Pub Date : 2025-04-01DOI: 10.1016/j.rmr.2025.02.062
C. Chottin , S. Holowacz , C. Ferret , S. Riffault , E. Jacouton , D. Descamps
Introduction
The Respiratory Syncytial Virus (RSV) causes severe bronchiolitis in children with 30% of them affected each year. Infection in neonates is characterised by a Th2 immune response and a low Th1 increasing the risk to develop asthma later. Oral probiotics supplementation reduced RSV infection by modulating the lung immune response [1]. However, no study describes nor the effect of postbiotics or inanimate bacteria in very early life.
Methods
Five-days-old BALBC mice were randomly divided into two groups, one receiving tyndallized Bifidobacterium breve LA708 (equivalent to 5 × 108 CFU before tyndallization) or the other PBS as negative control every day during 2 weeks. Luciferase recombinant RSV (205 × 103 pfu per animal) was intranasally inoculated at day 21 to half the mice in both groups. Infection was recorded in vivo by bioluminescence in lung and snout at 1.4 and 10 days post infection (dpi). Animals were necropsied and tissues and bronchoalveolar fluid (BALF) were collected for analysis of viral replication (bioluminescence activity) and lung inflammation (luminex assay and cytometry).
Results
All infected animals showed a mean radiance of around 1 × 104 in lungs and 1 × 105 in snouts at 1 and 4 dpi confirming the infection. B. breve LA708 showed no effect on infection at 1dpi in either the snouts or lungs. However, animals supplemented with B. breve LA708 exhibited lower infection in snouts at 4 dpi compared with animals supplemented with PBS. Similarly, although all mice were free of infection at 10 dpi in the LA708 group, a few mice still exhibited lung infection in the PBS one. An analysis of the immune response was then performed to decipher the effect of the strain. At 1 dpi, infected animals supplemented with B. breve LA708 showed a higher but non-significant number of polynuclear neutrophils and lymphocytes in BALF compared with infected control mice (P = 0.13) without affecting the total number of cells. Similarly, it seemed that IFN-b, TNF-a and IL-6 were increased in the lungs of animals supplemented with B. breve LA708 compared with infected control mice at 4 dpi. At 4 and 10 dpi, lungs of infected neonates supplemented with B. breve LA708 expressed an increased level of CD45 + leucocytes compared to those supplemented with PBS with an enhance on the proportion of CD8 + lymphocytes, NK cells and type 1 innate lymphoid cells (ILC1) among lymphocytes.
Conclusion
These data indicated that early supplementations with the postbiotic B. breve LA708 reduced infection in neonates, probably through a faster recruitment of innate immune cells and an activation of Th1 response in the lungs.
{"title":"A postbiotic supplementation in early life impacted Respiratory Syncytial Virus infection in mice","authors":"C. Chottin , S. Holowacz , C. Ferret , S. Riffault , E. Jacouton , D. Descamps","doi":"10.1016/j.rmr.2025.02.062","DOIUrl":"10.1016/j.rmr.2025.02.062","url":null,"abstract":"<div><h3>Introduction</h3><div>The Respiratory Syncytial Virus (RSV) causes severe bronchiolitis in children with 30% of them affected each year. Infection in neonates is characterised by a Th2 immune response and a low Th1 increasing the risk to develop asthma later. Oral probiotics supplementation reduced RSV infection by modulating the lung immune response <span><span>[1]</span></span>. However, no study describes nor the effect of postbiotics or inanimate bacteria in very early life.</div></div><div><h3>Methods</h3><div>Five-days-old BALBC mice were randomly divided into two groups, one receiving tyndallized Bifidobacterium breve LA708 (equivalent to 5<!--> <!-->×<!--> <!-->108<!--> <!-->CFU before tyndallization) or the other PBS as negative control every day during 2 weeks. Luciferase recombinant RSV (205<!--> <!-->×<!--> <!-->103<!--> <!-->pfu per animal) was intranasally inoculated at day 21 to half the mice in both groups. Infection was recorded in vivo by bioluminescence in lung and snout at 1.4 and 10 days post infection (dpi). Animals were necropsied and tissues and bronchoalveolar fluid (BALF) were collected for analysis of viral replication (bioluminescence activity) and lung inflammation (luminex assay and cytometry).</div></div><div><h3>Results</h3><div>All infected animals showed a mean radiance of around 1<!--> <!-->×<!--> <!-->104 in lungs and 1<!--> <!-->×<!--> <!-->105 in snouts at 1 and 4 dpi confirming the infection. B. breve LA708 showed no effect on infection at 1dpi in either the snouts or lungs. However, animals supplemented with B. breve LA708 exhibited lower infection in snouts at 4 dpi compared with animals supplemented with PBS. Similarly, although all mice were free of infection at 10 dpi in the LA708 group, a few mice still exhibited lung infection in the PBS one. An analysis of the immune response was then performed to decipher the effect of the strain. At 1 dpi, infected animals supplemented with B. breve LA708 showed a higher but non-significant number of polynuclear neutrophils and lymphocytes in BALF compared with infected control mice (<em>P</em> <!-->=<!--> <!-->0.13) without affecting the total number of cells. Similarly, it seemed that IFN-b, TNF-a and IL-6 were increased in the lungs of animals supplemented with B. breve LA708 compared with infected control mice at 4<!--> <!-->dpi. At 4 and 10<!--> <!-->dpi, lungs of infected neonates supplemented with B. breve LA708 expressed an increased level of CD<sub>45</sub> <!-->+<!--> <!-->leucocytes compared to those supplemented with PBS with an enhance on the proportion of CD<sub>8</sub> <!-->+<!--> <!-->lymphocytes, NK cells and type 1 innate lymphoid cells (ILC1) among lymphocytes.</div></div><div><h3>Conclusion</h3><div>These data indicated that early supplementations with the postbiotic B. breve LA708 reduced infection in neonates, probably through a faster recruitment of innate immune cells and an activation of Th1 response in the lungs.</div></div>","PeriodicalId":21548,"journal":{"name":"Revue des maladies respiratoires","volume":"42 4","pages":"Pages 212-213"},"PeriodicalIF":0.5,"publicationDate":"2025-04-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"143791604","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":4,"RegionCategory":"医学","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2025-04-01DOI: 10.1016/j.rmr.2025.02.019
C. Bouchet , G. Cardouat , P. Fernandes , P. Robillard , M. Thumerel , H. Begueret , F. Delcambre , P. Berger , K. Boniface , C. Guibert , V. Freund-Michel
Introduction
Pulmonary Hypertension (PH) is a severe disease leading to right heart failure and death. We have previously demonstrated a pathological role of the nerve growth factor NGF in PH, particularly in pulmonary arterial inflammation. We have here studied the link between NGF, monocytes/macrophages and interleukin-1β (IL-1β), a pro-inflammatory cytokine secreted in response to NGF and overexpressed in PH.
Methods
In vivo, PH was induced in rats by monocrotaline (60 mg/kg, intraperitoneal (ip) injection) in the absence or presence of a preventive treatment with anti-NGF blocking antibodies (10 μg/kg, ip injection). IL-1β pulmonary levels were then determined (ELISA). Expression of inflammasome components (NLRP3/pro-caspase-1/ASC/caspase-1/pro-IL-1β), of NGF and of monocytes/macrophages markers (CD11b/CD68) was evaluated by Western blotting (WB) in lung homogenates. Expression of CD68was also evaluated by immunohistochemistry in pulmonary arteries.
In vitro, both on the monocytic cell line THP-1 and on freshly isolated human monocytes, cell migration (Transwell assay) and/or proliferation (counting) were studied in response to NGF. Control human pulmonary arterial smooth muscle (hPASMC) or endothelial cells (hPAEC) were treated with IL-1β, and cell proliferation (counting), migration (Transwell assay), and interleukin-6 (IL-6) secretion (ELISA) were then assessed. In hPAEC, expression of endothelial nitric oxide synthase (eNOS), intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), CD31, VE-cadherin, Snail and Twist 1 was also assessed (WB).
