Revue des maladies respiratoires最新文献

La bronchopneumopathie chronique obstructive (BPCO) est une maladie chronique respiratoire, caractérisée par une limitation non réversible des débits d’air expiratoires. Chez les patients atteints de BPCO, le site majeur de l’obstruction se trouve au niveau des voies aériennes distales, qui sont remodelées, inflammatoires, et/ou oblitérées, et ceci de façon précoce dans la maladie. Les récentes avancées technologiques, notamment en imagerie et transcriptomique, ont fourni de nouvelles données sur ce site clé du poumon. L’objectif de cette revue est de donner une vision globale et récente des connaissances sur les voies distales et leurs atteintes dans la BPCO.

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is a chronic respiratory disease characterized by a non-reversible limitation of expiratory airflow. In patients with COPD, distal airways are the major site of obstruction; early in the course of the disease, they show signs of being remodeled, inflamed, and/or obliterated. Recent technological advances, particularly in imaging and transcriptomics, have provided new information on this key area of the lung. The objective of this review is to provide an updated overall vision of knowledge on distal airways and how they are damaged in COPD.

Aspergillus fumigatus est l’espèce fongique prédominante à l’origine des aspergilloses pulmonaires. L’arsenal anti-aspergillaire est limité avec des molécules présentant des effets secondaires sévères (amphotéricine B) ou des interactions médicamenteuses importantes (dérivés azolés). Par ailleurs, l’émergence récente de souches d’A. fumigatus résistantes aux azolés est préoccupante. Dans ce contexte, les peptides antimicrobiens (PAM) apparaissent comme une approche thérapeutique prometteuse, en alternative ou en complément thérapeutique aux antifongiques conventionnels.

Aspergillus fumigatus is the predominant fungal species causing pulmonary aspergillosis. The present-day anti-aspergillosis arsenal is limited, with a number of molecules occasioning severe side effects (amphotericin B) or provoking significant drug interactions (azole derivatives). Moreover, the recent emergence of azole-resistant A. fumigatus strains is a cause for concern. In this context, antimicrobial peptides (AMPs) are emerging as a promising therapeutic approach and alternative or complement to conventional antifungals.

Le cancer du poumon est la première cause de décès par cancer dans le monde. Cela est en partie lié à la résistance thérapeutique qui survient chez environ 70 % des patients, notamment ceux traités par les sels de platine, la chimiothérapie de référence. La dérégulation massive des processus d’épissage alternatif des transcrits observée dans de nombreux cancers a conduit au développement d’une nouvelle classe d’agents pharmacologiques visant à inhiber l’activité de la machinerie d’épissage (splicéosome). Les mécanismes moléculaires par lesquels ces inhibiteurs agissent demeurent largement méconnus, de même que l’intérêt de les utiliser en combinaison avec d’autres thérapies. C’est dans ce contexte que s’inscrivent nos travaux qui s’intéressent à un inhibiteur de la kinase SRPK1, un régulateur majeur du splicéosome.

Lung cancer is the first cancer-related cause of death worldwide. This is in partially due to therapeutic resistance, which occurs in around 70% of patients, especially those receiving platinum salts, the gold-standard chemotherapy. The massive deregulation of alternative transcript splicing processes observed in many cancers has led to the development of a new class of pharmacological agents aimed at inhibiting the activity of the splicing machinery (spliceosome). The molecular mechanisms by which these inhibitors act remain largely unknown, as do the benefits of using them in combination with other therapies. In this context, our work is focused on an inhibitor of the SRPK1 kinase, a major regulator of the spliceosome.

L’asthme est une maladie chronique inflammatoire des voies aériennes hétérogène. Parmi les patients atteints d’asthme sévère, un tiers présente une obstruction fonctionnelle persistante en lien avec une obstruction des voies aériennes par des bouchons de mucus contenant des mucines, de la fibrine et des cristaux de Charcot-Leyden dérivés d’éosinophiles. Les mécanismes moléculaires qui sous-tendent cet endotype ne sont pas clairement compris. Le développement de nouveaux outils afin de modéliser l’asthme chez l’Homme sont nécessaires, du fait notamment des différences considérables qu’il existe entre l’épithélium des voies aériennes de l’Homme et celui des rongeurs. Nous avons montré, avec d’autres équipes, qu’il est possible de reconstituer in vitro un épithélium bronchique fonctionnel et mature à partir de cellules souches humaines pluripotentes humaines (hiPSC). Notre objectif est de mettre au point un modèle in vitro humain d’asthme sévère à partir des hiPSC afin de modéliser les modifications de l’épithélium bronchique ainsi que les bouchons de mucus.

