IONIC STRENGTH AND pH EFFECTS ON OPTICAL THERMOGRAPHS FOR BOVINE SERUM ALBUMIN (BSA) EFECTOS DE LA FUERZA IÓNICA Y EL pH SOBRE LOS TERMOGRAMAS ÓPTICOS DE LA SEROALBUMINA BOVINA (BSA)
T. Kongraksawech, P. Vazquez-Landaverde, J. Huerta-Ruelas, J. Torres
{"title":"IONIC STRENGTH AND pH EFFECTS ON OPTICAL THERMOGRAPHS FOR BOVINE SERUM ALBUMIN (BSA) EFECTOS DE LA FUERZA IÓNICA Y EL pH SOBRE LOS TERMOGRAMAS ÓPTICOS DE LA SEROALBUMINA BOVINA (BSA)","authors":"T. Kongraksawech, P. Vazquez-Landaverde, J. Huerta-Ruelas, J. Torres","doi":"10.1080/11358120709487699","DOIUrl":null,"url":null,"abstract":"Abstract An optical method using a custom-built system was investigated to study heating effects on bovine serum albumin (BSA) as affected by pH and ionic strength (IS). Changes in the optical rotation (OR) and transmitted light (TL) of BSA in 0.01 M phosphate buffer at pH 6.1, 7, and 7.9 with IS maintained at 0.04, 0.08, and 0.16 were monitored while heating the solution at ∼6°C/min from room temperature to ∼85°C. There was no significant effect of IS on BSA's denaturation temperature (Td) values. Td was affected by pH with lower values observed at pH 7.9 than at pH 7 but not statistically different from values at pH 6.1. Values at pH 6.1 and 7 were not significantly different either. These observations were consistent with literature values determined by differential scanning calorimetry. Changes in the TL signal, reflecting the formation of an opaque gel, were not detected at pH 7.9, identified only at the two highest IS at pH 7, and observed always at pH 6.1, i.e., closest to the pH value for the isoelectric point (pI) of BSA reported to be around pH 4.7 to 5.2. Promoting of gel formation by IS was attributed to the screening of intra- and intermolecular electrostatic forces. Resumen Un método óptico basado en un sistema experimental especialmente construido para este propósito fue usado para investigar la influencia del pH y la fuerza iónica sobre los efectos térmicos en la seroalbúmina bovina (BSA). Los cambios en la rotación óptica (OR) y la luz transmitida (TL) de soluciones buffer de fosfato 0,01 M con 2,5% de seroalbúmina bovina (BSA) a pH 6,1, 7 y 7,9 y una fuerza iónica (IS) de 0,04, 0,08 ó 0,16 fueron monitoreados durante su calentamiento a ∼6°C/min desde temperatura ambiente hasta ∼85°C. No se observó un efecto estadísticamente significativo de IS sobre la temperatura de desnaturalizacion térmica (Td). Td fue afectada por el pH con valores menores observados a pH 7,9 que a pH 7 pero no estadísticamente diferentes del valor a pH 6,1. Valores a pH 6,1 y 7 tampoco fueron estadísticamente diferentes entre ellos. Estas observaciones son consistentes con valores reportados en la literatura y obtenidos por el método de Calorimetría Diferencial de Barrido (DSC). Cambios en la señal de TL, reflejando la formación de un gel opaco, no fueron detectados a pH 7,9, encontrados solo a los valores mayores de IS a pH 7, y observados consistentemente a pH 6,1, el valor de pH incluido en este estudio más cercano al punto isoeléctrico de BSA y reportado entre pH 4,7 y 5,2. El efecto de la IS en la mayor formación de geles fue atribuido al su capacidad de bloquear fuerzas electrostáticas intra- e intermoleculares. Palabras clave: Propiedades ópticas, seroalbúmina bovina, luz transmitida","PeriodicalId":10174,"journal":{"name":"Ciencia y Tecnologia Alimentaria","volume":null,"pages":null},"PeriodicalIF":0.0000,"publicationDate":"2007-07-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":"10","resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":null,"PeriodicalName":"Ciencia y Tecnologia Alimentaria","FirstCategoryId":"1085","ListUrlMain":"https://doi.org/10.1080/11358120709487699","RegionNum":0,"RegionCategory":null,"ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":null,"EPubDate":"","PubModel":"","JCR":"","JCRName":"","Score":null,"Total":0}
引用次数: 10
Abstract