Results
In vivo, IL-1β pulmonary levels were increased in PH rats, as observed in PH patients. Expression of inflammasome components such as procaspase-1, ASC, caspase-1 and pro-IL-1β was significantly increased in lung homogenates from PH rats compared to controls. CD68expression was also significantly increased in both the lung and pulmonary arteries (PA) from PH rats compared to controls. Treatment with anti-NGF antibodies prevented PH development and reduced expression of inflammasome proteins and of CD68in both the lung and PA. In vitro, NGF induced migration and/or proliferation of both THP-1 cells and freshly isolated human monocytes. In hPASMC and hPAEC, IL-1β significantly increased cell proliferation, migration and IL-6 secretion in a NF-kB and/or AP-1-dependent manner, with IL-6 secretion induced by IL-1β playing a role in IL-1β-dependent cell proliferation and migration. In hPAEC, IL-1β also significantly increased ICAM-1 and Snail expression and significantly decreased eNOS, CD31and VE-cadherin expression, mechanisms known to contribute to endothelial dysfunction and loss of endothelial phenotype in PH.
Conclusion
Our results suggest that NGF can trigger monocytes/macrophages migration into th
{"title":"IL-1β contribute to NGF-induced alterations in pulmonary hypertension","authors":"C. Bouchet , G. Cardouat , P. Fernandes , P. Robillard , M. Thumerel , H. Begueret , F. Delcambre , P. Berger , K. Boniface , C. Guibert , V. Freund-Michel","doi":"10.1016/j.rmr.2025.02.019","DOIUrl":"10.1016/j.rmr.2025.02.019","url":null,"abstract":"<div><h3>Introduction</h3><div>Pulmonary Hypertension (PH) is a severe disease leading to right heart failure and death. We have previously demonstrated a pathological role of the nerve growth factor NGF in PH, particularly in pulmonary arterial inflammation. We have here studied the link between NGF, monocytes/macrophages and interleukin-1β (IL-1β), a pro-inflammatory cytokine secreted in response to NGF and overexpressed in PH.</div></div><div><h3>Methods</h3><div>In vivo, PH was induced in rats by monocrotaline (60<!--> <!-->mg/kg, intraperitoneal (ip) injection) in the absence or presence of a preventive treatment with anti-NGF blocking antibodies (10<!--> <!-->μg/kg, ip injection). IL-1β pulmonary levels were then determined (ELISA). Expression of inflammasome components (NLRP3/pro-caspase-1/ASC/caspase-1/pro-IL-1β), of NGF and of monocytes/macrophages markers (CD<sub>11</sub>b/CD<sub>68</sub>) was evaluated by Western blotting (WB) in lung homogenates. Expression of CD<sub>68</sub>was also evaluated by immunohistochemistry in pulmonary arteries.</div><div>In vitro, both on the monocytic cell line THP-1 and on freshly isolated human monocytes, cell migration (Transwell assay) and/or proliferation (counting) were studied in response to NGF. Control human pulmonary arterial smooth muscle (hPASMC) or endothelial cells (hPAEC) were treated with IL-1β, and cell proliferation (counting), migration (Transwell assay), and interleukin-6 (IL-6) secretion (ELISA) were then assessed. In hPAEC, expression of endothelial nitric oxide synthase (eNOS), intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), CD<sub>31</sub>, VE-cadherin, Snail and Twist 1 was also assessed (WB).</div></div><div><h3>Results</h3><div>In vivo, IL-1β pulmonary levels were increased in PH rats, as observed in PH patients. Expression of inflammasome components such as procaspase-1, ASC, caspase-1 and pro-IL-1β was significantly increased in lung homogenates from PH rats compared to controls. CD<sub>68</sub>expression was also significantly increased in both the lung and pulmonary arteries (PA) from PH rats compared to controls. Treatment with anti-NGF antibodies prevented PH development and reduced expression of inflammasome proteins and of CD<sub>68</sub>in both the lung and PA. In vitro, NGF induced migration and/or proliferation of both THP-1 cells and freshly isolated human monocytes. In hPASMC and hPAEC, IL-1β significantly increased cell proliferation, migration and IL-6 secretion in a NF-kB and/or AP-1-dependent manner, with IL-6 secretion induced by IL-1β playing a role in IL-1β-dependent cell proliferation and migration. In hPAEC, IL-1β also significantly increased ICAM-1 and Snail expression and significantly decreased eNOS, CD<sub>31</sub>and VE-cadherin expression, mechanisms known to contribute to endothelial dysfunction and loss of endothelial phenotype in PH.</div></div><div><h3>Conclusion</h3><div>Our results suggest that NGF can trigger monocytes/macrophages migration into th","PeriodicalId":21548,"journal":{"name":"Revue des maladies respiratoires","volume":"42 4","pages":"Page 191"},"PeriodicalIF":0.5,"publicationDate":"2025-04-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"143791602","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":4,"RegionCategory":"医学","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2025-04-01DOI: 10.1016/j.rmr.2025.02.063
L. Morichon , N. Gros , J. Swain , F. Foisset , C. Bourdais , A. Coeur , C. Urena , S. Assou , A. Bourdin , D. Muriaux , J. De Vos
Introduction
iALI is a model of multiciliated airway epithelium derived from human induced pluripotent stem cells and generated in an air-liquid interface culture. This in vitro lung model was developed to study airway pathologies and infectious diseases such as SARS-CoV-2.
Methods
iALI were produced with iPSCs dedifferentiated from either healthy or patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD). SARS-CoV-2 infection of both iALI was validated by RTqPCR, infection plaque assays and immunofluorescence coupled to 3D super-resolution confocal microscopy. In addition, the innate immune response of infected and uninfected iALI was measured by RTqPCR and immunoassays.
Results
We produced complete, functional bronchial epithelium; moreover, COPD iALI show hallmarks of the pathology: goblet cell metaplasia, basal cell hyperplasia and tissue inflammation. While both samples infect and replicate the virus for several weeks, with a peak 2 days after infection, viral production is limited in iALI COPD. Our results show expressions of interferon-stimulated genes (ISGs) and pro-inflammatory cytokines after infection with SARS-CoV-2 [1] and at a higher level in iALI with COPD.
Conclusion
In conclusion, our results show that iALI can be used to study respiratory virus infection and its consequences on lung tissue, including from patients with COPD pathology.
{"title":"Healthy and COPD iPSC derived lung organoids responds differently to SARS-CoV-2 infection","authors":"L. Morichon , N. Gros , J. Swain , F. Foisset , C. Bourdais , A. Coeur , C. Urena , S. Assou , A. Bourdin , D. Muriaux , J. De Vos","doi":"10.1016/j.rmr.2025.02.063","DOIUrl":"10.1016/j.rmr.2025.02.063","url":null,"abstract":"<div><h3>Introduction</h3><div>iALI is a model of multiciliated airway epithelium derived from human induced pluripotent stem cells and generated in an air-liquid interface culture. This in vitro lung model was developed to study airway pathologies and infectious diseases such as SARS-CoV-2.</div></div><div><h3>Methods</h3><div>iALI were produced with iPSCs dedifferentiated from either healthy or patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD). SARS-CoV-2 infection of both iALI was validated by RTqPCR, infection plaque assays and immunofluorescence coupled to 3D super-resolution confocal microscopy. In addition, the innate immune response of infected and uninfected iALI was measured by RTqPCR and immunoassays.</div></div><div><h3>Results</h3><div>We produced complete, functional bronchial epithelium; moreover, COPD iALI show hallmarks of the pathology: goblet cell metaplasia, basal cell hyperplasia and tissue inflammation. While both samples infect and replicate the virus for several weeks, with a peak 2 days after infection, viral production is limited in iALI COPD. Our results show expressions of interferon-stimulated genes (ISGs) and pro-inflammatory cytokines after infection with SARS-CoV-2 <span><span>[1]</span></span> and at a higher level in iALI with COPD.</div></div><div><h3>Conclusion</h3><div>In conclusion, our results show that iALI can be used to study respiratory virus infection and its consequences on lung tissue, including from patients with COPD pathology.</div></div>","PeriodicalId":21548,"journal":{"name":"Revue des maladies respiratoires","volume":"42 4","pages":"Page 213"},"PeriodicalIF":0.5,"publicationDate":"2025-04-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"143791605","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":4,"RegionCategory":"医学","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2025-04-01DOI: 10.1016/j.rmr.2025.02.068
S. Brax , C. Gaudin , M. Ruffin , C. Calmel , H. Corvol , L. Guillot
Introduction
L’atteinte respiratoire est la principale cause de mortalité chez les personnes atteintes de mucoviscidose. Tout au long de l’évolution de cette maladie, les infections pulmonaires répétées et l’inflammation chronique qui en résulte endommagent progressivement le tissu bronchique, entraînant un déclin de la fonction pulmonaire. Pseudomonas aeruginosa (P.aeruginosa), une bactérie à Gram négatif retrouvée chez près de 50 % des patients adultes, est particulièrement préoccupante en raison de sa résistance élevée aux antibiotiques, rendant nécessaire le développement de nouveaux traitements (Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator) et une meilleure compréhension des mécanismes d’infection cellulaire. Dans notre étude, nous nous sommes focalisés sur le cytosquelette de septines (SEPT), connu pour jouer un rôle clé dans les processus d’interaction hôte-pathogène ainsi que dans le maintien de la fonction de barrière cellulaire. Cependant, le rôle anti-infectieux des SEPT dans le contexte de la mucoviscidose reste à ce jour insuffisamment élucidé.
