Pub Date : 2017-10-26DOI: 10.1515/labmed-2017-0095
A. Giannetti, B. Adinolfi, S. Berneschi, C. Berrettoni, F. Chiavaioli, S. Tombelli, C. Trono, F. Baldini
Abstract The activity developed at the Institute of Applied Physics “Nello Carrara” in strict collaboration with physicians is described with particular attention to the measurement of bile-containing refluxes in the gastroesophageal apparatus, to the detection of gastric carbon dioxide in intensive care patients, to the measurement of sepsis biomarkers in serum samples and to the measurements of immunosuppressants in transplanted patients.
{"title":"Optical sensing in POCT: the contribution of the Institute of Applied Physics of the Italian CNR","authors":"A. Giannetti, B. Adinolfi, S. Berneschi, C. Berrettoni, F. Chiavaioli, S. Tombelli, C. Trono, F. Baldini","doi":"10.1515/labmed-2017-0095","DOIUrl":"https://doi.org/10.1515/labmed-2017-0095","url":null,"abstract":"Abstract The activity developed at the Institute of Applied Physics “Nello Carrara” in strict collaboration with physicians is described with particular attention to the measurement of bile-containing refluxes in the gastroesophageal apparatus, to the detection of gastric carbon dioxide in intensive care patients, to the measurement of sepsis biomarkers in serum samples and to the measurements of immunosuppressants in transplanted patients.","PeriodicalId":49926,"journal":{"name":"Laboratoriumsmedizin-Journal of Laboratory Medicine","volume":"56 1","pages":"251 - 256"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"2017-10-26","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"78439229","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2017-10-26DOI: 10.1515/labmed-2017-0089
G. Freckmann
Zusammenfassung Der HbA1c-Wert ist ein in der Diabetologie etablierter Langzeitmarker zur Stoffwechselkontrolle, der mit der mittleren Glukosekonzentration der letzten ~2–3 Monate korreliert. Der HbA1c dient zur Kontrolle der Therapieziele ist somit ein wichtiger Bestandteil jeder Patientenvisite. Mit Point-of-Care-Messsystemen (POC) erfolgt die HbA1c-Bestimmung direkt in der Praxis und das Ergebnis steht innerhalb kurzer Zeit zur Verfügung. Ein POC- HbA1c-Messsystem in der Arztpraxis unterliegt nach Rili-BÄK der praxisinternen Qualitätskontrolle mit vom Hersteller geliefertem Kontrollmaterial, allerdings ist eine Teilnahme an Ringversuchen nicht verpflichtend. Wenn man dennoch an Ringversuchen teilnimmt beträgt die zulässige Abweichung ±18% vom Zielwert, was in Kombination mit dem teilweise noch verwendeten, nicht für alle Systeme kommutablen Ringversuchsmaterial, keine sichere Beurteilung der Genauigkeit zulässt. Die Messgenauigkeit von HbA1c-POC-Systemen variiert nach der aktuellen Studienlage deutlich. Teilweise zeigte sich zum Beispiel ein deutlicher Bias in beide Richtungen. Um eine zuverlässige Überprüfung der Messqualität von POC- HbA1c-Messsystem zu ermöglichen sollte die Teilnahme am Ringversuch verpflichtend werden. Eine Umstellung auf Vollblut als Kontrollmaterial im Ringversuch und eine deutliche Senkung der zulässigen Abweichung im Ringversuch sollte angestrebt werden. Mit solchen Maßnahmen ließe sich eine aussagekräftige herstellerunabhängige Qualitätskontrolle sicherstellen.