Severe asthma patients with persistent airflow obstruction are characterized by functional obstruction due to mucus plugs containing mucins, fibrin, and eosinophil derived Charcot- Leyden crystals. The molecular mechanisms underlying this endotype are not clearly understood. Developing new models is crucial to respiratory research insofar as critical differences exist between human and rodent airway epithelium. We (and other teams) have shown that it is possible to reconstitute in vitro a complex and functional airway epithelium displaying all the features described in vivo from human-induced pluripotent stem cells (hiPSC). Our aim is to establish a human in vitro model of severe asthma that will recapitulate airway epithelium remodeling and mucus plugs.

Les lipofibroblastes constituent une sous-population de fibroblastes présents dans la niche mésenchymateuse alvéolaire. Du fait de leur proximité étroite avec les pneumocytes de type 2 ils jouent un rôle clé dans le développement alvéolaire et le maintien de l’homéostasie alvéolaire. Leur rôle, dans différentes pathologiques telles que le syndrome de détresse respiratoire aiguë, la fibrose pulmonaire et l’emphysème, est progressivement mieux compris. Via l’activation des voies de signalisations telles que PPARg, les lipofibroblastes semblent pouvoir participer à l’induction d’une régénération alvéolaire endogène.

Lipofibroblasts form a sub-population of fibroblasts located in the mesenchymal alveolar stem cell niche. They show close proximity with alveolar epithelial type 2 cells and play a key role in alveolar development and lung homeostasis. Their role in various diseases such as acute respiratory distress syndrome, pulmonary fibrosis and emphysema is progressively better understood. Through the activation of signaling pathways such as PPARg lipofibroblasts may help to induce endogenous alveolar regeneration.

Le syndrome de Down (SD), ou trisomie 21, est une maladie génétique due à la présence d’une copie supplémentaire du chromosome 21, entraînant diverses caractéristiques physiques ainsi que des retards de développement et des déficits cognitifs. Le syndrome d’apnées obstructives du sommeil (SAOS) est un trouble fréquent chez les patients adultes et enfants atteints du SD. Plusieurs caractéristiques retrouvées dans le SD peuvent contribuer au développement du SAOS ou l’aggraver. De nombreux modèles murins de SD existent. Quelques études ont exploré les apnées et le risque d’obstruction des voies aériennes supérieures dans ces modèles mais exclusivement à l’âge adulte.

Down syndrome (DS), or trisomy 21, is a genetic disorder caused by the presence of an extra copy of chromosome 21, leading to various characteristic physical features as well as developmental and cognitive delays. Obstructive sleep apnea syndrome (OSAS) is a common disorder in both adult and pediatric patients with DS. Several characteristics of DS may contribute to the development or worsening of OSAS. Numerous murine models of DS exist. A number of studies have explored apneas and the risk of upper airway obstruction in these models, but up until now, only in adulthood.

En France, l’hémoptysie sévère sur cancer est devenue la première cause d’hémoptysie alors qu'elle est exceptionnelle en cas d’hémopathie. En l’absence d’un traitement adéquate, la mortalité hospitalière dépasse 60 % et atteint 100 % à 6 mois. La prise en charge, discutée avec l’oncologue, comprend l’angioscanner volumique incontournable, en dehors de la situation d’hémoptysie menaçante où la fibroscopie bronchique peut être réalisée de première intention. L’angioscanner volumique permet de localiser le saignement, d’en déterminer la cause et le mécanisme vasculaire. Dans plus de 90 % des cas, l’hémoptysie est liée à l’hypervascularisation systémique bronchique ou non bronchique, dans moins de 5 % des cas elle est en rapport avec une atteinte de la circulation pulmonaire et exceptionnellement avec une lésion de la barrière alvéolocapillaire. Les patients les plus graves doivent être pris en charge en réanimation dans des centres disposant d’une radiologie interventionnelle, d’une chirurgie thoracique et idéalement d’une bronchoscopie interventionnelle. La radiologie interventionnelle est le traitement symptomatique de première intention. L’artériographie bronchique avec embolisation permet un contrôle immédiat dans plus de 80 % des cas. La chirurgie en urgence doit être évitée, car elle est associée à une mortalité significative. Cette prise en charge adéquate réduit la mortalité hospitalière à 30 % et permet aux patients de bénéficier des traitements les plus récents qui améliorent leur survie.