Méthodes
Nous avons utilisé des cellules épithéliales bronchiques primaires de patients atteints de mucoviscidose (CF) et de doneur sains (non CF), deux lignées cellulaires épithéliales bronchiques, 16HBE (type sauvage et F508del/F508del) et BEAS-2B. La souche PAK-GFP (Green Fluorescent Protein) de P.aeruginosa a été utilisée. Des ARN interférents (siARN) ciblant les SEPT2, 7 ou 9 ont été utilisés pour inhiber leur expression. L’expression des SEPT a été étudiée par qPCR et western blot. Des expériences d’internalisation bactérienne ont été réalisées avec de la tobramycine. L’elexacaftor (3 μM)/tezacaftor (3 μM)/ivacaftor (1 μM) (ETI) a été utilisé pour restaurer l’expression et la fonction du régulateur de la conductance transmembranaire de la mucoviscidose (CFTR).
Résultats
L’étude des niveaux d’expression en ARNm des SEPT dans les cellules bronchiques montre des profils comparables entre des cellules CF et non-CF. De plus, nous avons observé que les SEPT2, 7 et 9 étaient celles qui avaient les plus importants niveaux d’expression. L’inhibition de l’expression des SEPT2, 7 et 9 par siARN a induit une augmentation du nombre de bactéries intracellulaire dans les cellules non-CF mais pas dans les CF (lignées cellulaires et cellules primaires). Suggérant que ces trois protéines limitent l’invasion bactérienne intracellulaire en condition physiologique mais pas dans le contexte CF. Par la suite nous avons observé que cette action limitante ne survenait pas dans les phases précoces de l’infection. Enfin, la restauration de la protéine CFTR via pré-traitement à l’ETI ne rétabli pas l’action des SEPT en contexte CF suggérant ainsi que l’altération de ce mécanisme n’est pas liée à la fonction de CFTR.
{"title":"Altération de l’implication des septines dans l’infection des cellules épithéliales bronchiques par P. aeruginosa en contexte de mucoviscidose","authors":"S. Brax , C. Gaudin , M. Ruffin , C. Calmel , H. Corvol , L. Guillot","doi":"10.1016/j.rmr.2025.02.068","DOIUrl":"10.1016/j.rmr.2025.02.068","url":null,"abstract":"<div><h3>Introduction</h3><div>L’atteinte respiratoire est la principale cause de mortalité chez les personnes atteintes de mucoviscidose. Tout au long de l’évolution de cette maladie, les infections pulmonaires répétées et l’inflammation chronique qui en résulte endommagent progressivement le tissu bronchique, entraînant un déclin de la fonction pulmonaire. Pseudomonas aeruginosa (<em>P.</em> <em>aeruginosa</em>), une bactérie à Gram négatif retrouvée chez près de 50 % des patients adultes, est particulièrement préoccupante en raison de sa résistance élevée aux antibiotiques, rendant nécessaire le développement de nouveaux traitements (Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator) et une meilleure compréhension des mécanismes d’infection cellulaire. Dans notre étude, nous nous sommes focalisés sur le cytosquelette de septines (SEPT), connu pour jouer un rôle clé dans les processus d’interaction hôte-pathogène ainsi que dans le maintien de la fonction de barrière cellulaire. Cependant, le rôle anti-infectieux des SEPT dans le contexte de la mucoviscidose reste à ce jour insuffisamment élucidé.</div></div><div><h3>Méthodes</h3><div>Nous avons utilisé des cellules épithéliales bronchiques primaires de patients atteints de mucoviscidose (CF) et de doneur sains (non CF), deux lignées cellulaires épithéliales bronchiques, 16HBE (type sauvage et F508del/F508del) et BEAS-2B. La souche PAK-GFP (Green Fluorescent Protein) de <em>P.</em> <em>aeruginosa</em> a été utilisée. Des ARN interférents (siARN) ciblant les SEPT2, 7 ou 9 ont été utilisés pour inhiber leur expression. L’expression des SEPT a été étudiée par qPCR et western blot. Des expériences d’internalisation bactérienne ont été réalisées avec de la tobramycine. L’elexacaftor (3<!--> <!-->μM)/tezacaftor (3<!--> <!-->μM)/ivacaftor (1<!--> <!-->μM) (ETI) a été utilisé pour restaurer l’expression et la fonction du régulateur de la conductance transmembranaire de la mucoviscidose (CFTR).</div></div><div><h3>Résultats</h3><div>L’étude des niveaux d’expression en ARNm des SEPT dans les cellules bronchiques montre des profils comparables entre des cellules CF et non-CF. De plus, nous avons observé que les SEPT2, 7 et 9 étaient celles qui avaient les plus importants niveaux d’expression. L’inhibition de l’expression des SEPT2, 7 et 9 par siARN a induit une augmentation du nombre de bactéries intracellulaire dans les cellules non-CF mais pas dans les CF (lignées cellulaires et cellules primaires). Suggérant que ces trois protéines limitent l’invasion bactérienne intracellulaire en condition physiologique mais pas dans le contexte CF. Par la suite nous avons observé que cette action limitante ne survenait pas dans les phases précoces de l’infection. Enfin, la restauration de la protéine CFTR via pré-traitement à l’ETI ne rétabli pas l’action des SEPT en contexte CF suggérant ainsi que l’altération de ce mécanisme n’est pas liée à la fonction de CFTR.</div></div><div><h3>Conclusion</h3><div>Les résulta","PeriodicalId":21548,"journal":{"name":"Revue des maladies respiratoires","volume":"42 4","pages":"Pages 215-216"},"PeriodicalIF":0.5,"publicationDate":"2025-04-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"143791614","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":4,"RegionCategory":"医学","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2025-04-01DOI: 10.1016/j.rmr.2025.02.073
M. Gautier-Isola , M. Truchi , G. Savary , H. Cadis , A. Lingampally , C. Scribe , V. Magnone , M.-J. Arguel , C. de Schutter , J. Fassy , R. Rezzonico , V. Hofman , C.-H. Marquette , P. Hofman , A. Gunther , N. Ricard , P. Barbry , S. Leroy , K. Lebrigand , S. Bellusci , B. Mari
Introduction
La fibrose pulmonaire idiopathique (FPI) est une maladie incurable qui se traduit par la formation de foci fibrotique, une accumulation et une rigidification de la matrice extracellulaire ainsi qu’une reprogrammation des cellules épithéliales et endothéliales (EC) pulmonaires. Bien que l’étiologie de la fibrose pulmonaire soit inconnue, nous savons que son incidence augmente avec l’âge. Afin d’étudier les processus de régénération, un modèle réversible in vivo par instillation de bléomycine permet de reproduire les différents aspects de la pathologie et de suivre les processus de régénération cellulaire. Les souris âgées présentent une résolution retardée de la fibrose pulmonaire par rapport aux souris jeunes. Dans ce contexte, nous cherchons à déterminer la signature transcriptomique des différentes composantes cellulaires d’une fibrose réversible induite par la bléomycine chez des souris jeunes et âgés pour identifier les mécanismes induisant un délai dans la régénération alvéolaire.