{"title":"HbA1c-POC-Systeme zur Therapiekontrolle und Diagnostik des Diabetes: Ausreichende Qualität und Qualitätskontrolle?","authors":"G. Freckmann","doi":"10.1515/labmed-2017-0089","DOIUrl":"https://doi.org/10.1515/labmed-2017-0089","url":null,"abstract":"Zusammenfassung Der HbA1c-Wert ist ein in der Diabetologie etablierter Langzeitmarker zur Stoffwechselkontrolle, der mit der mittleren Glukosekonzentration der letzten ~2–3 Monate korreliert. Der HbA1c dient zur Kontrolle der Therapieziele ist somit ein wichtiger Bestandteil jeder Patientenvisite. Mit Point-of-Care-Messsystemen (POC) erfolgt die HbA1c-Bestimmung direkt in der Praxis und das Ergebnis steht innerhalb kurzer Zeit zur Verfügung. Ein POC- HbA1c-Messsystem in der Arztpraxis unterliegt nach Rili-BÄK der praxisinternen Qualitätskontrolle mit vom Hersteller geliefertem Kontrollmaterial, allerdings ist eine Teilnahme an Ringversuchen nicht verpflichtend. Wenn man dennoch an Ringversuchen teilnimmt beträgt die zulässige Abweichung ±18% vom Zielwert, was in Kombination mit dem teilweise noch verwendeten, nicht für alle Systeme kommutablen Ringversuchsmaterial, keine sichere Beurteilung der Genauigkeit zulässt. Die Messgenauigkeit von HbA1c-POC-Systemen variiert nach der aktuellen Studienlage deutlich. Teilweise zeigte sich zum Beispiel ein deutlicher Bias in beide Richtungen. Um eine zuverlässige Überprüfung der Messqualität von POC- HbA1c-Messsystem zu ermöglichen sollte die Teilnahme am Ringversuch verpflichtend werden. Eine Umstellung auf Vollblut als Kontrollmaterial im Ringversuch und eine deutliche Senkung der zulässigen Abweichung im Ringversuch sollte angestrebt werden. Mit solchen Maßnahmen ließe sich eine aussagekräftige herstellerunabhängige Qualitätskontrolle sicherstellen.","PeriodicalId":49926,"journal":{"name":"Laboratoriumsmedizin-Journal of Laboratory Medicine","volume":"28 1","pages":"263 - 267"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"2017-10-26","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"78887521","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2017-10-26DOI: 10.1515/labmed-2017-0097
G. Hintereder
Zusammenfassung Die Einführung von Patient Blood Management (PBM) führt zu einem Paradigmenwechsel bezüglich Erkennen und Therapie der Anämie und zeigt Maßnahmen auf um die Entstehung einer Anämie zu verhindern. PBM unterstützt den Arzt im Entscheidungsdilemma zwischen positiver Wirkung und nachteiligen Nebenwirkungen von Bluttransfusionen. Mit PBM wird der Blutverbrauch deutlich reduziert und die Nebenwirkungen gesenkt. Nicht nur die therapeutischen Maßnahmen, sondern auch die diagnostischen PBM Maßnahmen im Labor führen zu einer relevanten Verringerung des Blutvolumens. PBM Studienergebnisse zeigen eine signifikant Reduktion der Morbidität und Mortalität und die Verbesserung des Patienten- Outcome. Ein weiterer positiver Nebeneffekt ist Schonung von Ressourcen in allen beteiligten Bereichen, welches zu einer relevanten Kostenreduktion und Steigerung der Wirtschaftlichkeit führt. Zusätzlich sensibilisiert das PBM bezüglich des Vorliegens, der Entwicklung und der Therapie einer anämischen Situation sowie den Umgang mit der kostbaren Ressource Blut. Die Bedeutung des PBM wird mittlerweile von der Industrie auch für das Labor unterstützt; für den Bereich POCT ist das PBM jedoch bisher noch nicht adäquat technisch realisiert.
