从内窥镜检查获得的胃活检中初步培养幽门螺杆菌

Silvia Molina-Castro, Christian Campos-Núñez, Sundry Durán-Bermúdez, Manuel Chaves-Cerventes, Vanessa Ramírez-Mayorga
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Para este último, se transportaron las biopsias en un medio de transporte semisólido, se maceró el tejido y se cultivó en agar Skirrow y agar selectivo para Helicobacter; una placa de cada medio se incubó a 37 °C en microaerofilia entre 48 horas y 10 días. La positividad del cultivo se realizó por observación de la morfología colonial y la bacteria se identificó por análisis microscópico al fresco, tinción de Gram y pruebas bioquímicas (catalasa, ureasa y oxidasa).Resultados: Se incluyó a 44 pacientes (edad: 50.6 ± 10.0, 54.5% masculinos). Se recuperó Helicobacter pylori en biopsias de 27 pacientes (61.4% de éxito). La recuperación de la bacteria fue similar en el medio Skirrow y en el selectivo para Helicobacter. El porcentaje de éxito de recuperación semanal aumentó durante el estudio hasta alcanzar un éxito del 100% en la semana 11. Se comparó el cultivo con la ureasa rápida en 27 pacientes y la concordancia entre ambos métodos fue de un coeficiente kappa de Cohen de 0.48. 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摘要

本研究的目的是确定哥斯达黎加幽门螺杆菌培养的可行性,通过文献取样、组织病理学诊断的比较和与快速脲酶结果分离相关的诊断描述。方法:对2019年2月至6月在clinica biblica医院消化内窥镜服务中心就诊的35 - 70岁男女患者进行描述性研究。我们进行了胃活检,进行组织病理学诊断、快速脲酶检测和幽门螺杆菌培养。对于后者,活检在半固体运输介质中运输,组织浸渍,在Skirrow琼脂和选择性幽门螺杆菌琼脂中培养;每一种培养基在37°C微气培养48小时至10天。通过观察菌落形态进行阳性培养,通过新鲜显微镜分析、革兰氏染色和生化试验(过氧化氢酶、脲酶和氧化酶)鉴定细菌。结果:纳入44例患者(年龄50.6±10.0,男性54.5%)。幽门螺杆菌在27例患者的活检中恢复(成功率61.4%)。在本研究中,我们评估了两种不同类型的幽门螺杆菌,一种是选择性幽门螺杆菌,另一种是选择性幽门螺杆菌。在整个研究过程中,每周恢复成功率增加,在第11周达到100%。我们比较了27例患者的快速脲酶培养,两种方法的一致性为0.48 Cohen kappa系数。培养在56%的患者中检测到细菌,快速脲酶检测到37%,两种技术的结合使检测到60%。培养阳性的患者最常见的内镜诊断是红斑胃炎和慢性浅表胃炎,主要的组织病理学诊断是慢性胃炎伴胃萎缩。在80.4%的病例中,培养诊断与甲苯胺蓝检测一致。结论:幽门螺杆菌培养可在哥斯达黎加实施。本研究的细菌回收率为61.4%。培养方法与快速脲酶检测和组织学检测相结合,有助于准确、及时的诊断。我们建议,基于本研究中描述的协议,每个实验室标准化条件,允许良好的回收率和适应其日常活动的实施。
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Cultivo primario de Helicobacter pylori a partir de biopsias gástricas obtenidas por endoscopia
Objetivo: Determinar la viabilidad del cultivo de la bacteria Helicobacter pylori en Costa Rica por medio de la documentación de toma de muestras, la comparación del diagnóstico histopatológico y la descripción de los diagnósticos asociados a los aislamientos obtenidos con los resultados de la ureasa rápida. Métodos: Investigación descriptiva que involucró a pacientes de entre los 35 y 70 años, de ambos sexos, que asistieron al Servicio de Endoscopia Digestiva del Hospital Clínica Bíblica entre febrero y junio del 2019 para estudio gastroscópico. Se obtuvieron biopsias gástricas para diagnóstico histopatológico, prueba de ureasa rápida y cultivo de Helicobacter pylori. Para este último, se transportaron las biopsias en un medio de transporte semisólido, se maceró el tejido y se cultivó en agar Skirrow y agar selectivo para Helicobacter; una placa de cada medio se incubó a 37 °C en microaerofilia entre 48 horas y 10 días. La positividad del cultivo se realizó por observación de la morfología colonial y la bacteria se identificó por análisis microscópico al fresco, tinción de Gram y pruebas bioquímicas (catalasa, ureasa y oxidasa).Resultados: Se incluyó a 44 pacientes (edad: 50.6 ± 10.0, 54.5% masculinos). Se recuperó Helicobacter pylori en biopsias de 27 pacientes (61.4% de éxito). La recuperación de la bacteria fue similar en el medio Skirrow y en el selectivo para Helicobacter. El porcentaje de éxito de recuperación semanal aumentó durante el estudio hasta alcanzar un éxito del 100% en la semana 11. Se comparó el cultivo con la ureasa rápida en 27 pacientes y la concordancia entre ambos métodos fue de un coeficiente kappa de Cohen de 0.48. El cultivo detectó la bacteria en un 56% de los pacientes, la ureasa rápida en un 37% y la combinación de ambas técnicas permitió la detección en un 60%. El diagnóstico endoscópico más frecuente en los pacientes con cultivo positivo fue la gastritis eritematosa y gastritis crónica superficial y el diagnóstico histopatológico predominante fue gastritis crónica con atrofia gástrica. El diagnóstico por cultivo coincidió con la detección por azul de toluidina en un 80.4% de los casos.Conclusiones: Se puede implementar el cultivo de Helicobacter pylori en Costa Rica. Este estudio tuvo un porcentaje de recuperación de la bacteria de 61.4%. La combinación del método de cultivo con la prueba de ureasa rápida y la detección histológica contribuye a un diagnóstico certero y oportuno. Recomendamos que, con base en protocolos descritos en esta investigación, cada laboratorio estandarice las condiciones que le permitan un buen porcentaje de recuperación y una implementación adaptada a sus actividades de rutina.
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