Méthodes
Par l’utilisation d’outils d’analyses transcriptomiques (séquençage d’ARN sur cellules uniques et analyse transcriptomique spatiale), nous avons comparé le transcriptome de poumons de souris fibrosées jeunes et âgées en trois points de cinétique lors du pic de fibrose, des premières étapes de résolution et lors de la résolution complète de la maladie. Nous avons ensuite validé les résultats obtenus par hybridation in situ d’ARN et immunohistochimie sur coupes fines et épaisses de poumons fibrosées (mPCLS ; murine Precise Cut Lung Section).
Résultats
Lors du pic de fibrose, trois sous-populations de capillaires pulmonaires (PCEC), exprimant fortement le marqueur Lrg1, émergent et sont associés à une signature pro-angiogénique. Ces sous-populations disparaissent lors de la régénération alvéolaire chez les jeunes mais persistent chez les souris âgées. Le marqueur transitoire Lrg1 des PCEC apparaît impliqué dans l’activation des voies de signalisations pro-angiogéniques. Les PCEC issues de poumon de souris âgées présentent également un phénotype pro-inflammatoire et pré-fibrotique en condition physiologique. Enfin, nous observons un profil similaire chez les PCEC provenant d’échantillons de patients atteints de FPI avec une signature pro-angiogénique et pro-inflammatoire commune.
Conclusion
La reprogrammation transcriptomique des PCEC chez les souris âgées pourrait contribuer à la persistance de la fibrose, une caractéristique de la pathologie humaine. L’origine de ces PCEC et leur devenir après la résolution de la fibrose restent un enjeu dans la compréhension des mécanismes de régénération alvéolaire humaine.
{"title":"Impact de l’âge sur la reprogrammation des cellules endothéliales pulmonaires lors de la résolution de la fibrose pulmonaire","authors":"M. Gautier-Isola , M. Truchi , G. Savary , H. Cadis , A. Lingampally , C. Scribe , V. Magnone , M.-J. Arguel , C. de Schutter , J. Fassy , R. Rezzonico , V. Hofman , C.-H. Marquette , P. Hofman , A. Gunther , N. Ricard , P. Barbry , S. Leroy , K. Lebrigand , S. Bellusci , B. Mari","doi":"10.1016/j.rmr.2025.02.073","DOIUrl":"10.1016/j.rmr.2025.02.073","url":null,"abstract":"<div><h3>Introduction</h3><div>La fibrose pulmonaire idiopathique (FPI) est une maladie incurable qui se traduit par la formation de foci fibrotique, une accumulation et une rigidification de la matrice extracellulaire ainsi qu’une reprogrammation des cellules épithéliales et endothéliales (EC) pulmonaires. Bien que l’étiologie de la fibrose pulmonaire soit inconnue, nous savons que son incidence augmente avec l’âge. Afin d’étudier les processus de régénération, un modèle réversible in vivo par instillation de bléomycine permet de reproduire les différents aspects de la pathologie et de suivre les processus de régénération cellulaire. Les souris âgées présentent une résolution retardée de la fibrose pulmonaire par rapport aux souris jeunes. Dans ce contexte, nous cherchons à déterminer la signature transcriptomique des différentes composantes cellulaires d’une fibrose réversible induite par la bléomycine chez des souris jeunes et âgés pour identifier les mécanismes induisant un délai dans la régénération alvéolaire.</div></div><div><h3>Méthodes</h3><div>Par l’utilisation d’outils d’analyses transcriptomiques (séquençage d’ARN sur cellules uniques et analyse transcriptomique spatiale), nous avons comparé le transcriptome de poumons de souris fibrosées jeunes et âgées en trois points de cinétique lors du pic de fibrose, des premières étapes de résolution et lors de la résolution complète de la maladie. Nous avons ensuite validé les résultats obtenus par hybridation in situ d’ARN et immunohistochimie sur coupes fines et épaisses de poumons fibrosées (mPCLS ; murine Precise Cut Lung Section).</div></div><div><h3>Résultats</h3><div>Lors du pic de fibrose, trois sous-populations de capillaires pulmonaires (PCEC), exprimant fortement le marqueur Lrg1, émergent et sont associés à une signature pro-angiogénique. Ces sous-populations disparaissent lors de la régénération alvéolaire chez les jeunes mais persistent chez les souris âgées. Le marqueur transitoire Lrg1 des PCEC apparaît impliqué dans l’activation des voies de signalisations pro-angiogéniques. Les PCEC issues de poumon de souris âgées présentent également un phénotype pro-inflammatoire et pré-fibrotique en condition physiologique. Enfin, nous observons un profil similaire chez les PCEC provenant d’échantillons de patients atteints de FPI avec une signature pro-angiogénique et pro-inflammatoire commune.</div></div><div><h3>Conclusion</h3><div>La reprogrammation transcriptomique des PCEC chez les souris âgées pourrait contribuer à la persistance de la fibrose, une caractéristique de la pathologie humaine. L’origine de ces PCEC et leur devenir après la résolution de la fibrose restent un enjeu dans la compréhension des mécanismes de régénération alvéolaire humaine.</div></div>","PeriodicalId":21548,"journal":{"name":"Revue des maladies respiratoires","volume":"42 4","pages":"Page 218"},"PeriodicalIF":0.5,"publicationDate":"2025-04-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"143791532","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":4,"RegionCategory":"医学","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2025-04-01DOI: 10.1016/j.rmr.2025.02.067
D.D. Lobela Bumba , Y. Dia Kane , M.F. Cisse , A.L. Badji , A.D. Rassoul , N.F. Diouf , F.B.R. Mbaye , T.K. Thiam , N.O. Toure
<div><h3>Introduction</h3><div>En Afrique, le secteur de la santé présente des nombreux défis pour mettre fin à la pandémie du VIH. L’un des principaux défis est la nécessité d’associer la technologie et la santé grâce à la digitalisation du secteur. En effet, la réponse au VIH/sida exige des pays des approches innovantes pour se rapprocher de la réalisation des cibles 95-95-95 de l’ONUSIDA. Ainsi, au Sénégal, le module TRACKER VIH, a été développé en août 2021 par le Secrétariat exécutif du Conseil national de Lutte contre le Sida (CNLS) en collaboration avec la DSISS et la Division de Lutte contre le Sida (DLSI). Il permet la tenue à jour des bases de données nationales afin d’y inclure les nouveaux éléments des données, la diffusion régulière des données et la production périodique des rapports. L’objectif de cette étude était d’évaluer la prise en charge et le suivi des patients vivant avec le VIH sous traitement antirétroviral au service de pneumologie du CHNU de Fann, Dakar, avant l’ère du module TRACKER VIH. Elle va servir à une autre étude prospective évaluant l’apport du module sur la prise des PVVIH.</div></div><div><h3>Méthodes</h3><div>L’étude a été menée en juillet 2024, rétrospective, descriptive à visée analytique, par exploitation des dossiers de patients ≥<!--> <!-->18 ans hospitalisés de 2011 à 2024, soit une période de 13 ans, à la Clinique de Pneumologie du Centre Hospitalier National Universitaire (CHNU) de FANN. Cette dernière fait partie des sites de décentralisation de la prise en charge du VIH au niveau national.