{"title":"Patient Blood Management – Labormedizinische Unterstützung und POCT","authors":"G. Hintereder","doi":"10.1515/labmed-2017-0097","DOIUrl":"https://doi.org/10.1515/labmed-2017-0097","url":null,"abstract":"Zusammenfassung Die Einführung von Patient Blood Management (PBM) führt zu einem Paradigmenwechsel bezüglich Erkennen und Therapie der Anämie und zeigt Maßnahmen auf um die Entstehung einer Anämie zu verhindern. PBM unterstützt den Arzt im Entscheidungsdilemma zwischen positiver Wirkung und nachteiligen Nebenwirkungen von Bluttransfusionen. Mit PBM wird der Blutverbrauch deutlich reduziert und die Nebenwirkungen gesenkt. Nicht nur die therapeutischen Maßnahmen, sondern auch die diagnostischen PBM Maßnahmen im Labor führen zu einer relevanten Verringerung des Blutvolumens. PBM Studienergebnisse zeigen eine signifikant Reduktion der Morbidität und Mortalität und die Verbesserung des Patienten- Outcome. Ein weiterer positiver Nebeneffekt ist Schonung von Ressourcen in allen beteiligten Bereichen, welches zu einer relevanten Kostenreduktion und Steigerung der Wirtschaftlichkeit führt. Zusätzlich sensibilisiert das PBM bezüglich des Vorliegens, der Entwicklung und der Therapie einer anämischen Situation sowie den Umgang mit der kostbaren Ressource Blut. Die Bedeutung des PBM wird mittlerweile von der Industrie auch für das Labor unterstützt; für den Bereich POCT ist das PBM jedoch bisher noch nicht adäquat technisch realisiert.","PeriodicalId":49926,"journal":{"name":"Laboratoriumsmedizin-Journal of Laboratory Medicine","volume":"75 1","pages":"219 - 227"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"2017-10-26","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"83582929","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2017-10-26DOI: 10.1515/labmed-2017-0088
Nicola Barabas, Andreas Bietenbeck
Abstract Insufficient operator training has been identified as an underlying root cause for many errors of point-of-care testing. However, while the need for operator training is beyond doubt, the practical solutions on how to train operators remain challenging. Therefore a multidisciplinary team of experts created the application guide VDE-AR-E 2411-2-101 “Schulung professioneller Anwender von patientennahen Tests” (Training of professional users of devices for near-patient testing). This work is based on the talk of Nicola Barabas during the POCT-Symposium in Munich 2017 and presents selected aspects of the application guide such as the role of the manufacturer, the learning path, the selection of training topics, the train-the-trainer concept and e-learning.
操作人员培训不足已被确定为许多护理点测试错误的根本原因。然而，虽然操作员培训的必要性是毋庸置疑的，但如何培训操作员的实际解决方案仍然具有挑战性。因此，多学科专家团队创建了应用指南VDE-AR-E 2411-2-101“Schulung professioneller Anwender von patientennahen测试”(对近患者测试设备的专业用户进行培训)。这项工作是基于Nicola Barabas在2017年慕尼黑poct研讨会上的演讲，并介绍了应用指南的选定方面，如制造商的角色、学习路径、培训主题的选择、培训师培训概念和电子学习。
{"title":"Application guide: training of professional users of devices for near-patient testing","authors":"Nicola Barabas, Andreas Bietenbeck","doi":"10.1515/labmed-2017-0088","DOIUrl":"https://doi.org/10.1515/labmed-2017-0088","url":null,"abstract":"Abstract Insufficient operator training has been identified as an underlying root cause for many errors of point-of-care testing. However, while the need for operator training is beyond doubt, the practical solutions on how to train operators remain challenging. Therefore a multidisciplinary team of experts created the application guide VDE-AR-E 2411-2-101 “Schulung professioneller Anwender von patientennahen Tests” (Training of professional users of devices for near-patient testing). This work is based on the talk of Nicola Barabas during the POCT-Symposium in Munich 2017 and presents selected aspects of the application guide such as the role of the manufacturer, the learning path, the selection of training topics, the train-the-trainer concept and e-learning.","PeriodicalId":49926,"journal":{"name":"Laboratoriumsmedizin-Journal of Laboratory Medicine","volume":"18 1","pages":"215 - 218"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"2017-10-26","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"82019899","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2017-10-26DOI: 10.1515/labmed-2017-0092
Silvia Achtzehn, Michael Behringer, M. Krüger, P. Wahl, Yvonne Wahl, H. Broich, J. Mester
Zusammenfassung In der Sportmedizin und -wissenschaft sowie im Hochleistungssport werden Untersuchungen sowohl unter standardisierten Bedingungen im Labor als auch im Feld durchgeführt. Es kommen dabei die unterschiedlichsten medizinischen Messmethoden zum Einsatz. Fast immer werden sie von Blutanalysen begleitet, wobei sowohl hochkomplexe Laborverfahren als auch das Point of care Testing (POCT) angewendet werden. Auch wenn das POCT schon mit Beginn seiner Entwicklung im sportlichen Kontext Beachtung gefunden hat, so ist der Begriff in diesem Bereich noch nicht etabliert und Veröffentlichungen von Untersuchungen mit Leistungs- und Spitzensportlern, bei denen das POCT als Messmethode explizit genannt wird, bisher sehr selten. Der vorliegende Artikel soll aus diesem Grund an Hand unterschiedlicher Studien und in Anlehnung an einen Vortrag auf dem 3. Münchener POCT-Symposium einen Überblick über die verschiedenen Fragestellungen mit sportwissenschaftlichem Hintergrund bieten, bei denen POCT zur athletennahen Sofortdiagnostik eingesetzt wird.
