Purificación y evaluación de la proteína p25 como antígeno recombinate en la dectección del virus de la artritis encefalitis caprina (AEC)

Abstract

Para emplearse como antígeno en inmunoensayo indirecto, se purificó la proteína p25 recombinante del virus de la artritis encefalitis caprina mediante cromatografía de afinidad a iones metálicos inmovilizados. Se desarrollaron y estandarizaron las mejores condiciones que permitieron su fiabilidad, para después ser validada con un total de 46 muestras positivas y negativas de referencia. Se estableció la concentración de 4 µg/ml como óptima para la sensibilización de las microplacas. La robustez del ELISA se demostró utilizando como diseño el modelo de Youden y Stainer, y aplicando el criterio del comité de Secretaría de Salud. La concordancia respecto a un estuche comercial fue del 71.73 %, en cuanto a la sensibilidad y especificidad fue del 59.37 % y 100 %, respectivamente. Además, no se presentaron reacciones cruzadas para 3 antígenos probados previamente. Por lo tanto, se concluye que el método de ELISA recombinante implementado en este trabajo, es un método excelente, sencillo, barato y específico para el diagnóstico y tamizaje de la artritis encefalitis caprina, ya que disminuye las reacciones cruzadas.