</div></div><div><h3>Résultats</h3><div>Au total, 118 patients ont été inclus. Une légère prédominance féminine était notée avec 54,7 %. L’âge médian à l’inclusion, était de 42 ans avec des extrêmes de 20 et 79 ans. Actuellement, l’âge médian était de 46,00 ans avec des extrêmes de 26,00 et 83,00 ans. Près de 59,8 % des patients provenait des banlieues de Dakar. Les patients étaient infectés dans 88,8 % des cas au VIH <span><span>[1]</span></span>. La moitié des patients (50 %) était à un stade clinique 3 et 34 % au stade clinique 4 de l’OMS au moment de l’inclusion ; et 13,7 % avaient un taux de CD<sub>4</sub>inférieur à 50 éléments/μL. Une co-infection à hépatite B était retrouvée chez 1,7 % des patients. Le motif d’accès en pneumologie était une détresse respiratoire aiguë chez 66,7 % des patients. La majorité des patients inscrits dans le site, soit 98,3 % était sous première ligne de TARV. Nous avons différé la mise sous INH chez 99,15 %. La prophylaxie au cotrimoxazole était initiée d’emblée chez 100 % de nos patients. Actuellement, 69,3 % des patients sont suivis, 4,3 % sont décédés. On notait, par ailleurs, un nombre croissant de perdus de vue, soit 26,5 %. (<span><span>Fig. 1</span></span>)</div></div><div><h3>Conclusion</h3><div>Malgré des efforts énormes de prise en charge et de suivi des PVVIH et des pathologies pulmonaires qui s’y associent, le nombre de perdus de vue reste croisant ; ce qui justifier
{"title":"Prise en charge de VIH/SIDA avant l’ère du module tracker VIH : exemple de la cohorte hospitalière du service de pneumologie du CHNU de Fann, à Dakar, Sénégal","authors":"D.D. Lobela Bumba , Y. Dia Kane , M.F. Cisse , A.L. Badji , A.D. Rassoul , N.F. Diouf , F.B.R. Mbaye , T.K. Thiam , N.O. Toure","doi":"10.1016/j.rmr.2025.02.067","DOIUrl":"10.1016/j.rmr.2025.02.067","url":null,"abstract":"<div><h3>Introduction</h3><div>En Afrique, le secteur de la santé présente des nombreux défis pour mettre fin à la pandémie du VIH. L’un des principaux défis est la nécessité d’associer la technologie et la santé grâce à la digitalisation du secteur. En effet, la réponse au VIH/sida exige des pays des approches innovantes pour se rapprocher de la réalisation des cibles 95-95-95 de l’ONUSIDA. Ainsi, au Sénégal, le module TRACKER VIH, a été développé en août 2021 par le Secrétariat exécutif du Conseil national de Lutte contre le Sida (CNLS) en collaboration avec la DSISS et la Division de Lutte contre le Sida (DLSI). Il permet la tenue à jour des bases de données nationales afin d’y inclure les nouveaux éléments des données, la diffusion régulière des données et la production périodique des rapports. L’objectif de cette étude était d’évaluer la prise en charge et le suivi des patients vivant avec le VIH sous traitement antirétroviral au service de pneumologie du CHNU de Fann, Dakar, avant l’ère du module TRACKER VIH. Elle va servir à une autre étude prospective évaluant l’apport du module sur la prise des PVVIH.</div></div><div><h3>Méthodes</h3><div>L’étude a été menée en juillet 2024, rétrospective, descriptive à visée analytique, par exploitation des dossiers de patients ≥<!--> <!-->18 ans hospitalisés de 2011 à 2024, soit une période de 13 ans, à la Clinique de Pneumologie du Centre Hospitalier National Universitaire (CHNU) de FANN. Cette dernière fait partie des sites de décentralisation de la prise en charge du VIH au niveau national.</div></div><div><h3>Résultats</h3><div>Au total, 118 patients ont été inclus. Une légère prédominance féminine était notée avec 54,7 %. L’âge médian à l’inclusion, était de 42 ans avec des extrêmes de 20 et 79 ans. Actuellement, l’âge médian était de 46,00 ans avec des extrêmes de 26,00 et 83,00 ans. Près de 59,8 % des patients provenait des banlieues de Dakar. Les patients étaient infectés dans 88,8 % des cas au VIH <span><span>[1]</span></span>. La moitié des patients (50 %) était à un stade clinique 3 et 34 % au stade clinique 4 de l’OMS au moment de l’inclusion ; et 13,7 % avaient un taux de CD<sub>4</sub>inférieur à 50 éléments/μL. Une co-infection à hépatite B était retrouvée chez 1,7 % des patients. Le motif d’accès en pneumologie était une détresse respiratoire aiguë chez 66,7 % des patients. La majorité des patients inscrits dans le site, soit 98,3 % était sous première ligne de TARV. Nous avons différé la mise sous INH chez 99,15 %. La prophylaxie au cotrimoxazole était initiée d’emblée chez 100 % de nos patients. Actuellement, 69,3 % des patients sont suivis, 4,3 % sont décédés. On notait, par ailleurs, un nombre croissant de perdus de vue, soit 26,5 %. (<span><span>Fig. 1</span></span>)</div></div><div><h3>Conclusion</h3><div>Malgré des efforts énormes de prise en charge et de suivi des PVVIH et des pathologies pulmonaires qui s’y associent, le nombre de perdus de vue reste croisant ; ce qui justifier","PeriodicalId":21548,"journal":{"name":"Revue des maladies respiratoires","volume":"42 4","pages":"Page 215"},"PeriodicalIF":0.5,"publicationDate":"2025-04-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"143791613","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":4,"RegionCategory":"医学","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2025-04-01DOI: 10.1016/j.rmr.2025.02.082
K. Kunene , M. Jaillet , I. Ba , C. Brasseur , A. Guyard , A. Cazes , C. Kannengiesser , A. Mailleux , P. Revy , R. Borie , B. Crestani , Q. Philippot
Introduction
La fibrose pulmonaire idiopathique (FPI) est la pneumopathie infiltrante diffuse idiopathique la plus fréquente et la plus grave. Environ 10 % des cas de FPI sont associés à des cas familiaux. Les variants hétérozygotes prédits délétères du gène « poly(A)-specific ribonuclease » (PARN) sont parmi les variants les plus fréquemment associés à des cas familiaux de fibrose pulmonaire familiale. Les phénomènes biologiques reliant les variants de PARN et le développement de la fibrose demeurent inconnus. L’objectif de ce travail est de tester l’impact de variants de PARN, prédits délétères et associés à des cas de fibrose pulmonaire, sur la fonction de PARN.
Méthodes
L’ADN complémentaire (ADNc) correspondant aux variants identifiés chez les patients a été généré. Le transfert de gène par lentivirus a été utilisé pour assurer l’expression stable de l’ADNc de PARN sauvage (WT) ou mutant dans une lignée cellulaire n’exprimant pas PARN (HT1080 PARN KO). Dans ces cellules, l’impact des variants sur la fonction de PARN a été évaluée.
Résultats
Nous avons étudié cinq patients atteints de fibrose pulmonaire issue de trois familles. P1 et P2 sont hétérozygotes pour le variant c. 937 G > T (p. E313*). P3 et P4 sont hétérozygotes pour le variant c. 1635delC (Y546Tfs19). P5 est hétérozygote pour le variant c. 1107TÀ (p. Y369). Pour définir l’impact des variants de PARN identifiés chez P1 à P5 sur la fonction de PARN, nous avons évalué l’expression de TERC dans des cellules HT1080PARN KO transduites avec l’ADNc de PARN sauvage ou codant ces variants. Après au moins 72 heures de culture en présence de doxycycline, l’ARNm a été extrait des cellules transduites, et le niveau de TERC a été évalué par PCR quantitative. Nos résultats préliminaires suggèrent une concentration de TERC plus faible dans les cellules transduites avec Q254* (contrôle négatif), par rapport aux cellules transduites avec l’ADNc PARN WT. Nous avons également observé des concentrations plus faibles de TERC dans les cellules transduites avec E313*, pY369* et Y546Ts19, par rapport aux cellules transduites avec l’ADNc PARN WT. Ces résultats suggèrent que les variants E313*, Y546Ts19 et pY369*, trouvés à l’état hétérozygote chez P1, P3/P4 et P5 respectivement, sont associés à une perte de fonction de PARN.