{"title":"POCT: Möglichkeiten und Anwendungsbereiche zur athletennahen Sofortdiagnostik im Hochleistungs- und Spitzensport","authors":"Silvia Achtzehn, Michael Behringer, M. Krüger, P. Wahl, Yvonne Wahl, H. Broich, J. Mester","doi":"10.1515/labmed-2017-0092","DOIUrl":"https://doi.org/10.1515/labmed-2017-0092","url":null,"abstract":"Zusammenfassung In der Sportmedizin und -wissenschaft sowie im Hochleistungssport werden Untersuchungen sowohl unter standardisierten Bedingungen im Labor als auch im Feld durchgeführt. Es kommen dabei die unterschiedlichsten medizinischen Messmethoden zum Einsatz. Fast immer werden sie von Blutanalysen begleitet, wobei sowohl hochkomplexe Laborverfahren als auch das Point of care Testing (POCT) angewendet werden. Auch wenn das POCT schon mit Beginn seiner Entwicklung im sportlichen Kontext Beachtung gefunden hat, so ist der Begriff in diesem Bereich noch nicht etabliert und Veröffentlichungen von Untersuchungen mit Leistungs- und Spitzensportlern, bei denen das POCT als Messmethode explizit genannt wird, bisher sehr selten. Der vorliegende Artikel soll aus diesem Grund an Hand unterschiedlicher Studien und in Anlehnung an einen Vortrag auf dem 3. Münchener POCT-Symposium einen Überblick über die verschiedenen Fragestellungen mit sportwissenschaftlichem Hintergrund bieten, bei denen POCT zur athletennahen Sofortdiagnostik eingesetzt wird.","PeriodicalId":49926,"journal":{"name":"Laboratoriumsmedizin-Journal of Laboratory Medicine","volume":"15 1","pages":"229 - 237"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"2017-10-26","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"82552331","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2017-10-26DOI: 10.1515/labmed-2017-0098
Nadine Borst, Friedrich Schuler, S. Wadle, M. Schulz, M. Specht, Jia Li, Lisa Becherer, Martin Trotter, A. B. Rodríguez-Martínez, N. Paust, R. Zengerle, F. Stetten
Abstract The combination of digital amplification and centrifugal microfluidics can enable quantitative and fast diagnostics at the point of care (PoC). The new unit operation of centrifugal step emulsification allows high throughput droplet generation. Different methods for digital nucleic acid analysis, including PCR, recombinase polymerase amplification (RPA) and loop mediated isothermal amplification (LAMP), have already been demonstrated. Our novel approach of integrated sample-to-answer analysis is introduced, and examples for the detection of HIV and single cell analysis of antibiotic resistant bacteria are presented. Next to these LabDisk based systems, a microfluidic cartridge termed DropChip allows for digital amplification using only commercially available laboratory devices.
{"title":"A technology platform for digital nucleic acid diagnostics at the point of care","authors":"Nadine Borst, Friedrich Schuler, S. Wadle, M. Schulz, M. Specht, Jia Li, Lisa Becherer, Martin Trotter, A. B. Rodríguez-Martínez, N. Paust, R. Zengerle, F. Stetten","doi":"10.1515/labmed-2017-0098","DOIUrl":"https://doi.org/10.1515/labmed-2017-0098","url":null,"abstract":"Abstract The combination of digital amplification and centrifugal microfluidics can enable quantitative and fast diagnostics at the point of care (PoC). The new unit operation of centrifugal step emulsification allows high throughput droplet generation. Different methods for digital nucleic acid analysis, including PCR, recombinase polymerase amplification (RPA) and loop mediated isothermal amplification (LAMP), have already been demonstrated. Our novel approach of integrated sample-to-answer analysis is introduced, and examples for the detection of HIV and single cell analysis of antibiotic resistant bacteria are presented. Next to these LabDisk based systems, a microfluidic cartridge termed DropChip allows for digital amplification using only commercially available laboratory devices.","PeriodicalId":49926,"journal":{"name":"Laboratoriumsmedizin-Journal of Laboratory Medicine","volume":"50 1","pages":"245 - 249"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"2017-10-26","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"79787320","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2017-08-28DOI: 10.1515/LABMED-2017-0046
Christoph Frohn
Zusammenfassung Die Bestimmung der kardialen Troponine ist von erheblicher diagnostischer Bedeutung zur Abklärung vermuteter kardialer Ischämien. In einem Kliniklabor war aufgrund äußerer Umstände (Geräteausfall) aufgefallen, daß die als Backup eingesetzten lateral flow-Schnellteste (qualitative „Kartenteste“ ohne Geräteplattform) auch an hoch positiven Proben (weit über den angegebenen Nachweisgrenzen) in einigen Fällen kein positives Ergebnis erbrachten. Diese zunächst zufällige Beobachtung wurde an einer größeren Serie positiver Proben (n=23>0,5 ng/mL Troponin I; n=17>1,0 ng/mL) systematisch unter Verwendung verschiedener lateral-flow-Teste in Vergleich zu zwei verschiedenen Zentrallabor-Troponin-I-Testen überprüft. Im Ergebnis zeigte keiner dieser Schnellteste die positiven Proben zuverlässig an. Damit sind alle untersuchten qualitativen Troponin-Schnellteste als Basis klinischer Entscheidungen ungeeignet.