In France, even though it occurs only exceptionally in cases of hemopathy, severe hemoptysis in cancer is the leading cause of hemoptysis. Without adequate treatment, in-hospital mortality exceeds 60%, even reaching 100% at 6 months. The management of severe hemoptysis should be discussed with the oncologist. Aside from situations of threatening hemoptysis, in which bronchoscopy should be performed immediately, CT angiography is an essential means of localizing the bleeding and determining the causes and the vascular mechanisms involved. In more than 90% of cases, hemoptysis is linked to systemic bronchial or non-bronchial hypervascularization, whereas in fewer than 5%, it is associated with pulmonary arterial origin or, exceptionally, with damage to the alveolar-capillary barrier. The most severely ill patients must be treated in intensive care in centers equipped with interventional radiology, thoracic surgery and, ideally, with interventional bronchoscopy. Interventional radiology is the first-line symptomatic treatment. In over 80% of cases, bronchial arteriography with embolization allows immediate control. Emergency surgery should be avoided, as it is associated with significant mortality. Appropriate and adequate care reduces hospital mortality to 30%, enabling patients to benefit from the most recent, survival-prolonging treatments.

Introduction

Les pneumopathies interstitielles diffuses (PID) sont des pathologies rares d’étiologies variées menant pour la plupart à la fibrose pulmonaire. Sur une cohorte de 220 atteints de PID fibrosantes suivis à l’hôpital Foch, 58 présentaient un taux de polynucléaires à éosinophiles (PNE) sanguin > 300/mm³ considéré comme élevé [1]. Bien que le rôle des PNE dans le développement et/ou l’exacerbation des PID ait été fortement suggéré [2], il n’a jamais été démontré. Nous émettons l’hypothèse que les PNE jouent un rôle dans la physiopathologie des PID. Afin de la vérifier, le projet INTREPID propose de caractériser les médiateurs de l’immunité de type 2 (cellulaires et solubles) chez 60 patients atteints de PID, en fonction de leur taux de PNE sanguin et de contrôler le caractère pro-fibrosant de leurs PNE in vitro. Les résultats présentés sont issus de la mise au point du modèle in vitro réalisés sur des volontaires sains.

Méthodes

Les PNE ont été isolés du sang de donneurs sains puis mis en culture, après vérification de leur pureté par cytométrie de flux CytoFlex SRT. Leur viabilité a été vérifiée par dosage de la lactate déshydrogénase (LDH) après 48 h de culture. Les PNE ont été mis en coculture avec des lignées épithéliales bronchiques et alvéolaires (respectivement les cellules BEAS-2B et A549) en interface liquide-liquide et air-liquide. Les cytokines (IL-6, CXCL8, CCL5 et CCL2) ont été dosées par ELISA et une mesure de la résistance transépithéliale (TEER) a été effectuée. Les expectorations induites de sujets sains ont été analysées par cytométrie de flux et par coloration MGG afin d’étudier les différentes sous-populations cellulaires.

Résultats

Les cultures de PNE présentent des caractéristiques satisfaisantes en terme de pureté (> 90 %), absence d’activation des PNE (CD₆₃-), ainsi qu’une viabilité jusqu’à 48 h de culture (pas d’augmentation significative de la LDH). Lors des co-cultures en interface liquide-liquide, il a été observé une augmentation de la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires (IL-6, CXCL8 et CCL2) par l’épithélium respiratoire BEAS-2B et A549 en présence de PNE. Une diminution de la TEER a également été observée en présence de PNE sur les cellules BEAS-2B. L’analyse par cytométrie des expectorations a permis d’identifier les différents types cellulaires tels que les macrophages, les monocytes, les éosinophiles, les neutrophiles, les lymphocytes T et les lymphocytes B.

Conclusion

Cette étude de faisabilité décrit la mise au point de la culture des PNE et de la co-culture avec les lignées de cellules épithéliales respiratoires. Les modèles de coculture nous ont permis d’identifier un effet pro-inflammatoire des PNE au contact des lignées épithéliales bronchiques et alvéolaires. Par la suite ces expérimentations seront