Conclusion
Les résultats obtenus au cours de ce projet sont à la base d’un travail de recherche translationnelle visant à développer un modèle pré-clinique de fibrose pulmonaire associée au défaut AD de PARN. Ce modèle nous permettra de comprendre la physiopathologie la fibrose pulmonaire associée au défaut autosomique dominant de PARN et de développer des traitements spécifiques et curatifs pour les patients.
{"title":"Caractérisation de l’impact moléculaire et cellulaire de variants de PARN associés à la fibrose pulmonaire","authors":"K. Kunene , M. Jaillet , I. Ba , C. Brasseur , A. Guyard , A. Cazes , C. Kannengiesser , A. Mailleux , P. Revy , R. Borie , B. Crestani , Q. Philippot","doi":"10.1016/j.rmr.2025.02.082","DOIUrl":"10.1016/j.rmr.2025.02.082","url":null,"abstract":"<div><h3>Introduction</h3><div>La fibrose pulmonaire idiopathique (FPI) est la pneumopathie infiltrante diffuse idiopathique la plus fréquente et la plus grave. Environ 10 % des cas de FPI sont associés à des cas familiaux. Les variants hétérozygotes prédits délétères du gène « <em>poly(A)-specific ribonuclease</em> » (<em>PARN</em>) sont parmi les variants les plus fréquemment associés à des cas familiaux de fibrose pulmonaire familiale. Les phénomènes biologiques reliant les variants de <em>PARN</em> et le développement de la fibrose demeurent inconnus. L’objectif de ce travail est de tester l’impact de variants de <em>PARN</em>, prédits délétères et associés à des cas de fibrose pulmonaire, sur la fonction de <em>PARN</em>.</div></div><div><h3>Méthodes</h3><div>L’ADN complémentaire (ADNc) correspondant aux variants identifiés chez les patients a été généré. Le transfert de gène par lentivirus a été utilisé pour assurer l’expression stable de l’ADNc de <em>PARN</em> sauvage (WT) ou mutant dans une lignée cellulaire n’exprimant pas <em>PARN</em> (HT1080 PARN KO). Dans ces cellules, l’impact des variants sur la fonction de <em>PARN</em> a été évaluée.</div></div><div><h3>Résultats</h3><div>Nous avons étudié cinq patients atteints de fibrose pulmonaire issue de trois familles. P1 et P2 sont hétérozygotes pour le variant c. 937 G<!--> <!-->><!--> <!-->T (p. E313*). P3 et P4 sont hétérozygotes pour le variant c. 1635delC (Y546Tfs19). P5 est hétérozygote pour le variant c. 1107TÀ (p. Y369). Pour définir l’impact des variants de <em>PARN</em> identifiés chez P1 à P5 sur la fonction de <em>PARN</em>, nous avons évalué l’expression de TERC dans des cellules HT1080PARN KO transduites avec l’ADNc de <em>PARN</em> sauvage ou codant ces variants. Après au moins 72<!--> <!-->heures de culture en présence de doxycycline, l’ARNm a été extrait des cellules transduites, et le niveau de TERC a été évalué par PCR quantitative. Nos résultats préliminaires suggèrent une concentration de TERC plus faible dans les cellules transduites avec Q254* (contrôle négatif), par rapport aux cellules transduites avec l’ADNc PARN WT. Nous avons également observé des concentrations plus faibles de TERC dans les cellules transduites avec E313*, pY369* et Y546Ts19, par rapport aux cellules transduites avec l’ADNc PARN WT. Ces résultats suggèrent que les variants E313*, Y546Ts19 et pY369*, trouvés à l’état hétérozygote chez P1, P3/P4 et P5 respectivement, sont associés à une perte de fonction de <em>PARN</em>.</div></div><div><h3>Conclusion</h3><div>Les résultats obtenus au cours de ce projet sont à la base d’un travail de recherche translationnelle visant à développer un modèle pré-clinique de fibrose pulmonaire associée au défaut AD de <em>PARN</em>. Ce modèle nous permettra de comprendre la physiopathologie la fibrose pulmonaire associée au défaut autosomique dominant de PARN et de développer des traitements spécifiques et curatifs pour les patients.</div></div>","PeriodicalId":21548,"journal":{"name":"Revue des maladies respiratoires","volume":"42 4","pages":"Pages 222-223"},"PeriodicalIF":0.5,"publicationDate":"2025-04-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"143791405","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":4,"RegionCategory":"医学","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2025-04-01DOI: 10.1016/j.rmr.2025.02.061
K.A. Sy , I. Valsecchi , M. Briottet , M. Vaudin , S. John , M. Faye , E.F. Barny , M. El Moustaphaoui , M. Ben Alaya , Y. Lellouche-Jacob , I. Satkunarasa , F. Botterel , V. Urbach
<div><h3>Introduction</h3><div>Inflammation is normally self-regulated by an active resolution phase, orchestrated by specialized pro-resolving mediators (SPMs) such as lipoxins (LX), resolvins (Rv), protectins (PD) and maresins. We recently showed that SPMs biosynthesis by airway epithelial cells is altered in cystic fibrosis (CF). CF is a genetic disease mainly characterized by airway chronic infection and excessive inflammation. Aspergillus fumigatus, a predominant filamentous fungus in CF is associated with lung injury and function decline. The consequences of the dysregulated SPMs biosynthesis on the colonization of the CF respiratory track by the filamentous fungi, A. fumigatus has not been investigated before this study.</div></div><div><h3>Methods</h3><div>We used human nasal epithelial primary cultures (hNEC) from CF and non-CF patients and the bronchial epithelial cell line (CFBE). We inoculated A. fumigatus (Af Dsred) conidia (MOI 1: 6.24<!--> <!-->h) on epithelial cells grown on plastic or at air-liquid interface, treated or not with SPMs (10<!--> <!-->nM). SPM receptors expression was studied by immunofluorescence. Fungal load was quantified by optical density using a microplate reader, by qPCR of gDNA, and using a galactomannan assay on the culture medium. Tight junctions were visualized using ZO-1 protein immunostaining. Antimicrobial peptides were explored using RTqPCR. The role of SPM receptors was evaluated using selective agonists and/or antagonists.</div></div><div><h3>Results</h3><div>On one hand, A. fumigatus infection for 24<!--> <!-->h disrupted most of the airway epithelial tight junctions. When cells were treated with SPMs (LXA4, LXB4, RvE1, RvD<sub>5</sub>and PD<sub>1</sub>) simultaneously with A. fumigatus, the epithelial tight junction integrity was significantly protected. The SPMs’ protecting effect on tight junctions was observed up to 12<!--> <!-->h after A. fumigatus exposure. The SPM protecting effect on tight junctions involved the G-protein coupled receptors, FPR2 (LXA4 and LXB4), GPR32 (RvD<sub>5</sub>and LXB4), ChemR23 (RvE1) and GPR37 (PD<sub>1</sub>) that we found to be expressed airway epithelial models. On the other hand, airway epithelium reduced A. fumigatus growth and secretion of one of its virulence factor galactomannan. The treatment of the airway epithelial cells with SPMs (LXA4, LXB4, RvE1, RvD<sub>2</sub>, RvD<sub>5</sub>, PD<sub>1</sub>) enhanced this latter effect with a further decrease of A. fumigatus galactomannan. Some SPMs as RvE1 stimulated the transcription of HBD<sub>2</sub>antimicrobial peptides.</div></div><div><h3>Conclusion</h3><div>Our results show that several SPMs stimulate the protecting role of epithelial cells in enhancing its barrier function. SPMs also reduce the secretion of galactomannan, which is an A. fumigatus virulence factor playing a critical role in biofilm formation. This suggests that the anomaly of SPMs biosynthesis in CF could significantly contribute to the re