{"title":"Erhebliche Diskrepanzen zwischen qualitativen Troponin-Schnelltesten („Karten-Testen“) und klassischer Laboranalytik: ist der Einsatz solcher Schnellteste vertretbar?","authors":"Christoph Frohn","doi":"10.1515/LABMED-2017-0046","DOIUrl":"https://doi.org/10.1515/LABMED-2017-0046","url":null,"abstract":"Zusammenfassung Die Bestimmung der kardialen Troponine ist von erheblicher diagnostischer Bedeutung zur Abklärung vermuteter kardialer Ischämien. In einem Kliniklabor war aufgrund äußerer Umstände (Geräteausfall) aufgefallen, daß die als Backup eingesetzten lateral flow-Schnellteste (qualitative „Kartenteste“ ohne Geräteplattform) auch an hoch positiven Proben (weit über den angegebenen Nachweisgrenzen) in einigen Fällen kein positives Ergebnis erbrachten. Diese zunächst zufällige Beobachtung wurde an einer größeren Serie positiver Proben (n=23>0,5 ng/mL Troponin I; n=17>1,0 ng/mL) systematisch unter Verwendung verschiedener lateral-flow-Teste in Vergleich zu zwei verschiedenen Zentrallabor-Troponin-I-Testen überprüft. Im Ergebnis zeigte keiner dieser Schnellteste die positiven Proben zuverlässig an. Damit sind alle untersuchten qualitativen Troponin-Schnellteste als Basis klinischer Entscheidungen ungeeignet.","PeriodicalId":49926,"journal":{"name":"Laboratoriumsmedizin-Journal of Laboratory Medicine","volume":"1 1","pages":"183 - 186"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"2017-08-28","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"85955186","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2017-08-28DOI: 10.1515/labmed-2017-0063
H. Hoffmann, U. Darsow, Stephanie Hofmaier, J. Kleine-Tebbe, P. Matricardi, B. Wedi, B. Eberlein
Zusammenfassung Eine Allergiediagnostik beruht auf einer gründlichen Anamnese, Sensibilisierungstests und Provokationstests zur objektiven Bestätigung des verursachenden Allergenes unter kontrollierten Bedingungen. In dieser Übersicht werden die verfügbaren molekularen und zellulären Tests zur Allergensuche beschrieben. Seit der Identifikation, Klonierung und Expression des Hauptallergens der Birkenpollen, Bet v 1, haben sich die molekularen Einsatzmöglichkeiten in der Allergiediagnostik enorm gesteigert. In einer frei verfügbaren Monographie der European Academy of Allergy and Clinical Immunology (EAACI), dem „Molecular Allergy Users Guide 2016“, werden die Möglichkeiten einer modernen molekularen serologischen Diagnostik detailliert beschrieben. Auch die zelluläre Diagnostik hat sich in den letzten Jahren rasch weiterentwickelt mit der Möglichkeit molekulare Allergene einzusetzen und dem Ziel eine wiederholte Exposition des Patienten mit dem Allergen zu vermeiden. Exakte Messungen sind von externer Qualitätssicherung abhängig, die für die Serumdiagnostik bereits vorhanden ist und in der zellulären Diagnostik derzeit entwickelt wird. Mit der europäischen Standardisierung der diagnostischen Tests im Labor erweitert sich die Palette der Möglichkeiten zur persönlichen Allergiediagnostik.
