05). The indications of DNA hybridization for CMV diagnosis are discussed.

Une méthode simplifiée d'hybridation a été utilisée pour la détection du cytomégalovirus (CMV) dans les prélèvements humains. La sonde est un fragment cloné d'ADN issu de la souche AD169 du CMV et marqué par le 32P.

Cette sonde n'a donné aucune hybridation avec l'ADN des cellules non infectées ni avec celui d'autres virus Herpes (Herpes simplex virus, virus Epstein-Barr). Une hybridation spécifique a été obtenue sur des lavages broncho-alvéolaires n'ayant fait l'objet d'aucune sélection mais la sensibilité du test (33%) est inférieure à celle de la culture virale (80%) et à celle de l'immunofluorescence (60%) qui sont pratiquées en routine dans notre laboratoire. La même technique a été appliquée à des biopsies pharyngées qui avaient été conservées congelées à −70°C. L'ADN du CMV a été détecté dans 14% des prélèvements de tumeurs et seulement dans 1,7% des prélèvements témoins (p<0.05). Les indications de l'hybridation dans le diagnostic de l'infection à CMV sont discutées.

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DNA杂交检测支气管肺泡灌洗液和咽活检中巨细胞病毒
采用简化杂交方法检测人巨细胞病毒(CMV)。探针为32p标记的CMV AD169克隆DNA片段。该探针不能与未感染细胞或其他疱疹病毒(单纯疱疹病毒、爱泼斯坦-巴尔病毒)的DNA杂交。与未选择的支气管肺泡灌洗液标本进行特异性杂交,但该试验的敏感性(33%)低于我们实验室常规进行的培养(80%)和免疫荧光(60%)试验。在- 70°C冷冻保存的咽活检标本也进行了检测程序。在14%的肿瘤标本中检测到CMV DNA,而在对照标本中仅检测到1.7% (p < 0.05)。讨论了DNA杂交诊断巨细胞病毒的适应症。一种简化的、杂化的、利用的、与巨细胞病毒(CMV)有关的、与人类有关的、简化的、与人类有关的、与人类有关的。La sonde est un fragment cloncclond 'ADN issu de La souche AD169 du CMV et marqu parle 32P。Cette sonde n'a donnest n- 1细胞杂交,不感染单纯疱疹病毒(单纯疱疹病毒,爱泼斯坦-巴尔病毒)。在实验室常规实验中,有一种杂交方法,即将不同年龄的人与不同年龄的人结合,将不同年龄的人与不同年龄的人结合,将不同年龄的人与不同年龄的人结合,将不同年龄的人与不同年龄的人结合,将不同年龄的人与不同年龄的人结合。- 70°C - 70°C: La même technology a sametest appliquest sametes des biopsies pharyngsametes qui avaient sametes conserves conelsametes。L'ADN du CMV和cv / cv的比值为14%,与cv / cv的比值为1%,与cv / cv的比值为7% (p < 0.05)。本文讨论了巨细胞病毒杂交的适应症和诊断感染的适应症。
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