{"title":"Impact of specialized pro-resolving lipid mediators on the colonization of CF respiratory epithelia by aspergillus fumigatus","authors":"K.A. Sy , I. Valsecchi , M. Briottet , M. Vaudin , S. John , M. Faye , E.F. Barny , M. El Moustaphaoui , M. Ben Alaya , Y. Lellouche-Jacob , I. Satkunarasa , F. Botterel , V. Urbach","doi":"10.1016/j.rmr.2025.02.061","DOIUrl":"10.1016/j.rmr.2025.02.061","url":null,"abstract":"<div><h3>Introduction</h3><div>Inflammation is normally self-regulated by an active resolution phase, orchestrated by specialized pro-resolving mediators (SPMs) such as lipoxins (LX), resolvins (Rv), protectins (PD) and maresins. We recently showed that SPMs biosynthesis by airway epithelial cells is altered in cystic fibrosis (CF). CF is a genetic disease mainly characterized by airway chronic infection and excessive inflammation. Aspergillus fumigatus, a predominant filamentous fungus in CF is associated with lung injury and function decline. The consequences of the dysregulated SPMs biosynthesis on the colonization of the CF respiratory track by the filamentous fungi, A. fumigatus has not been investigated before this study.</div></div><div><h3>Methods</h3><div>We used human nasal epithelial primary cultures (hNEC) from CF and non-CF patients and the bronchial epithelial cell line (CFBE). We inoculated A. fumigatus (Af Dsred) conidia (MOI 1: 6.24<!--> <!-->h) on epithelial cells grown on plastic or at air-liquid interface, treated or not with SPMs (10<!--> <!-->nM). SPM receptors expression was studied by immunofluorescence. Fungal load was quantified by optical density using a microplate reader, by qPCR of gDNA, and using a galactomannan assay on the culture medium. Tight junctions were visualized using ZO-1 protein immunostaining. Antimicrobial peptides were explored using RTqPCR. The role of SPM receptors was evaluated using selective agonists and/or antagonists.</div></div><div><h3>Results</h3><div>On one hand, A. fumigatus infection for 24<!--> <!-->h disrupted most of the airway epithelial tight junctions. When cells were treated with SPMs (LXA4, LXB4, RvE1, RvD<sub>5</sub>and PD<sub>1</sub>) simultaneously with A. fumigatus, the epithelial tight junction integrity was significantly protected. The SPMs’ protecting effect on tight junctions was observed up to 12<!--> <!-->h after A. fumigatus exposure. The SPM protecting effect on tight junctions involved the G-protein coupled receptors, FPR2 (LXA4 and LXB4), GPR32 (RvD<sub>5</sub>and LXB4), ChemR23 (RvE1) and GPR37 (PD<sub>1</sub>) that we found to be expressed airway epithelial models. On the other hand, airway epithelium reduced A. fumigatus growth and secretion of one of its virulence factor galactomannan. The treatment of the airway epithelial cells with SPMs (LXA4, LXB4, RvE1, RvD<sub>2</sub>, RvD<sub>5</sub>, PD<sub>1</sub>) enhanced this latter effect with a further decrease of A. fumigatus galactomannan. Some SPMs as RvE1 stimulated the transcription of HBD<sub>2</sub>antimicrobial peptides.</div></div><div><h3>Conclusion</h3><div>Our results show that several SPMs stimulate the protecting role of epithelial cells in enhancing its barrier function. SPMs also reduce the secretion of galactomannan, which is an A. fumigatus virulence factor playing a critical role in biofilm formation. This suggests that the anomaly of SPMs biosynthesis in CF could significantly contribute to the re","PeriodicalId":21548,"journal":{"name":"Revue des maladies respiratoires","volume":"42 4","pages":"Page 212"},"PeriodicalIF":0.5,"publicationDate":"2025-04-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"143791603","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":4,"RegionCategory":"医学","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2025-04-01DOI: 10.1016/j.rmr.2025.02.066
D. Lobela Bumba , Y. Dia Kane , M.F. Cisse , A.L. Badji , A.D. Rassoul , N.F. Diouf , F.B.R. Mbaye , K. Thiam , N.O. Toure
Introduction
Des efforts énormes de prise en charge et de suivi des PVVIH et des pathologies pulmonaires qui s’y associent sont notés. L’objectif de cette étude était d’analyser les déterminants des issues favorables chez les PVVIH en traitement ARV dans la cohorte hospitalière de la clinique de pneumologie.
Méthodes
Une étude cas-témoins réalisée sur une Cohorte hospitalière et externe ouverte depuis 2011. Les données cliniques ont été collectées de manière prospective auprès des patients recevant un traitement antirétroviral à la Clinique de Pneumologie du Centre Hospitalier National Universitaire (CHNU) de Fann. Ce dernier fait partie des sites de décentralisation de la prise en charge du VIH au niveau national. Au total, 118 patients ont été inclus. Le diagnostic du VIH a été posé suivant l’algorithme de dépistage à 3 tests. Les facteurs prédictifs d’une issue favorable ont été identifiés grâce à l’analyse par régression logistique et linéaire.
Résultats
Plus l’âge augmente, le taux de CD4diminue sans corrélation statistiquement significative (p = 0,19). De surcroît une fois inscrit au TARV, au fur et à mesure que l’âge avance, on a moins de risque d’une issue défavorable (OR 0,96; IC 95 %: OR 0,93–1; p = 0,013), au tant, lorsqu’on habite Dakar (OR 0,95; IC 95 %: (0,92–0,98); (p = 0,017). Le gain pondéral au cours des suivis s’avère indistinctement protecteur (OR 0,97; IC 95 %: (0,97–1); (p = 0,017) (Fig. 1).
Conclusion
En dépit du fait que le CD4 à l’inclusion soit plus bas chez les sujets âgés, une fois inscrit au TARV, l’âge avancé, le gain pondéral et la résidence à Dakar s’avèrent protecteur. Vieillir avec le VIH est donc possible. Ce qui justifierait l’intérêt de développer et d’étendre des programmes tel que vieillir avec le VIH au Sénégal.
{"title":"Facteurs associés aux issues favorables des PVVIH suivis sous ARV dans la cohorte hospitalière de la clinique de pneumologie à Dakar, Sénégal","authors":"D. Lobela Bumba , Y. Dia Kane , M.F. Cisse , A.L. Badji , A.D. Rassoul , N.F. Diouf , F.B.R. Mbaye , K. Thiam , N.O. Toure","doi":"10.1016/j.rmr.2025.02.066","DOIUrl":"10.1016/j.rmr.2025.02.066","url":null,"abstract":"<div><h3>Introduction</h3><div>Des efforts énormes de prise en charge et de suivi des PVVIH et des pathologies pulmonaires qui s’y associent sont notés. L’objectif de cette étude était d’analyser les déterminants des issues favorables chez les PVVIH en traitement ARV dans la cohorte hospitalière de la clinique de pneumologie.</div></div><div><h3>Méthodes</h3><div>Une étude cas-témoins réalisée sur une Cohorte hospitalière et externe ouverte depuis 2011. Les données cliniques ont été collectées de manière prospective auprès des patients recevant un traitement antirétroviral à la Clinique de Pneumologie du Centre Hospitalier National Universitaire (CHNU) de Fann. Ce dernier fait partie des sites de décentralisation de la prise en charge du VIH au niveau national. Au total, 118 patients ont été inclus. Le diagnostic du VIH a été posé suivant l’algorithme de dépistage à 3 tests. Les facteurs prédictifs d’une issue favorable ont été identifiés grâce à l’analyse par régression logistique et linéaire.</div></div><div><h3>Résultats</h3><div>Plus l’âge augmente, le taux de CD<sub>4</sub>diminue sans corrélation statistiquement significative (<em>p</em> <!-->=<!--> <!-->0,19). De surcroît une fois inscrit au TARV, au fur et à mesure que l’âge avance, on a moins de risque d’une issue défavorable (OR 0,96; IC 95 %: OR 0,93–1; <em>p</em> <!-->=<!--> <!-->0,013), au tant, lorsqu’on habite Dakar (OR 0,95; IC 95 %: (0,92–0,98); (<em>p</em> <!-->=<!--> <!-->0,017). Le gain pondéral au cours des suivis s’avère indistinctement protecteur (OR 0,97; IC 95 %: (0,97–1); (<em>p</em> <!-->=<!--> <!-->0,017) (<span><span>Fig. 1</span></span>).</div></div><div><h3>Conclusion</h3><div>En dépit du fait que le CD<sub>4</sub> à l’inclusion soit plus bas chez les sujets âgés, une fois inscrit au TARV, l’âge avancé, le gain pondéral et la résidence à Dakar s’avèrent protecteur. Vieillir avec le VIH est donc possible. Ce qui justifierait l’intérêt de développer et d’étendre des programmes tel que vieillir avec le VIH au Sénégal.</div></div>","PeriodicalId":21548,"journal":{"name":"Revue des maladies respiratoires","volume":"42 4","pages":"Pages 214-215"},"PeriodicalIF":0.5,"publicationDate":"2025-04-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"143791612","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":4,"RegionCategory":"医学","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
Pub Date : 2025-04-01DOI: 10.1016/j.rmr.2025.02.079
G. Dargentolle , L. Biziorek , G. Beltramo , D. Schenesse , L. Dondaine , C. Garrido , P. Bonniaud , P.-S. Bellaye , F. Goirand , O. Burgy
Introduction
La fibrose pulmonaire idiopathique (FPI) est une pathologie progressive impliquant une communication intercellulaire aberrante. Au cours de la FPI, les vésicules extracellulaires (VEs) s’accumulent au niveau pulmonaire et transportent des molécules actives telles que les protéines de choc thermiques (HSP). Nous explorons si les HSP liées aux VEs contribuent à la progression de la FPI.