Abstract An optical method using a custom-built system was investigated to study heating effects on bovine serum albumin (BSA) as affected by pH and ionic strength (IS). Changes in the optical rotation (OR) and transmitted light (TL) of BSA in 0.01 M phosphate buffer at pH 6.1, 7, and 7.9 with IS maintained at 0.04, 0.08, and 0.16 were monitored while heating the solution at ∼6°C/min from room temperature to ∼85°C. There was no significant effect of IS on BSA's denaturation temperature (Td) values. Td was affected by pH with lower values observed at pH 7.9 than at pH 7 but not statistically different from values at pH 6.1. Values at pH 6.1 and 7 were not significantly different either. These observations were consistent with literature values determined by differential scanning calorimetry. Changes in the TL signal, reflecting the formation of an opaque gel, were not detected at pH 7.9, identified only at the two highest IS at pH 7, and observed always at pH 6.1, i.e., closest to the pH value for the isoelectric point (pI) of BSA reported to be around pH 4.7 to 5.2. Promoting of gel formation by IS was attributed to the screening of intra- and intermolecular electrostatic forces. Resumen Un método óptico basado en un sistema experimental especialmente construido para este propósito fue usado para investigar la influencia del pH y la fuerza iónica sobre los efectos térmicos en la seroalbúmina bovina (BSA). Los cambios en la rotación óptica (OR) y la luz transmitida (TL) de soluciones buffer de fosfato 0,01 M con 2,5% de seroalbúmina bovina (BSA) a pH 6,1, 7 y 7,9 y una fuerza iónica (IS) de 0,04, 0,08 ó 0,16 fueron monitoreados durante su calentamiento a ∼6°C/min desde temperatura ambiente hasta ∼85°C. No se observó un efecto estadísticamente significativo de IS sobre la temperatura de desnaturalizacion térmica (Td). Td fue afectada por el pH con valores menores observados a pH 7,9 que a pH 7 pero no estadísticamente diferentes del valor a pH 6,1. Valores a pH 6,1 y 7 tampoco fueron estadísticamente diferentes entre ellos. Estas observaciones son consistentes con valores reportados en la literatura y obtenidos por el método de Calorimetría Diferencial de Barrido (DSC). Cambios en la señal de TL, reflejando la formación de un gel opaco, no fueron detectados a pH 7,9, encontrados solo a los valores mayores de IS a pH 7, y observados consistentemente a pH 6,1, el valor de pH incluido en este estudio más cercano al punto isoeléctrico de BSA y reportado entre pH 4,7 y 5,2. El efecto de la IS en la mayor formación de geles fue atribuido al su capacidad de bloquear fuerzas electrostáticas intra- e intermoleculares. Palabras clave: Propiedades ópticas, seroalbúmina bovina, luz transmitida
摘要采用光学方法研究了pH值和离子强度对牛血清白蛋白(BSA)加热效应的影响。在pH为6.1、7和7.9、IS为0.04、0.08和0.16的0.01 M磷酸盐缓冲液中,监测BSA的旋光度(OR)和透射光(TL)的变化,同时以~ 6°C/min的速度从室温加热至~ 85°C。IS对牛血清变性温度(Td)值无显著影响。pH值对Td有影响,pH值7.9比pH值7低,但与pH值6.1无统计学差异。pH值在6.1和7时也无显著差异。这些观察结果与差示扫描量热法测定的文献值一致。反映不透明凝胶形成的TL信号的变化在pH为7.9时未被检测到,仅在pH为7时的两个最高IS处被检测到,并且总是在pH为6.1时被观察到,即最接近BSA等电点(pI)的pH值,报道的pH为4.7至5.2左右。IS促进凝胶形成归因于分子内和分子间静电力的筛选。复本本研究的主要内容为:系统实验-特别研究-建立- 系统实验- propósito - 系统研究- 系统研究- 系统研究- 系统研究- 系统研究- 系统研究- 系统研究- 系统研究- 系统研究- 系统研究- 系统研究- 系统研究- 。Los cambios en la rotación óptica (OR) y la luz transmitida (TL) de soluciones buffer de fofafa01 M con 2,5% de seroalbúmina bovina (BSA) a pH 6,1,7 y 7,9 y una fuerza iónica (IS) de 0,04, 0,08 ó 0,16 fueron monitoreados durante su calentamiito a ~ 6°C/min,环境温度为~ 85°C。No se observó un effect estadísticamente显著性地降低了温度和非自然化(Td)。在pH值为7,9时,pH值为7,9时,pH值为7,1时,pH值与pH值为6,1时,pH值的差异为estadísticamente。Valores a pH 6,1 y 7 tampoco fueron estadísticamente不同的中心细胞。从文献的角度看,观察所得的结果与报告的价值是一致的。Cambios en la señal de TL, reflejando la formación de ungel不透明,没有fueron探测器,pH值为7,9,encontros solo和los valores mayores de IS, pH值为7,1,el valos de pH包括en este estudio más cercano al punto isoelactrico de BSA,通过报告中心pH值为4,7和5,2。分子内-分子间效应:分子内-分子间效应formación分子内-分子间效应:分子内-分子间效应:分子内-分子间效应。牛虻:牛虻ópticas, seroalbúmina,牛虻