{"title":"Molekulare und Zelluläre Möglichkeiten in der Allergiediagnostik","authors":"H. Hoffmann, U. Darsow, Stephanie Hofmaier, J. Kleine-Tebbe, P. Matricardi, B. Wedi, B. Eberlein","doi":"10.1515/labmed-2017-0063","DOIUrl":"https://doi.org/10.1515/labmed-2017-0063","url":null,"abstract":"Zusammenfassung Eine Allergiediagnostik beruht auf einer gründlichen Anamnese, Sensibilisierungstests und Provokationstests zur objektiven Bestätigung des verursachenden Allergenes unter kontrollierten Bedingungen. In dieser Übersicht werden die verfügbaren molekularen und zellulären Tests zur Allergensuche beschrieben. Seit der Identifikation, Klonierung und Expression des Hauptallergens der Birkenpollen, Bet v 1, haben sich die molekularen Einsatzmöglichkeiten in der Allergiediagnostik enorm gesteigert. In einer frei verfügbaren Monographie der European Academy of Allergy and Clinical Immunology (EAACI), dem „Molecular Allergy Users Guide 2016“, werden die Möglichkeiten einer modernen molekularen serologischen Diagnostik detailliert beschrieben. Auch die zelluläre Diagnostik hat sich in den letzten Jahren rasch weiterentwickelt mit der Möglichkeit molekulare Allergene einzusetzen und dem Ziel eine wiederholte Exposition des Patienten mit dem Allergen zu vermeiden. Exakte Messungen sind von externer Qualitätssicherung abhängig, die für die Serumdiagnostik bereits vorhanden ist und in der zellulären Diagnostik derzeit entwickelt wird. Mit der europäischen Standardisierung der diagnostischen Tests im Labor erweitert sich die Palette der Möglichkeiten zur persönlichen Allergiediagnostik.","PeriodicalId":49926,"journal":{"name":"Laboratoriumsmedizin-Journal of Laboratory Medicine","volume":"17 1","pages":"159 - 166"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"2017-08-28","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"84380558","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2017-08-28DOI: 10.1515/labmed-2017-0038
M. Herold, W. Klotz, U. Sack, K. Conrad
Zusammenfassung Primäres Ziel von ICAP (internationaler Konsens für antinukleäre Antikörpermuster) ist es, einen Konsens zu finden zur Beschreibung der Fluoreszenzmuster, die mit indirekter Immunfluoreszenztechnik auf HEp-2-Zellen erkannt werden können. 28 Muster (14 Kern-, 9 zytoplasmatische und 5 mitotische Muster) wurden bisher definiert. Neben der Musterbeschreibung wurden alle Muster auch mit AC-Nummern gekennzeichnet, um eine von der Sprache unabhängige Vergleichbarkeit zu gewährleisten. Alle ICAP-Ergebnisse können von der ICAP-Internetseite (www.anapatterns.org) abgerufen werden. ICAP ist ein fortlaufender Prozess. Das nächste und 4. ICAP-Treffen wird im September 2017 im Rahmen des 13. Autoantikörpersymposiums in Dresden stattfinden (www.gfid-ev.de). Anstehende ICAP-Aufgaben sind die Ergänzung der Fluoreszenzmuster, die Erweiterung der Bildersammlung und die genauere Beschreibung der klinischen Bedeutung einzelner Muster.