Méthodes
Les VEs ont été isolées par ultracentrifugation de liquides broncho-alvéolaires (LBA) de souris exposées (ou non) à la bléomycine, ainsi que des milieux de culture de fibroblastes NIH-3T3 Hsp90-/- ou contrôle. Les effets fonctionnels des VEs ont été testés sur plusieurs modèles expérimentaux (coupes de tissu pulmonaire cultivées ex vivo et modèle in vivo de fibrose induite par la bléomycine) avec analyses transcriptomiques et microscopiques. Les cellules réceptrices des VEs ont été étudiées par cytométrie en flux. HSP90 extracellulaire a été monitorée in vivo dans le modèle bléomycine par imagerie scanner SPECT.
Résultats
Les VEs issues de liquides broncho-alvéolaires de souris avec fibrose pulmonaire portent plus d’HSP90 à la surface des VEs comparé à des vésicules issues de souris contrôles. HSP90 n’est pas retrouvée dans les fractions non vésiculaires des LBA (western blot). Dans notre modèle de coupes de poumons, les VEs de NIH-3T3 Hsp90-/-, ou des VEs de LBA de souris avec fibrose et incubées avec un anticorps bloquant HSP90, ont une activité pro-fibrosante diminuée comparé à des vésicules contrôles : diminution de Fn1 (p = 0,03), Cola1a (p < 0,01) et diminution du signal de seconde harmonique (p < 0,001). In vivo, le transfert de vésicules de fibroblastes activés entrainait une exacerbation de la fibrose induite par la bléomycine (mesures histomorphométriques). Après injection oropharyngée à des souris exposées à la bléomcyine, des VEs issues de LBA de souris avec fibrose pulmonaire étaient captées par des cellules F4/80+ CMHII+ C206+ (55 % ± 6,3 %, n = 6). Une augmentation d’HSP90 dans le poumon a été observée par SPECT chez les souris préalablement exposées à la bléomycine comparé à des souris contrôles.
Conclusion
Au cours de la fibrose, HSP90 s’accumule dans les VEs et est présent à leur surface. Les VEs portant HSP90 semblent médier une communication intercellulaire anormale qui pourrait être impliquée dans le développement de la fibrose. Le mécanisme d’action expliquant comment HSP90 vésiculaire aggrave la fibrose reste encore à identifier.
{"title":"Les vésicules extracellulaires transportent HSP90 et aggravent la fibrose pulmonaire","authors":"G. Dargentolle , L. Biziorek , G. Beltramo , D. Schenesse , L. Dondaine , C. Garrido , P. Bonniaud , P.-S. Bellaye , F. Goirand , O. Burgy","doi":"10.1016/j.rmr.2025.02.079","DOIUrl":"10.1016/j.rmr.2025.02.079","url":null,"abstract":"<div><h3>Introduction</h3><div>La fibrose pulmonaire idiopathique (FPI) est une pathologie progressive impliquant une communication intercellulaire aberrante. Au cours de la FPI, les vésicules extracellulaires (VEs) s’accumulent au niveau pulmonaire et transportent des molécules actives telles que les protéines de choc thermiques (HSP). Nous explorons si les HSP liées aux VEs contribuent à la progression de la FPI.</div></div><div><h3>Méthodes</h3><div>Les VEs ont été isolées par ultracentrifugation de liquides broncho-alvéolaires (LBA) de souris exposées (ou non) à la bléomycine, ainsi que des milieux de culture de fibroblastes NIH-3T3 Hsp90-/- ou contrôle. Les effets fonctionnels des VEs ont été testés sur plusieurs modèles expérimentaux (coupes de tissu pulmonaire cultivées ex vivo et modèle in vivo de fibrose induite par la bléomycine) avec analyses transcriptomiques et microscopiques. Les cellules réceptrices des VEs ont été étudiées par cytométrie en flux. HSP90 extracellulaire a été monitorée in vivo dans le modèle bléomycine par imagerie scanner SPECT.</div></div><div><h3>Résultats</h3><div>Les VEs issues de liquides broncho-alvéolaires de souris avec fibrose pulmonaire portent plus d’HSP90 à la surface des VEs comparé à des vésicules issues de souris contrôles. HSP90 n’est pas retrouvée dans les fractions non vésiculaires des LBA (western blot). Dans notre modèle de coupes de poumons, les VEs de NIH-3T3 Hsp90-/-, ou des VEs de LBA de souris avec fibrose et incubées avec un anticorps bloquant HSP90, ont une activité pro-fibrosante diminuée comparé à des vésicules contrôles : diminution de Fn1 (<em>p</em> <!-->=<!--> <!-->0,03), Cola1a (<em>p <!--> </em><<!--> <!-->0,01) et diminution du signal de seconde harmonique (<em>p</em> <!--><<!--> <!-->0,001). In vivo, le transfert de vésicules de fibroblastes activés entrainait une exacerbation de la fibrose induite par la bléomycine (mesures histomorphométriques). Après injection oropharyngée à des souris exposées à la bléomcyine, des VEs issues de LBA de souris avec fibrose pulmonaire étaient captées par des cellules F4/80+ CMHII+ C206+ (55 %<!--> <!-->±<!--> <!-->6,3 %, <em>n</em> <!-->=<!--> <!-->6). Une augmentation d’HSP90 dans le poumon a été observée par SPECT chez les souris préalablement exposées à la bléomycine comparé à des souris contrôles.</div></div><div><h3>Conclusion</h3><div>Au cours de la fibrose, HSP90 s’accumule dans les VEs et est présent à leur surface. Les VEs portant HSP90 semblent médier une communication intercellulaire anormale qui pourrait être impliquée dans le développement de la fibrose. Le mécanisme d’action expliquant comment HSP90 vésiculaire aggrave la fibrose reste encore à identifier.</div></div>","PeriodicalId":21548,"journal":{"name":"Revue des maladies respiratoires","volume":"42 4","pages":"Page 221"},"PeriodicalIF":0.5,"publicationDate":"2025-04-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":null,"resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":"143791535","PeriodicalName":null,"FirstCategoryId":null,"ListUrlMain":null,"RegionNum":4,"RegionCategory":"医学","ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":"","EPubDate":null,"PubModel":null,"JCR":null,"JCRName":null,"Score":null,"Total":0}
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