冷冻生海产品中同时分离副溶血性弧菌和霍乱弧菌的选择性富集优化

S. Copin, A. Rouxel, M. Cornu, A. Robert-Pillot, M. Quilici, P. Malle, J. Lesne
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摘要

随着进口海产品消费的增加,有必要对这些产品进行监控。本研究的目的是优化分离鉴定前的选择性富集步骤,同时检测冷冻海产品中的副溶血性弧菌和霍乱弧菌。在两个实验室对59个不同地理来源的自然污染样本进行了10个检测方案的比较。采用PCR方法进行物种鉴定和致病因子研究。总共有37个样本对这两种物种中的一种或另一种呈阳性;没有分离物具有潜在的致病性。对结果的分析表明了富集阶段的重要性,特别是富集介质的培养时间。该方法适用于冷冻海产品中副溶血弧菌和霍乱弧菌的同时检测。在微生物实验室的常规分析中,使用单一的检测方案具有真正的优势。由于分子生物学的发展,在等待快速和具体的鉴定和定量方法的同时,所提出的常规方法应该能够更好地分离冷冻海产品中主要的潜在致病性弧菌。
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Optimisation of selective enrichment for the simultaneous isolation of Vibrio parahaemolyticus and Vibrio cholerae in frozen raw seafood products
L'augmentation de la consommation des produits de la mer importes justifie une surveillance de ces denrees. Le but de notre etude est d'optimiser l'etape d'enrichissement selectif, avant l'isolement et l'identification, pour la detection simultanee de Vibrio parahaemolyticus et Vibrio cholerae dans les produits de la mer congeles. Dix protocoles de detection ont ete compares dans deux laboratoires sur 59 echantillons naturellement contamines d'origine geographique variee. L'identification de l'espece et la recherche des facteurs de pathogenicite ont ete realisees par PCR. Au total, 37 echantillons etaient positifs a l'une ou/et l'autre de ces deux especes ; aucun isolat n'etait potentiellement pathogene. L'analyse des resultats met en evidence l'importance de la phase d'enrichissement, principalement la duree d'incubation du milieu d'enrichissement. La methode proposee est appropriee a la detection simultanee de Vibrio parahaemolyticus et Vibrio cholerae dans les produits de la mer congeles. L'utilisation d'un protocole unique de detection presente un reel avantage lors d'analyses de routine dans les laboratoires de microbiologie. Dans l'attente de methodes d'identification et de quantification rapides et specifiques grâce au developpement de la biologie moleculaire, la methode de routine proposee devrait permettre de mieux isoler les principaux Vibrio potentiellement pathogenes dans les produits de la mer congeles.
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