{"title":"ICAP – ein Versuch zur einheitlichen Beschreibung der Fluoreszenzmuster von antizellulären Antikörpern auf HEp-2-Zellen","authors":"M. Herold, W. Klotz, U. Sack, K. Conrad","doi":"10.1515/labmed-2017-0038","DOIUrl":"https://doi.org/10.1515/labmed-2017-0038","url":null,"abstract":"Zusammenfassung Primäres Ziel von ICAP (internationaler Konsens für antinukleäre Antikörpermuster) ist es, einen Konsens zu finden zur Beschreibung der Fluoreszenzmuster, die mit indirekter Immunfluoreszenztechnik auf HEp-2-Zellen erkannt werden können. 28 Muster (14 Kern-, 9 zytoplasmatische und 5 mitotische Muster) wurden bisher definiert. Neben der Musterbeschreibung wurden alle Muster auch mit AC-Nummern gekennzeichnet, um eine von der Sprache unabhängige Vergleichbarkeit zu gewährleisten. Alle ICAP-Ergebnisse können von der ICAP-Internetseite (www.anapatterns.org) abgerufen werden. ICAP ist ein fortlaufender Prozess. Das nächste und 4. ICAP-Treffen wird im September 2017 im Rahmen des 13. Autoantikörpersymposiums in Dresden stattfinden (www.gfid-ev.de). Anstehende ICAP-Aufgaben sind die Ergänzung der Fluoreszenzmuster, die Erweiterung der Bildersammlung und die genauere Beschreibung der klinischen Bedeutung einzelner Muster.","PeriodicalId":49926,"journal":{"name":"Laboratoriumsmedizin-Journal of Laboratory Medicine","volume":"41 1","pages":"167 - 172"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"2017-08-28","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"76795041","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2017-08-28DOI: 10.1515/labmed-2017-0016
A. B. Rodríguez-Martínez, E. Sarasola-Díez, Estíbaliz Achalandabaso, M. García-Barcina
Abstract Background: Circulating free DNA (cfDNA) digestion with methylation sensitive restriction enzymes constitutes an important diagnostic tool for differentiating methylated from non-methylated DNA sequences. In the context of pregnancy, this is used to differentiate fetal from maternal DNA. Current protocols are of long duration and use multiple enzymes with different incubation and inactivating temperatures. We describe a short protocol for the digestion of circulating free DNA focused on its future adaptation to miniaturized microfluidic devices based on lab-on-a-chip technology. Methods: cfDNA was extracted from plasma samples of pregnant and non-pregnant women with chemagic Viral NA/gDNA and QIAamp circulating nucleic acids kits. For digestion protocol optimization, different methylation sensitive and insensitive restriction enzymes were used. Detection of RASSF1A, SRY and (β-actin) ACTB sequences was performed by real time polymerase chain reaction (PCR). Results: The digestion protocol is optimized to a 3.5 h one-step protocol using the enzymes BstUI, BstY1 and HhaI resulting in a complete digestion of the hypomethylated maternal RASSF1A with a limit of digestion of 3.65E10 gene copies. Conclusions: This work provides a digestion protocol for cfDNA samples with a combination of temperatures (37 °C and 60 °C) and a protocol length (<4 h) which facilitates its adaptation to miniaturized microfluidic devices based on lab-on-a-chip technology. In this technology, the shorter the duration of the protocol, the greater the rate of success and the less sample evaporation.
{"title":"Optimized short digestion protocol for free fetal DNA detection using methylation-dependent markers","authors":"A. B. Rodríguez-Martínez, E. Sarasola-Díez, Estíbaliz Achalandabaso, M. García-Barcina","doi":"10.1515/labmed-2017-0016","DOIUrl":"https://doi.org/10.1515/labmed-2017-0016","url":null,"abstract":"Abstract Background: Circulating free DNA (cfDNA) digestion with methylation sensitive restriction enzymes constitutes an important diagnostic tool for differentiating methylated from non-methylated DNA sequences. In the context of pregnancy, this is used to differentiate fetal from maternal DNA. Current protocols are of long duration and use multiple enzymes with different incubation and inactivating temperatures. We describe a short protocol for the digestion of circulating free DNA focused on its future adaptation to miniaturized microfluidic devices based on lab-on-a-chip technology. Methods: cfDNA was extracted from plasma samples of pregnant and non-pregnant women with chemagic Viral NA/gDNA and QIAamp circulating nucleic acids kits. For digestion protocol optimization, different methylation sensitive and insensitive restriction enzymes were used. Detection of RASSF1A, SRY and (β-actin) ACTB sequences was performed by real time polymerase chain reaction (PCR). Results: The digestion protocol is optimized to a 3.5 h one-step protocol using the enzymes BstUI, BstY1 and HhaI resulting in a complete digestion of the hypomethylated maternal RASSF1A with a limit of digestion of 3.65E10 gene copies. Conclusions: This work provides a digestion protocol for cfDNA samples with a combination of temperatures (37 °C and 60 °C) and a protocol length (<4 h) which facilitates its adaptation to miniaturized microfluidic devices based on lab-on-a-chip technology. In this technology, the shorter the duration of the protocol, the greater the rate of success and the less sample evaporation.","PeriodicalId":49926,"journal":{"name":"Laboratoriumsmedizin-Journal of Laboratory Medicine","volume":"110 1","pages":"195 - 203"},"PeriodicalIF":0.0,"publicationDate":"2017-08-28","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"80548886","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":0,"RegionCategory":"","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
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