AVALIAÇÃO IN SILICO DE POSSÍVEL MECANISMO DE AÇÃO DE DERIVADOS 2-CIANO-FENILACRILAMIDA PARA A ARTRITE REUMATOIDE, VIA INIBIÇÃO DA ENZIMA DIIDROOROTATO DESIDROGENASE (DHODH)

Abstract

Introdução: A artrite reumatoide é uma desordem crônica e autoimune, caracterizada por inflamação da membrana sinovial e produção de autoanticorpos que destroem cartilagens articulares. Um alvo relevante é a diidroorotato desidrogenase (DHODH), enzima mitocondrial-chave envolvida na síntese de novo de pirimidinas em células proliferativas, como linfócitos T e B, que iniciam resposta imune e promovem sinovite. Nesse sentido, os derivados (E)-2-ciano-3-(1H-indol-3-il)-N-fenilacrilamida (ICMD-01) e (E)-2-ciano-N,3-difenilacrilamida (JMPR-01), previamente publicados, são promissores para tratamento de artrite, pois, em concentrações não citotóxicas, demonstraram redução in vitro da produção de nitrito e citocinas, bem como diminuição in vivo de migração de leucócitos e edema de pata em 2-6 horas, além de exibirem semelhanças estruturais com a Teriflunomida, metabólito ativo da Leflunomida, inibidor da DHODH e modificador do curso da doença. Objetivo: Assim, esse estudo visa avaliar possível mecanismo de ação para artrite reumatoide, via inibição da DHODH, de derivados 2-ciano-fenilacrilamida, através de ancoragem molecular (docking molecular). Material e métodos: Para isso, o docking foi simulado no AutoDock Tools, com a enzima DHODH (ID: 4OQV), retirada do Protein Data Bank e tratada no PyMol, para remoção de cofatores e água. Além disso, a análise das interações com a enzima foi feita no Discovery Studio e a metodologia foi validada após obter a conformação do ligante co-cristalizado com RMSD abaixo de 2,0 Å. Resultados: Como resultado, o ICMD-01 e o JMPR-01 apresentaram menor energia livre de ligação (-11,42 e -9,65 kcal/mol, respectivamente) e constante inibitória estimada (4,24 e 84,24 nM), em relação ao 2V6 (-8,27 kcal/mol e 868,74 nM), composto que demonstrou forte inibição in vitro da DHODH humana (1,6 μM). A maior afinidade dos derivados pode ser explicada pelo maior número de interações de hidrogênio com a enzima, em relação ao 2V6, que realizou mais ligações hidrofóbicas, com aminoácidos apolares do sítio ativo. Já a maior afinidade do ICMD-01 em comparação com o JMPR-01 deve-se, provavelmente, à maior complementariedade do primeiro com a enzima, pois a simplificação molecular levou à perda de uma ligação de hidrogênio. Conclusão: Portanto, os derivados 2-ciano-fenilacrilamida mostraram-se bastante promissores para tratamento de artrite reumatoide, via inibição da DHODH, com alta afinidade para esta enzima.